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    Toma de Muestras

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    Daniela Gaitan
    Este documento describe diferentes tipos de muestras, incluyendo tejidos, fluidos y muestras de sangre. Explica que el volumen y duración de las muestras depende del elemento analizado y la técnica de laboratorio utilizada. También cubre el uso de aditivos como anticoagulantes para preservar las muestras sin alterar su composición. Finalmente, identifica posibles causas de variación en las muestras, tanto in vivo como durante su obtención e manipulación en el laboratorio.

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    Toma de Muestras

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    Daniela Gaitan
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    Este documento describe diferentes tipos de muestras, incluyendo tejidos, fluidos y muestras de sangre. Explica que el volumen y duración de las muestras depende del elemento analizado y la técnica de laboratorio utilizada. También cubre el uso de aditivos como anticoagulantes para preservar las muestras sin alterar su composición. Finalmente, identifica posibles causas de variación en las muestras, tanto in vivo como durante su obtención e manipulación en el laboratorio.

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    toma de muestras

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    Este documento describe diferentes tipos de muestras, incluyendo tejidos, fluidos y muestras de sangre. Explica que el volumen y duración de las muestras depende del elemento analizado y la técnica de laboratorio utilizada. También cubre el uso de aditivos como anticoagulantes para preservar las muestras sin alterar su composición. Finalmente, identifica posibles causas de variación en las muestras, tanto in vivo como durante su obtención e manipulación en el laboratorio.

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    Toma de Muestras

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    Daniela Gaitan
    Este documento describe diferentes tipos de muestras, incluyendo tejidos, fluidos y muestras de sangre. Explica que el volumen y duración de las muestras depende del elemento analizado y la técnica de laboratorio utilizada. También cubre el uso de aditivos como anticoagulantes para preservar las muestras sin alterar su composición. Finalmente, identifica posibles causas de variación en las muestras, tanto in vivo como durante su obtención e manipulación en el laboratorio.

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    MUESTRAS

    Juliana Loaiza Escobar M.V.Z Esp.Msc ©

    Porción representativa de una parte de un


    fluido o tejido obtenido de un individuo o de un
    rebaño en estudio clínico o experimental
    La muestra varía de acuerdo al elemento a
    analizar y la metodología empleada en cada
    laboratorio.
    TIPOS DE MUESTRAS

    Tejidos:
    Biopsia
    Quirúrgica
    Punción con aguja para citodiagnóstico
    Sangre: entera, plasma, suero
    Raspado de piel - pelos
    Fluidos:
    Orina: Recién emitida y sin contaminantes
    Leche: Proveniente de cuartos o estanques
    LCR
    TIPOS DE MUESTRAS

    Humor vítreo u acuoso


    Transudados o Exudado: Obtenidos por
    toracosentesis o abdomenosentesis
    Liquido Sinovial
    Liquido Ruminal
    Otros:
    Materia fecal: Examen Parasitológico,
    Bacteriológico o Bioquímico
    Secreción: bronquial, vaginal, lavados, otros.
    Empleadas para Examen bacteriológico o
    citológico.
    VOLUMEN DE MUESTRA
    Cantidad requerida para poder ser manejada sin alteraciones y
    empleada en el análisis de un elemento con al menos una
    repetición.
    El volumen es variable acorde a:
    El Nº de determinaciones a realizar
    La técnica usada en el laboratorio
    Los equipos empleados en cada laboratorio
    Ejemplos:
    Tejidos 1 a 10 g
    Fluidos 1 a 10 ml
    DURACIÓN DE LA MUESTRA

    El tiempo y la temperatura influyen negativamente en la calidad.


    Los análisis deben de realizarse a la brevedad de la obtención.
    Para almacenar se debe usar frío: refrigeración o congelación.
    Las células se deterioran rápidamente (degeneración, destrucción) y
    no se pueden congelar.
    Los fluidos se pueden congelar (-25ºC) por períodos prolongados.
    La duración es variable para cada elemento, dependiendo de la
    temperatura de almacenamiento.
    EMPLEO DE ADITIVOS EN MUESTRAS
    Adición de substancias que ayudan a preservar la muestra sin alterar la
    composición para el elemento que se determina

    Ejemplos:

    Anticoagulantes: EDTA para análisis hematológicos

    Heparina para obtener plasma

    Inhibidores de glicólisis: NaF para muestras de glicemia y lactatos

    Otros: Hielo, hielo seco, Formol al 10%, Fenol 4-5%, Glicerina al


    50%.
    MUESTRAS DE SANGRE
    Tipos:
    Sangre entera: Sangre con anticoagulante
    Plasma: Sobrenadante de sangre con
    anticoagulante obtenido por centrifugación
    Suero:Líquido liberado por la retracción del
    coágulo
    Frotis:Extendido de sangre sobre porta o cubre
    objeto

    . Muestras de sangre: suero bovino; plasma equino;


    sangre EDTA hemolizada
    TIPOS DE MUESTRA DE SANGRE

    Sangre con Anticoagulante:

    Se emplea en estudio de elementos figurados. El


    volumen debe ser adecuado a cantidad de AC
    Invertir frasco ± 15 veces para adecuada disolución

    Exceso de sangre: Coagulación


    TIPOS DE MUESTRA DE SANGRE

    Sangre con Anticoagulante:


    Pequeña cantidad: Crenación de eritrocitos ( Hto,
    VCM y  CHCM)
    Degeneración citoplasmática de neutrófilos
    Vacuolización de monocitos
    Hemólisis de G.R: Resultados falsos de Hb y CHbCM

    Crenación de eritrocitos
    TIPOS DE MUESTRA DE SANGRE
    Plasma:

    Corresponde a parte liquida de la sangre.


    Se diferencia de suero: contiene fibrinógeno.
    Se obtiene centrifugando (±1500 R.P.M por ± 5
    minútos) una muestra de sangre con AC
    Tubos con Ac para muestras:
    • 0.5 ml
    • 1 ml
    • 3 ml
    Sistema tubos al vacío
    • 7ml
    para venopunción
    • 10ml
    TIPOS DE MUESTRA DE SANGRE

    Suero
    Parte líquida de sangre expulsada por coágulo
    cuando se retrae
    Ideal dejar reposar en lugar con 37°C
    Para 1ml de suero se necesitan 3ml de sangre
    Retracción nula o insuficiente: Frascos sucios, con
    espuma, T° muy bajas.
    Una vez separado suero se debe mantener
    refrigerado o congelado
    MUESTRAS DE SANGRE
    Anticoagulantes:
    Sales orgánicas o inorgánicas que inhiben proceso de coagulación

    Heparina: 10 UI por ml de sangre


    AC natural que actúa inhibiendo paso de protrombina a trombina
    Elección para pruebas químicas

    EDTA: 1-2 mg por ml de sangre


    Sal Na o K que actúa quelando Ca. Indicado en hematología se
    puede usar asociado a formol para preservar morfología celular por
    mas tiempo
    Elección para Test Inmunohematologia
    y Tinciones Citoquímicas.
    MUESTRAS DE SANGRE

    NaF: 2-3 mg por ml de sangre


    Fluoruro de sodio
    Sal que actúa quelando el Ca e Inhibiendo la
    glicólisis

    Na-Citrato: 3,8 %: 1 ml/9ml


    Sal que actúa quelando Ca. Indicado en pruebas de hemostasia y
    para transfusión de sangre.
    MUESTRAS DE CONSTITUYENTES SANGUINEOS
    Volumen Interferencia Duración

    Análisis Muestra ml Heparina EDTA NaF Hemólisis 4ºC 20ºC -20ºC


    Hemograma Sangre 1,0 X X X 1d 12HS NO

    SUBSTRATO
    Bilirrubina T. Sangre o suero 0,5 X 1d 12h 1m
    Boh-Butirato Sangre o suero 0,5 X 3d 2d 6m

    Carotenos Sangre o suero 1,0 X 3d 3d 6m

    Colesterol Sangre o suero 0,5 6d 6d 6m

    Creatinina Sangre o suero 0,5 X X X 2d 1d 6m

    C.Cetonicos Sangre o suero 1,0 3d 3d 6m

    Glucosa Sangre +NaF 0,5 X 2d 1d 10d

    Hemoglobina Sangre 0,5 7d 2d -


    Lactato Sangre + NaF 0,5 6d 3d 6m
    Proteínas T. Sangre o suero 0,5 6d 6d 6m
    Albúminas Sangre o suero 0,5 X 3d 2d 6m

    Globulinas Sangre o suero 3d 2d 6m


    Fibrinógeno Sangre 0,5 3d 2d 6m
    Urea Sangre o suero 0,5 3d 1d 6m
    MUESTRAS DE CONSTITUYENTES SANGUINEOS

    Volume Interferencia Duración


    n
    Análisis Muestra ml Heparina EDTA NaF Hemólisis 4ºC 20ºC -20ºC

    Minerales
    Calcio Sangre o suero 0,5 X X 10d 10d 6m

    Cloruros Sangre o suero 0,5 X X 7d 7d 6m

    Cobre Sangre o suero 1,0 X X X 14d 14d 6m

    Fósforo Sangre o suero 0,5 X 2d 1d 6m

    Magnesio Sangre o suero 0,5 X X 3d 2d 6m

    Potasio Sangre o suero 1,0 X X X 2d 1d 6m

    Selenio Como GSH-Px 0,5 X 2d 1d 6m

    Sodio Sangre 0,5 X X X 7d 7d 6m

    Zinc Sangre o suero 1,0 X X 7d 7d 6m


    MUESTRAS DE CONSTITUYENTES SANGUINEOS

    Volumen Interferencia Duración

    Análisis Muestra ml Heparin EDTA NaF Hemólisis 4ºC 20ºC -20ºC

    ENZIMAS
    ALT Sangre o suero 0,5 X X 2d 3d 6m

    AST Sangre o suero 0,5 X X 3d 3d 6m

    CK Sangre o suero 0,5 X 7d 7d 6m

    FA (SAP) Sangre o suero 0,5 X X X 7d 7d 6m

    GD Sangre o suero 0,5 X X 1d 5d 6m

    GGT Sangre o suero 0,5 X X 7d 7d 6m

    GSH-Px Sangre 1,0 X 7d 1d 6m

    LDH Sangre o suero 0,5 X X 3d 3d 6m

    Pepsinógeno Sangre o suero 0,5 X 1d 1d -

    Amilasa Sangre o Suero 0,5 X X 7d 7d 6m


    CAUSAS DE VARIACIÓN DE MUESTRAS
    IN VIVO: Cambios en la composición del tejido, previas a
    la obtención de la muestra

    Ejercicio y Excitación: Adrenalina ( VGA y glucosa)

    Alimentación:
    Glicemia  Periodo P.P
    Dieta rica en proteínas:  urea
    Dieta pobre en proteínas:  concentración sérica albúminas y
    urea
    CAUSAS DE VARIACIÓN DE MUESTRAS
    Estrés: Corticoides Endógenos
    Hiperglicémia: Insulinoresistencia inducida por corticoides
    Leucocitosis: Desmarginación de neutrófilos

    Lugar de Obtención: La composición y distribución sanguínea


    difiere entre S.V y S. A. S. Yugular tiene concentración mas 
    de Ca , Mg, Hb, Hto y Alb. (2-4%) y  de P (14%) que la
    coccígea
    CAUSAS DE VARIACIÓN DE MUESTRAS

    Drogas: Corticoides producen hiperglicemia y  SAP


    en perros

    Técnica de obtención: Aspiración vigorosa, uso de


    agujas obstruidas o canulación incorrecta alteran el
    flujo de sangre y su composición.
    CAUSAS DE VARIACIÓN DE MUESTRAS

    IN VITRO: Cambios que se presentan en la muestra posterior a su


    obtención.

    Factor mas importante asociado a conservación de una muestra:


    Temperatura.

    Metabolismo celular: Los procesos metabólicos se continúan


    produciendo descomposición y cambios X ej. Glicólisis in Vitro.
    separar rápida/ suero o plasma y refrigerarlo o congelarlo.

    Degeneración celular: Células van perdiendo sus características y


    morfología normal: Autolisis. Hematología: 2 Horas desintegración de
    núcleos de leucocitos.
    CAUSAS DE VARIACIÓN DE MUESTRAS

    Hemólisis in Vitro: Destrucción de eritrocitos liberando


    contenido al plasma, modificando componentes. Hb liberada
    interfiere con reacciones Qcas y altera lecturas colorimétricas

    Contaminación: Modifica la composición o estructura de la


    muestra

    Desecación: Por perdida de agua  concentración de solutos

    Aditivos: preservantes, anticoagulantes, otro pueden afectar


    alguna reacción bioquímica
    FACTORES DE LA MUESTRA DE SANGRE
    QUE INTERFIEREN EN LOS ANÁLISIS DE
    LABORATORIO
    Hemólisis: Destrucción in vitro de eritrocitos por errores de obtención
    o manejo de muestra.
    La presencia de hemoglobina interfiere reacciones colorimétricas
    La liberación al plasma de elementos intra celulares altera el
    resultado.
    Lipemia: Genera cambios en mediciones hematológicas y Bioquímicas
    mediante dispersión lumínica de métodos espectofotométricos
    Anticoagulante no adecuado
    inhibe reacciones analíticas
    Contamina la muestra Ej. heparina-Na para análisis de Na
    ALGUNAS INTERFERENCIAS EN LA
    INTERPRETACION DE RESULTADOS
    Corticoesteroides: Causan cambios en perfil Bioquímicos,
    Hemograma, Análisis de Orina, Estudios Inmunológicos, pruebas
    Endocrinas

    Antibióticos: Proteína positiva falsa en análisis Químico de Orina

    Transfusiones Sanguíneas: + 40% con Citratos  Ca ionizado

    Administracion de Hormonas (Insulina):  niveles de glucosa, K y P

    Antinflamatorios (AINES):
    Alargan T de Sangría, TP, PTT
    Aspirina y Acetaminofen: Glucosa sérica
    Dipirona IV:  CK, LDH, Trig, Col, Cre.
    MÉTODOS DE OBTENCIÓN
    MUESTRA DE SANGRE
    Definir la técnica a emplear
    Seleccionar el material
    Sujeción del animal
    Limpieza y desinfección del área
    Visualización del sector o vena
    Punción del tejido vena etc.
    Obtención del tejido o fluido
    SITIOS DE PUNCIÓN
    MUESTRA DE SANGRE
    Yugul. Mamar. Coccíg. Radial Tibial Cava Auricul.

    Caninos Si - - Si Si - -

    Felinos Si - - - - - -
    MANEJO DE MUESTRAS
    Envase:
    Identificación
    Seguro para la muestra y manipulador
    Envío:
    Solicitud
    Empaque
    Medio
    Factores de variación:
    Tiempo y temperatura de almacenamiento
    Manejo

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