Control de Calidad y Validación del Diagnóstico

Inmunológico en el Banco de Sangre

 CALIDAD

Calidad es hacer las cosas correctas de la

manera correcta.

Crosby.
 CONTROL DE CALIDAD
NECESIDAD
SATISFACCIÓN
E
N S
T PROCESO A
R L
A I
D D
A A

ASEGURAMIENTO CONTROL DE
DE LA CALIDAD CALIDAD
 FASES DEL PROCESO DE MEDIDA

- Recepción de la - Pretratamiento

FASE POSTANALÍTICA
FASE PREANALITICA

solicitud de la muestra

FASE ANALITICA
RESULTADO
- Preparación del - Reactivos e
paciente insumos
- Toma de - Instrumento
muestra - Señal mesurable INFORMACIÓN
- Conservación y ÚTIL EN LA
- Cálculo TOMA DE
transporte
DECISIONES
 Control de Calidad

Preanalítica Analítica Postanalítica

Conocer Evaluar Controlar

 MINISTERIO DE SALUD
PRONAHEBAS
CRITERIOS DE CALIDAD NTP - 012
Ahora me pregunto?
PRUEBAS DE TAMIZACIÓN
CARACTERÍSTICAS
 FINALIDAD DEL CCI Y DEL CCE

PROPORCIONAR RESULTADOS,
PRODUCTOS Y/O SERVICIOS A MIS
CLIENTES QUE SEAN DE UTILIDAD CLÍNICA
PARA EL CUIDADO DE LA SALUD DE LOS
MISMOS.

CCI: Control de Calidad Interno

CCE: Control de Calidad Externo
 MONITOREO DE LOS PROCESOS
SEROLÓGICOS DE TAMIZAJE
Todos los procesos analíticos deben
controlarse mediante la comparación con
sueros de control.

Existen básicamente dos maneras de

hacerlo: con los controles diarios planificados
por cada laboratorio (control interno) y con
los programas interlaboratorio (control
externo).
CONTROL DE CALIDAD INTERNO

Es la estadística empleada para conocer las

variaciones que se presentan en el sistema
analítico a través del tiempo, dando
seguimiento al desempeño del mismo
detectando los errores que pueden poner en
riesgo la utilidad clínica de mis resultados.
 CONTROL DE CALIDAD INTERNO
• PRIMERA OPINIÓN: Referente a los
controles contenidos en el kit de reactivos.

• SEGUNDA OPINIÓN: Referente a un control

fabricado por el laboratorio.

• TERCERA OPINIÓN: Referente a controles

fabricados por una tercera parte que
desarrolla muestras altamente
caracterizadas y estables.
ANÁLISIS ESTADÍSTICO
 DETECCIÓN DE ERRORES

• ERRORES ALEATORIOS:
RELACIONADOS CON SITUACIONES
IMPREDECIBLES.

• ERRORES SISTEMÁTICOS:
RELACIONADOS CON EL EQUIPO,
CALIBRADORES Y REACTIVOS.
¿PARA QUÉ VOY A CONTROLAR?

CONOZCO → EVALÚO → CONTROLO

PARA MANTENER LA ESTABILIDAD

DE MIS MÉTODOS A TRAVÉS DEL
TIEMPO.
CCI Y PEEC

SESGO
 BUENAS PRÁCTICAS

• ELEGIR UN ADECUADO CONTROL DE TERCERA OPINIÓN.

• DARLE UN USO ADECUADO AL MATERIAL DE CONTROL.

• DEBEN SER DESAFIANTES PARA MI SISTEMA.

• ALTAMENTE CARACTERIZADOS.

• LLEVAR REGISTROS DE LAS ACCIONES CORRECTIVAS.

 BUENAS PRÁCTICAS
• TENER PERSONAL CAPACITADO.
• TENER PERSONAL DE RESERVA.
• IDEAL CONTAR CON UN SOFTWARE
ESPECIALIZADO.
• PARTICIPAR EN ESQUEMAS DE
COMPARACIÓN INTERLABORATORIOS.
• ESTABLECER REQUISITOS DE CALIDAD
ADECUADOS.
 ANÁLISIS DE GRÁFICAS
 GRAFICAR DIARIAMENTE.

 NUNCA TRABAJAR CON LA MISMA MEDIA Y

DESVIACIÓN ESTÁNDAR.

 LA MEDIA Y DESVIACIÓN ESTANDAR DEBEN

AJUSTARSE CUANDO:

1.- CAMBIAMOS DE LOTE DE CONTROLES.

2.- CAMBIAMOS DE LOTE DE REACTIVOS.
3.- SE HACE UN MANTENIMIENTO MAYOR.
CALIDAD EN LA MANIPULACIÓN
Formación
Continuidad
Consistencia de resultados
Carga de trabajo
- Sistemas manuales
- Sistemas automáticos
Informe
- Lote
- Fecha ensayo, incidencias
- Usuario, firma
 CALIDAD EN LOS EQUIPOS
Registro de equipos
- Pipetas
- Lector
- Lavador
- Incubador
- Nevera / Congeladores

Estado de uso
- Fecha calibración
- Fecha próxima calibración
INTERPRETACIÓN DEL CCI
INTERPRETACIÓN CCI
 CONTROL DE CALIDAD EXTERNO

• ÍNDICE DE DESVIACIÓN ESTÁNDAR (IDE)

PARA EL LABORATORIO COMPARADO
CON EL GRUPO PAR:

(media lab – media grupo par)

IDE método = ___________________________________________________________

Desviación estándar grupo par

 CONTROL DE CALIDAD EXTERNO
ÍNDICE DE DESVIACIÓN ESTÁNDAR (IDE)
PARA EL LABORATORIO COMPARADO CON
TODOS LOS PARTICIPANTES:

(media lab – media todos)

IDE todos = __________________________________________________________________

Desviación estándar todos

 CONTROL DE CALIDAD EXTERNO
ÍNDICE DE COEFICIENTE DE VARIACIÓN
PARA EL LABORATORIO COMPARADO CON
TODOS LOS PARTICIPANTES:

Desviación estándar lab

ICV lab = _____________________________________________________

Desviación estándar todos

INFORME DE RESULTADOS
PCI vs PEEC
 PEEC
LA PARTICIPACIÓN EN PROGRAMAS DE
EVALUACIÓN EXTERNA DE LA CALIDAD
NOS PERMITE IDENTIFICAR PROBLEMAS
RELACIONADOS CON:

 EL DESEMPEÑO DEL PERSONAL.

LA CALIBRACIÓN DE LOS EQUIPOS.
LA ADECUACIÓN DE LOS
PROCEDIMIENTOS.
 INDICADORES
PRUEBAS DE TAMIZAJE

• SENSIBILIDAD: Definida como la proporción de

muestras positivas (reactivas) correctamente
identificadas (ausencia de falsos negativos).

• ESPECIFICIDAD: Definida como la proporción

de muestras negativas (no reactivas)
correctamente identificadas por la prueba
empleada (es decir no produce falsos positivos).
PRECISIÓN Y EXACTITUD
 MEDIDAS DE POSICIÓN Y
VARIABILIDAD DE LOS DATOS

• Media aritmética o media (x): es el valor

promedio del conjunto de las mediciones.

• Desviación estándar (s): es una medida del

alejamiento de los datos del valor promedio.

• Coeficiente de variación (CV): es la

desviación relativa de los datos respecto del
valor promedio.
 MEDIDAS DE POSICIÓN Y VARIABILIDAD
DE LOS DATOS
• Si se repite una medida con todos los cuidados recomendados, por un
mismo operador y condiciones, los valores obtenidos no serán idénticos.

• Estos valores se distribuirán alrededor de uno más frecuente, que cuando

el número de medidas es suficientemente grande, la representación
gráfica de estas frecuencias versus sus valores, se acerca a la clásica
campana de Gauss o de distribución normal.

• En esta distribución normal o de Gauss, el área comprendida entre la

Media (x) ± 1 desviación estándar representa cerca del 68% del área total.
O sea el 68% de las mediciones se estiman comprendidas en ese rango.

• Si se considera el área comprendida entre (x) ± 2 desviaciones estándar,

se abarca cerca del 95% de las mediciones.

• Las medidas de posición y variabilidad que se definen son la media

aritmética o media, la desviación estándar y el coeficiente de variación.
 CONTROL INTERNO

El control interno de la calidad tiene por

objetivo asegurar el cumplimiento de todos
los procedimientos establecidos para el
trabajo del Banco de Sangre y el monitoreo de
la precisión de los resultados (construcción de
gráfica de control) con el propósito de detectar
y de corregir eventuales errores.
 CONTROL INTERNO

Todos los controles deben tratarse

exactamente del mismo modo que las
muestras desconocidas para validar el
funcionamiento de la prueba. Los controles se
trabajan simultáneamente y bajo las mismas
condiciones que las muestras desconocidas.
Luego de completado el procedimiento de la
prueba, se examinan los resultados utilizando
el mismo criterio para la interpretación.
 CONTROL INTERNO
Cuando los controles conocidos producen
resultados aceptables, el control de calidad
indica que:

• La prueba es válida.

• Todas las condiciones de la prueba han sido

cumplidas.

• Todos los resultados de la prueba son

confiables.
 GRÁFICAS DE CONTROL

El monitoreo diario del proceso analítico

de cada prueba se realiza a través de la
evaluación de la prueba con sueros de control,
construyendo Gráficas de Control de Levey
Jennings con la repetición diaria de los
resultados de estos sueros.
 GRÁFICAS DE CONTROL
• Mantener las alícuotas del suero control interno en
viales y conservarlos a menos 20 ºC.

• Calcular la relación densidad óptica / cut off o

valor de corte (DO/CO) de las determinaciones
realizadas por marcador.

• Calcular la media y la desviación estándar ( ±2s y

±3s) de los datos obtenidos.

• Construir el gráfico con los datos obtenidos para

cada marcador.
 Control de Calidad Externo

• PEEC (UPCH)

• BioRad (Randox)

• Biosystem (Inmunochem)
 VERIFICACIÓN
• CONFIRMACIÓN MEDIANTE LA APORTACIÓN
DE EVIDENCIA OBJETIVA DE QUE SE HAN
CUMPLIDO LOS REQUISITOS
ESPECIFICADOS PARA UN MÉTODO.

• LA REALIZA EL LABORATORIO, LOS

RESULTADOS LOS COMPARA CON LOS DEL
INSERTO, EL TAMAÑO DE MUESTRA ES
PEQUEÑO, EL PROCESO ES CORTO Y
MUCHO MENOS COSTOSO QUE UNA
VALIDACIÓN.
 VALIDACIÓN
• CONFIRMACIÓN MEDIANTE EL
SUMINISTRO DE EVIDENCIA OBJETIVA
DE QUE SE HAN CUMPLIDO LOS
REQUISITOS DEL MÉTODO PARA UNA
UTILIZACIÓN O APLICACIÓN ESPECÍFICA
PREVISTA.

• LA VALIDACIÓN LA REALIZA EL
FABRICANTE, LOS RESULTADOS LOS
MANIFIESTA EN SU INSERTO, TAMAÑO
DE MUESTRA MUY GRANDE, EL
PROCESO ES LARGO Y COSTOSO.
 ¿ QUÉ MATERIAL NECESIT0?

• SE REQUIERE DE CONTROLES DE BAJA

REACTIVIDAD, DE MATRIZ HUMANA Y DE
TERCERA OPINIÓN.

• DE SER POSIBLE QUE LOS CONTROLES

HAYAN SIDO DISEÑADOS PARA LA
PLATAFORMA DIAGNÓSTICA A
VERIFICAR.
INTERPRETANDO LOS RESULTADOS
RATIO INTERPRETACIÓNES
10.0
9.0
REACTIVO FUERTE
8.0
7.0
6.0 REACTIVO
5.0
REACTIVO
6.0 REACTIVO DEBIL
4.0
2.0
1.0
0.9 ZONA GRIS INDETERMINADO
0.8
0.7
0.6
NO REACTIVO LECTURA ALTA
0.5
0.4
NO REACTIVO NO REACTIVO
0.3
0.2
NO REACTIVO
0.1
0
 TIPOS DE MÉTODOS
CUALITATIVOS CUANTITATIVOS
PRESENCIA – AUSENCIA CONCENTRACIÓN

TAMIZAJE CONFIRMATORIOS

ALTA SENSIBILIDAD ALTA ESPECIFICIDAD

SEROLÓGICOS MOLECULARES

PRSENCIA DE ANTÍGENOS O PRESENCIA DE ÁCIDOS

ANTICUERPOS NUCLÉICOS
 MÉTODOS CUALITATIVOS
VALIDACIÓN VERIFICACIÓN

PRECISIÓN PRECISIÓN

SENSIBILIDAD SENSIBILIDAD

ESPECIFICIDAD ESPECIFICIDAD

VALOR DE CORTE (CO-[CUTOFF])

LIMITE DE DETECCIÓN

ZONA DE NO CONFIABILIDAD
ELISA - FACTORES INTERFERENTES
FALSOS NEGATIVOS

 Periodo ventana.
 Tratamientos inmunosupresores intensivos o
prolongados.
 Procesos malignos.
 Transfusión de reposición.
 Trasplante de médula ósea.
 Disfunciones de las células B.
 Interferencias de factores reumatoideos.
 Equipos que detectan principalmente anti-p24.
 Pérdida de estabilidad de los reactivos.
ELISA - FACTORES INTERFERENTES
FALSOS POSITIVOS
Interferencia de:
 Anticuerpos frente a antígenos de músculo liso,
células parietales, mitocondriales, nucleares,
leucocitarios y de células T.
 Presencia de anticuerpos IgM frente al core del
virus B de la hepatitis y frente al virus A de la
hepatitis.
 Anticuerpos frente a antígenos leucocitarios de
clase II de células H9 que pueden estar presentes
en mujeres embarazadas multíparas y sujetos
politransfundidos.
ELISA - FACTORES INTERFERENTES
FALSOS POSITIVOS
 Enfermedades del hígado como hepatopatía alcohólica
grave, cirrosis biliar primaria o colangitis esclerosante.

 Inactivación del suero por calor o positividad a RPR.

 Procesos hematológicos malignos, como linfomas.

 Infecciones agudas por virus ADN.

 Vacunación contra la gripe.

 Insuficiencia renal crónica y trasplante Renal.

 QUIMIOLUMINISCENCIA
INTERFERENCIAS
• La contaminación bacteriana de las muestras o la
inactivación mediante calentamiento pueden modificar
los resultados del análisis.

• Recomendado para el análisis de muestras individuales

y no pools (combinaciones).

• Las muestras de los pacientes tratados con vitamina H

(biotina) pueden interferir en un ensayo inmunológico
basado en el uso de reactivos biotinilados y, por lo
tanto, sus resultados se deberán evaluar con cuidado.
 SUEROS CONTROL INTERNO
CONTROLES POSITIVOS
Deben presentar índice DO/CO > 1
Rango recomendado: 2,0 – 4,5

Test competitivos: < 1,0

Rango recomendado: 0,3 – 0,7

CONTROLES NEGATIVOS
Deben presentar índice DO/CO < 1
Rangos recomendados: < 0,8
Test Competitivo: > 2,0
EVALUANDO DATOS EN EXCEL
(DATOS ATIPICOS)
n Datos Z score
1 3.20 -1.17
2 3.22 -0.83
3 3.25 -0.33 FÓRMULAS
4 3.26 -0.16
5 3.32 0.83 Cof.variación(%)= dev.estándar x 100
6 3.19 -1.13 Promedio
7 3.16 -1.83
8 3.25 -0.33
9 3.38 1.83
10 3.28 0.16 Z score= (dato-promedio)
11 3.30 0.50 dev.estándar
12 3.35 1.33
13 3.26 -0.16
14 3.31 0.66 Abs(Zscore) > 3: Dato atípico
15 3.25 -0.33
16 3.22 -0.83
Abs(Zscore) < 3: Dato no atípico
17 3.22 -0.83
18 3.35 1.33
19 3.30 0.5
20 3.22 -0.83
21 3.24 -0.5 Abs: Valor absoluto.
22 3.35 1.33
23 3.30 0.5
24 3.22 -0.83
25 3.24 -0.5
m 3.27
DS 0.06
CV% 1.83%
ATIPICOS 0.00
 CLIA
(Clinical Laboratory Improvement Amendments )

En la norma final CLIA, el proceso de

aseguramiento de la calidad de pruebas de
laboratorio se llama evaluación de la calidad,
en vez de aseguramiento de la calidad o
gestión de la calidad.
 FUERA DE CONTROL
QUE SE HACE:

LAS NORMAS SOBRE ACCIONES

CORRECTIVAS PARA SITUACIONES DE
FUERA DE CONTROL CON FRECUENCIA
SUGIEREN REPETIR EL CONTROL.

«REPETIR EL CONTROL»
 FUERA DE CONTROL

Al repetir automáticamente los controles,

estamos diciendo que no confiamos en que el
procedimiento de control esté realizando su
trabajo.
 FUERA DE CONTROL

EVALUAR EL FALSO RECHAZO

ACEPTABLE.
 FUERA DE CONTROL

No sea maniático al repetir y repetir el

control ya que repetir y repetir y repetir es
una práctica obsoleta, desarrolla buenos
hábitos y soluciona los problemas.
 FUERA DE CONTROL
De tanto repetir el control a menudo nos
dará un valor que puede estar «dentro de los
límites», una inspección cuidadosa del
resultado repetido, con frecuencia mostrará
que «el resultado apenas ha caído dentro» y lo
que realmente hemos hecho es retrasar la
aparición del problema y la solución hasta
una futura corrida.
 FUERA DE CONTROL – MITOS
El control está «Malo» (está en mal estado) Nuevo
frasco.
- ¿Escaso volumen?
- ¿Estará vencido?
- ¿Fueron almacenados incorrectamente?
- ¿Fueron preparados de manera correcta?

Automáticamente repetir el control o culparlo, son

intentos frecuentes de resolver el problema sin fastidio y
la demora para encontrar y eliminar la verdadera causa
de la falla en el control de la calidad.
 FUERA DE CONTROL

DESARROLA BUENOS HÁBITOS – SOLUCIONA PROBLEMAS

La resolución de problemas es tanto una habilidad como

una actitud.

HABILIDAD CONOCIMIENTO Y EXPERIENCIA.

ACTITUD TENER CONFIANZA PARA INVESTIGAR

LO DESCONOCIDO BAJO LA PRESIÓN
DEL TIEMPO.
 ERRORES SISTEMÁTICOS
CAUSAS
- Cambio de lote en el reactivo.
- Cambio de lote de calibradores.
- Valores de calibración erróneos.
- Reactivos mal preparados.
- Deterioro de reactivos.
- Almacenamiento inadecuado de reactivos o
calibradores.
- Cambio en el volumen de muestra o reactivos debido a
pipetas sin calibrar o mal calibradas.
- Cambio en la temperatura de los baños de incubación y
termostatos.
- Deterioro de la fuente de luz fotométrica.
- Cambios en procedimientos entre operadores.
 ERRORES ALEATORIOS
CAUSAS
• Presencia de burbujas en los reactivos
o líneas de reactivos.
• Reactivos mal mezclados.
• Temperatura de incubación inestable.
• Suministro electrónico fluctuante.
• Variación individual del operador en el
pipeteo.
• Tiempo de realización, etc.
 SOLUCIÓN Y REGISTRO

Si encontraste la solución a un
problema regístralo para que ayude a
resolver futuros eventos.

CULTURA DEL REGISTRO

DE LA TEORÍA A LA PRÁCTICA
REGLAS DE WESTGARD
REGLAS DE WESTGARD
REGLAS DE WESTGARD
CASOS
CASO 1
CASO 2
CASO 3
CASO 4
CASO 5
 BIBLIOGRAFÍA
Constantine, Niel & Callahan, Johhnny & Watts, Douglas
(1991) Pruebas para la Detección del VIH y Control de Calidad.
Family Health International, Carolina del Norte, USA.

Creighton, Ernest (1990) Rapid Plasma Reagin (RPR) 18mm

Circle Card Test. A Manual of Test for Syphilis. American Public
Health Association. Washington, DC.

Ministerio de Salud. Instituto de Salud Pública de Chile (1998)

Manual de Control de Calidad en el Laboratorio Clínico.

Organización Panamericana de la Salud (1994). Manual de

Procedimientos y Control de Calidad para los laboratorios de
Serología de los Bancos de Sangre. Febrero.