Obtención de

ácido cítrico y
otros ácidos
Elaborado por:
-Natalia Rodríguez Rodríguez
-Juliana Paola Rozo Archila
-Nicolás Ramírez Celis
Ciclo de los ácidos tricarboxílicos o de Krebs.
Ruta metabólica que forma parte de la respiración celular aerobia.

Vía de oxidación de la mayor parte de carbohidratos, ácidos grasos y

aminoácidos generando metabolitos intermediarios para otras rutas
metabólicas.

Ocurre en la mitocondria

Participan 8 enzimas: oxidan el grupo acetilo del Acetil-CoA a 2 moléculas

de CO2, generando 3 moléculas de NADH, 1 de FADH2, y 1 de GTP.

Tomado de: El ciclo de los ácidos tricarboxílicos - 2009

Tomado de: El
ciclo de los
ácidos
tricarboxílicos -
2009
Enzimas implicadas:
1.Citrato sintasa
2. Aconitasa
3 y 4.. Isocitrato
deshidrogenasa
5. α- oxoglutarato
deshidrogenasa
6. Succinil CoA sintetasa
7. Succinato
deshidrogenasa
8. Fumarasa
9. Malato
deshidrogenasa

Tomado de: El ciclo de los ácidos

tricarboxílicos - 2009
 Ácido cítrico
Ácido orgánico tricarboxílico que está presente
en la mayoría de las frutas, sobre todo en
cítricos como el limón y la naranja. Su fórmula
química es C6H8O7

Producido principalmente por

Producto conocido por sus
fermentación sumergida utilizando
propiedades como acidulante
diversos microorganismos capaces de
y preservante que contribuye a
degradar materias primas como
asegurar el sabor original, la
almidón, sacarosa y residuos
apariencia natural y la
agro-industriales como bagazo, mieles
consistencia de los productos.
finales de caña, suero de leche y otros.

Tomado de: Oportunidades de producción de ácido cítrico por vía fermentativa a partir de sustratos azucarados en Cuba- 2016
 Tipos de fermentación utilizadas
Fermentación de
Fermentación sumergida
superficie

Técnica más usada.

Costo de energía inferiores
Ventajas: alto rendimiento,
Mayor mano de obra
elevada productividad, bajo
Se les proporciona una
costo obra de mano.
circulación de aire eficaz para
Fermentadores:
controlar la temperatura y la
-fermentador convencional con
humedad, deben estar en
agitación
condiciones asépticas
-fermentador columna de aire:
principalmente durante los
más usado
primeros dos días cuando las
Puede ser batch o fed batch
esporas germinan.
Tomado de: Oportunidades de producción de ácido cítrico por vía fermentativa a partir de sustratos azucarados en Cuba- 2016
 Fermentación en estado sólido

-Consiste en el crecimiento de microorganismos sobre partículas

sólidas en ausencia de agua libre en el sistema.

-La extracción de calor metabólico puede convertirse en un problema

cuando se trabaja a escala de producción, la velocidad de crecimiento
de los microorganismos es menor que en la fermentación sumergida y
su aplicación se encuentra limitada a microorganismos
(fundamentalmente hongos) que pueden desarrollarse en ambientes
de baja humedad

Tomado de: Oportunidades de producción de ácido cítrico por vía fermentativa a partir de sustratos azucarados en Cuba- 2016
Microorganismos productores de ácido cítrico
Géneros como: Aspergillus, Citromyces, Penicillium, Monilia, Candida, Pichia,
Yarrowia lipolytica
Más utilizado Aspergillus niger

Las especies más efectivas son las que

presentan baja actividad de las enzimas
aconitasa e isocitrato deshidrogenasa
y una alta actividad de la citrato sintasa
Proceso de
obtención de
ácido cítrico por
Aspergillus niger
Preparación del sustrato: Pasteurización:
Melaza El jarabe es sometido a un proceso
Purificación del jarabe. de pasteurización que consiste en
Se inicia mezclando el jarabe elevar la temperatura a 105°C
con agua para diluirlo; una vez durante tres minutos y bajarla
diluido se pasa por un filtro de nuevamente hasta 37°C. La
vacío para eliminar los sólidos pasteurización se lleva a cabo
suspendidos y las impurezas primero en un calentador de
de la melaza. Luego el jarabe evaporación instantánea, después
es pasado por una celda de se utiliza un circuito de
intercambio iónico para retirar acumulación y un enfriador de
los iones del flujo. jarabe.
 pH bajo favorece la producción de ácido cítrico,
Fermentación: 6 días suprime la de oxálico, reduce al mínimo el
-El jarabe es bombeado al peligro de contaminaciones y facilita la
esterilización.
fermentador.
El intervalo de pH más satisfactorio es de 4-6. 96
-Ocurre la transformación de la
horas después el pH se mantiene debajo de 2.
sacarosa en ácido cítrico por Temperatura: 25°C y 35°C.
medio del Aspergillus Níger que Aireación: Para cultivos de superficie: 200 ml de
va a ser inoculado. aire por hora y por gramo de micelio. Para
-Se añaden nutrientes como procesos a micelio sumergido disolver más de
amonio y sales 100 mg de O2 por litro y por minuto.

Filtración:
Luego de la fermentación, el flujo es pasado por un filtro rotatorio al vacío
para separar el micelio. La masa conformada por el micelio y el
microorganismo muerto se denomina biomasa o torta y constituye un
subproducto o un efluente del proceso
Purificación del ácido cítrico: Cal-sulfúrico: se basa en tratar el
El ácido cítrico debe ser separado del
subproducto con hidróxido de Ca o
micelio, el microorganismo muerto, el
azúcar residual, las proteínas cal de lo cual se forma citrato de
producidas por la fermentación y calcio. Este citrato resultante es
otras impurezas solubles. lavado y el micelio es filtrado.
Para lo cual se lleva a cabo el proceso
denominado cal-sulfúrico.

Se añade ácido sulfúrico para descomponer el citrato de

calcio. Por lo tanto en esta etapa se forma sulfato de calcio el
cual es retirado de la solución por medio de un filtro rotatorio
al vacío y se constituye como un desperdicio o como un
subproducto del proceso
Celdas primarias de carbón
activado: Cristalización:
En estas celdas son En este proceso se separan los cristales formados
removidas las impurezas del líquido saturado que se denomina licor
solubles que producen color madre. Los cristales de ácido cítrico húmedos se
a la solución de Ácido Cítrico redisuelven y se recristalizan al vacío. Luego
y en general sustancias pasan a la centrífuga en donde es eliminado el
orgánicas contenidas en el licor madre de los cristales formados.
licor.
-Se usan celdas de resinas de
intercambio iónico para
eliminar iones de calcio.
-Evaporadores: retiran H2O

Clasificación: Aquí se Secado: Se realiza en un

separan en tres equipo que permite retirar
Empaque
presentaciones (cristal, humedad hasta cumplir con
granular y granular fino) las especificaciones
Producción de ácido
cítrico a partir de
Yarrowia lipolytica
Licor de Maíz

Acetil CoA
carboxilasa

ATP citrato
liasa
 Cuando el suministro de piruvato es
Es una sustancia compleja, suficiente, el suministro de oxalacetato a
que es alta en aminoácidos, través de la vía anaplerótica se convierte
Licor de maíz vitaminas y polipéptidos, que en el cuello de botella del rendimiento de
son excelentes fuentes de AC. La enzima clave involucrada en la vía
nitrógeno orgánico anaplerótica es la piruvato carboxilasa
dependiente de la biotina, y la citrato
sintasa rica en biotina
El extracto de levadura
es un componente
La diferencia más
costoso del medio de
notable es el aumento en
fermentación de AC
la tasa de absorción de
sustrato y la producción
de AC
 Proceso de
obtención de
ácido cítrico a
partir de limones
 Los limones son exprimidos y
desmenuzados en cilindros
Extracción del estrujadores. El jugo obtenido se
zumo pasa por una prensa para eliminar
los residuos como semillas, cáscara
y mucílago

El zumo contiene azúcar, sustancias

gomosas (mucílago) y albuminoides
así que se deja en reposo 3 días
Fermentación para que el azúcar se fermente. Las
otras sustancias se separan y el
jugo se clarifica

Una vez clarificado, el jugo se

Destilación destila para separar el alcohol
producido por la fermentación
 El jugo libre de alcohol pasa a
los evaporadores donde se
Concentración concentra al vacío hasta llevarlo
a una concentración del 50% de
ácido cítrico

El zumo concentrado es llevado a

una temperatura cercana al punto
de ebullición y se mezcla agitando
Formación del
poco a poco con cal apagada
citrato de calcio (Ca(OH)2), haciendo que el ácido
cítrico sea precipitado al estado de
citrato cálcico
 El citrato cálcico se descompone con ácido
sulfúrico al 35% a T° 70-80°C. El flujo es
Descomposición
pasado por un filtro para separar el sulfato
del citrato cálcico precipitado en forma de yeso pasando
luego por un recipiente para ser decolorado

Este líquido pasa a evaporador de vacío; Luego,

se deja en una caja clarificadora para que el
yeso que estaba disuelto se precipite. Se deja
en un evaporador de vacío durante 24h. Pasa a
ser agitado en frío durante 2 días. A partir de
aquí se empiezan a formar cristales granulados
que son separados por centrifugación
Se filtra para retirar el carbón y es
lavado. Es llevado a un cristalizador de
vacío donde se forman costras
cristalinas las cuales se van a Los cristales se disuelven para añadirles
centrifugar para retirar todo el líquido carborafina o carbón de madera la cual sirve
posible. Se vierten sobre bandas de para quitar los metales pesados disueltos
papel y se desecan algunos días a 22°C
y luego se envasan en recipientes, para
ser almacenados
Principales
usos de
ácido cítrico
Obtención de ácido glutámico
a partir de Corynebacterium
glutamicum
Biosíntesis de ácido glutámico utilizando
glucosa como fuente de carbono.
1) Enzima málica
2) Oxalacetato carboxilasa
3) Isocitrato deshidrogenasa
4) Isocitrato liasa
5) Ácido glutámico deshidrogenasa
6) Glutamina sintetasa

Requiere biotina para su

crecimiento
En condiciones óptimas para la producción de
á. glutámico, la glucosa es degradada por el
microorganismo a fragmentos C3 y C2 a través
de la vía glucolítica, la vía de las pentosa
fosfato, y los fragmentos canalizados al ciclo El precursor clave del á. glutámico es el
de los ácidos tricarboxílicos (TCA) α-cetoglutarato, que se forma en el ciclo TCA vía
citrato e isocitrato y luego se convierte en ácido
L-glutámico por aminación reductiva con iones
NH4+ libres. Esta última etapa es catalizada por la
enzima glutamato deshidrogenasa que es NADP
dependiente. El NADPH2 requerido en esta etapa
Las bacterias que producen á. glutámico es proporcionado por la oxidación
convierten aprox. el 50-60% de la fuente de descarboxilativa previa del isocitrato a
carbono añadida en el aminoácido. Si se α-cetoglutarato por la enzima isocitrato
utilizan condiciones de fermentación menos deshidrogenasa. El NADPH2 es luego regenerado
favorables, de forma que se obtenga una baja por la aminación reductiva de α-cetoglutarato
producción de á. glutámico, se observa un
aumento en la masa celular y secreción de
lactato, succinato, α-cetoglutarato, glutamina y
N-acetilglutamina
 Recuperación y
Hidrólisis ácida Proceso de fermentación
purificación

Terminado el proceso
Los azúcares reductores del
fermentativo se centrifuga a
raquis de palma de aceite se Se utiliza como fuente de
10.000 rpm por 10 min para
usa como sustrato del carbono los azúcares
separar el material celular del
microorganismo reductores presentes en el
sobrenadante; luego se decolora
Corynebacterium glutamicum en hidrolizado. Como fuente de
con carbón activado, se filtra y se
la obtención de ácido nitrógeno se utiliza sulfato de
acidifica con HCl 4N hasta
L-glutámico. Los hidrolizados amonio (NH4)2SO4 . El proceso
alcanzar el punto isoeléctrico del
se filtran para separar las fermentativo se lleva a cabo por
ácido glutámico. Se concentra la
fibras de raquis, se decoloran un periodo de 96 h en donde se
fase líquida a una t° de 70°C y se
con carbón activado y se realizan controles cada 24 h,
deja precipitar a T.A. formando
guardan en frascos ámbar bajo para cuantificar el consumo de
cristales, los cuales se aislan por
refrigeración para ser azúcares y la producción del
filtración, se secan a 60°C y
utilizados en el proceso aminoácido
finalmente se pesan para
fermentativo
determinar el rendimiento del
proceso
 Proceso de obtención de
ácido succínico a partir de
E. coli o Actinobacillus
succinogenes
El ácido succínico o ácido butanodioico, es una molécula que puede ser transformada en un
amplia gama de productos quimicos y polimeros. Su obtención puede tener base
petroquímica o biológica

Se presenta en forma de polvo blanco, sin olor y soluble en agua.

Se encuentra en la naturaleza formando parte de diversas frutas como las uvas y el

albaricoque verde
Se obtiene a través de la fermentación en biorreactores de glucosa
procedente de materias primas renovables
E. coli
1. Conversión de glucosa a
glucosa-6-fosfato por la
enzima hexoquinasa
2. Se obtiene
fosfoenol-piruvato
3. Con CO2 se favorece la
producción de ac.
succínico si no está
presente toma otra vía
metabólica
4. Hidrogenación, se produce
malato
5. Se convierte en fumarato,
se elimina H2O.
6. Se forma el ac. succínico
Actinobacillus
succinogenes

Bacteria anaerobia
facultativa, mesofílica,
pleomórfica, Gram
negativa, de la familia
Pasteurellaceae.

Puede llevar a cabo la

fermentación a partir de un
amplio número de fuentes
como suero lácteo, trigo,
entre otras.
 Proceso de obtención de
ácido fumárico a partir de
Rhizopus

Entre sus usos directos, se pueden mencionar:

agente acidulante en alimentos y bebidas,
aditivo en piensos de alimentación animal y
mordiente en procesos de tinte.

Producciones máximas de ácido fumárico

cercanas a 100 g/L, con rendimientos
superiores a 0,8 g por g de glucosa consumida y
productividades de más de 4 g/L/h
Proceso de obtención de
ácido málico a partir de
Aspergillus flavus
Se usa principalmente como aditivo
alimentario acidulante y
aromatizante y, en menor medida,
en cosmética y farmacia

Se han alcanzado rendimientos de Mediante ingeniería metabólica cepas

hasta el 128%, en términos de recombinantes de la bacteria E. coli son
moles producidos por mol de capaces de producir hasta 0,5M de ácido
glucosa consumida, o del 95% en málico, con un rendimiento de 1,4 moles por
base al peso mol de glucosa consumida
 Proceso de obtención de
ácido cis,cis-mucónico a
partir de una cepa
recombinante de E. coli
El flujo del carbono dirigido hacia la ruta
común de síntesis de aminoácidos
aromáticos sea desviado hacia la
síntesis de ácido cis,cis-mucónico.

Producciones de ácido
cis,cis-mucónico cercanas a 37 g/L,
correspondientes a rendimientos del
22% (en mol/mol de glucosa
consumida)
 Proceso de obtención de
ácido 3-hidroxi-propionico
a partir de una cepa
recombinante de E. coli
Se utiliza actualmente como aditivo
alimenticio, nutracéutico y suplemento
para el control del peso.

Su rendimiento es de 0,75 g por

gramo de glucosa consumida (77,9%
del máximo teórico) y una
productividad de 1,2 g/L/h, alcanzando
concentraciones del ácido de hasta
749 mM.
Otros
ácidos
Aplicaciones
Referencias bibliográficas
- Oportunidades de producción de ácido cítrico por vía fermentativa a partir de
sustratos azucarados en Cuba. Navarro Pérez. 2016. Tomado de:
http://scielo.sld.cu/pdf/caz/v43n2/caz09216.pdf
- Historia del ácido cítrico. 2017. Tomado de:
https://www.monografias.com/trabajos17/acido-citrico/acido-citrico.shtml
- Acid citric. 2009. Tomado de: https://es.slideshare.net/copolas/acid-citrico-1684592
- Citric acid production by Yarrowia lipolytica SWJ-1b using corn steep liquor as a
source of organic nitrogen and vitamins. 2015. tomado de:
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0926669015304726?via%3Dihu
b
- Obtención y purificación de ácido glutámico a partir de hidrolizados de raquis de
palma africana (Elaeis guineensis), por fermentación con la bacteria Corynebacterium
glutamicum ATCC 13032. 2017. tomado de:
http://sired.udenar.edu.co/3808/1/tg_ANDREA_ROSERO_BERNAL.pdf
- Ramos A. Valorización biotecnológica de subproductos/residuos industriales:
producción de ácido succínico y ácido láctico. 2015. Tomado de:
https://uvadoc.uva.es/bitstream/10324/14026/1/TFG-I-283.pdf
- El ciclo de los ácidos tricarboxílicos - 2009. Tomado de:
https://academiaarcija.files.wordpress.com/2009/05/ciclo-de-krebs-corto.pdf
-