Identificación y Reacción de Los Carbohidratos-2015
Identificación y Reacción de Los Carbohidratos-2015
Identificación y Reacción de Los Carbohidratos-2015
I. OBJETIVOS
CARBOHIDRATOS
CLASIFICACIÓN:
Monosacáridos:
También llamados azúcares sencillos, están constituidos por una sola unidad de
polihidroxialdehído o polihidroxicetona, en el primer caso se llaman aldosas y en el segundo,
cetosas. Todos los monosacáridos son muy solubles en agua. Son poco solubles en alcohol, y
son insolubles en disolventes no polares como el éter di etílico.
El monosacárido más abundante en la naturaleza es la D- glucosa, que tiene 6 átomos de
carbono; de este se origina muchos otros carbohidratos. La D- glucosa es el combustible
principal para la mayor parte de los organismos y es también la unidad estructural básica de
los polisacáridos más abundantes, tales como el almidón y la celulosa.
Disacáridos:
Están formados por dos monosacáridos unidos entre sí por enlaces glucosídicos. Casi todos
los monos y disacáridos son sólidos cristalinos e incoloros. La D-fructosa es la más dulce, e
incluso más dulce que la sacarosa (azúcar de mesa). Como pueden formarse puentes de
hidrógeno entre sus grupos -OH polares y el agua.
Oligosacáridos:
Uno de los oligosacáridos más importantes son los disacáridos, debido a su abundancia en la
naturaleza. Los oligosacáridos son aquellos hidratos de carbono que por hidrolisis dan como
resultado entre 2 a 10 unidades simples e azucares o monosacáridos. Los monosacáridos se
encuentran unidos por un enlace glicosídico, es decir, un puente de oxígeno.
Los polisacáridos
PROPIEDADES:
Estos monosacáridos pueden unirse entre sí (con la eliminación de agua) para formar dos,
tres, o más unidades o residuos de monosacáridos. Por lo que los carbohidratos denominados
“no azúcares”, son aquellos que contienen más de 10 unidades de monosacáridos y que no
poseen un sabor dulce. Los no azúcares pueden dividirse en dos subgrupos,
hemopolisacáridos y heteropolisacáridos; consistiendo los primeros en unidades de
monosacáridos idénticas, y los últimos son mezclas de diferentes unidades de
monosacáridos.
Monosacáridos
En general todos los monosacáridos son solubles en agua, escasamente en etanol e insolubles
en éter, son activos ópticamente, poseen propiedades reductoras (p. ej. reducen la solución de
Fehling) se representan con la fórmula general CxH2xOx, y generalmente son de sabor dulce.
Además, todos los monosacáridos existentes en la naturaleza, son dextrógiros, con excepción
de la fructuosa y la eritrosa.
Existen monosacáridos que también pueden existir en las formas moleculares cíclicas o
anillos. Por ejemplo, las dos formas cíclicas de la D-glucosa que existen en la naturaleza α
D-glucosa y β-D-glucosa. Como en la fórmula estructural, la diferencia entre estas dos
formas cíclicas depende de la configuración o dirección del grupo hidroxilo en el átomo de
carbono 1.
Pentosas:
Disacáridos: Los disacáridos están formados por dos azúcares hexosas, de cuya unión se
elimina como residuo el agua:
Maltosa: Está constituida por dos moléculas de glucosa unidas mediante un enlace α-1,4-
glucosídico. La maltosa es un azúcar reductor, soluble al agua. La maltosa no se encuentra
en la naturaleza, pero es un producto obtenido durante la degradación enzimática del
almidón. Por ejemplo, durante el proceso de germinación de la cebada, se obtiene maltosa a
partir del almidón
Sacarosa: El azúcar de mesa, está constituida por una molécula de D-glucosa y una de D-
fructosa unidas a través de un enlace α-1-β-2-glucosídico. Dado que los dos grupos
reductores funcionales están involucrados en el enlace glucosídico, la sacarosa no posee
propiedades reductoras. Se obtiene de la remolacha y de la caña de azúcar, siendo uno de los
compuestos orgánicos industriales.
Homopolisacáridos: Estos carbohidratos son muy diferentes de los azúcares. Tienen un alto
peso molecular y están compuestos de un gran número de hexosas o en el menor grado de
residuos de pentosas. Muchos de ellos se les encuentra en vegetales y animales como
material alimenticio de reserva (p. ej. almidón o glicógeno) o como elementos estructurales
(p. ej. celulosa o quitina).
Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite
reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una coloración
azúlvioleta intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja.
Ensayo de Bial: El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma
complejos de coloración sólo con las pentosas.
De otro lado una propiedad importante que permite identificar los carbohidratos, y
determinar el grado de pureza de los mismos, particularmente monosacáridos es la rotación
óptica ocasionada por la presencia de centros asimétricos o quirales en la estructura
molecular, los cuales desvían el plano de luz polarizada.
III. MATERIALES, EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO Y
REACTIVOS QUÍMICOS UTILIZADOS
MATERIALES E INSTRUMENTOS:
REACTIVOS QUÍMICOS:
1. ENSAYOS GENERALES:
REACCIONES QUÍMICAS
CON GLUCOSA
CON SACAROSA
CON RAFINOSA
CON ALMIDÓN
OBSERVACIONES:
Cuando a los 5 tubos (que contienen los carbohidratos mencionados), se les
agrega gotas de solución etanólica de α-naftol al 10%, luego el H2SO4
concentrado, se forman 2 capas. También se observó la formación de un anillo
de color violeta en la interface de la solución, lo cual indica prueba positiva.
Las reacciones son exotérmicas, al tocar la base de los tubos de ensayo se nota la
presencia de calor.
b) Con Antrona:
En un tubo de ensayo poner aproximadamente 1 mL del reactivo (antrona) y 5 gotas
de una solución acuosa de carbohidrato, agitar hasta que se produzca el cambio de
color.
REACCIONES QUÍMICAS
CON GLUCOSA
c) Con Resorcina
En un tubo de ensayo poner aproximadamente 20 mg de un carbohidrato, agregar 1
mL de una solución acuosa al 1% de resorcina y por las paredes del tubo agregar 2
mL de H2SO4 concentrado. La formación de un anillo rojo en la interfase indica el
resultado positivo.
Muestras: glucosa, fructosa, maltosa, sacarosa y lactosa.
REACCIONES QUÍMICAS
CON GLUCOSA
CON SACAROSA
CON RAFINOSA
CON ALMIDÓN
OBSERVACIONES:
AL momento de adicionar, a los 5 tubos con sus respectivas muestras, la
solución de resorcina al 1% más gotas del H2SO4 concentrado, se observó la
formación de 2 capas y un anillo rojo en la interfase. La formación del anillo
rojo indica prueba positiva.
Las reacciones son exotérmicas (liberación calor).
REACCIONES QUÍMICAS
CON GLUCOSA
CON MALTOSA
CON SACAROSA
OBSERVACIONES:
Cuando a los 3 tubos que contienen las mezclas del Fehling A y Fehling B, se le
adicionan los carbohidratos (glucosa, maltosa y sacarosa), estas toman una
coloración ligeramente azul.
Luego al someterlas en baño maría, tanto la glucosa como la maltosa forman un
precipitado rojo; mientras que la sacarosa no reacciona.
La formación del precipitado rojo indica la presencia de un azúcar reductor
como también resultado positivo.
REACCIONES QUÍMICAS
CON GLUCOSA
CON MALTOSA
CON SACAROSA
OBSERVACIONES:
Al momento de adicionar los carbohidratos (glucosa maltosa y sacarosa) a los 3
tubos que contienen las muestras del reactivo de Tollen y al agitarlas
vigorosamente se forman soluciones casi incoloras.
Cuando a éstas soluciones se les calienta en baño maría, la glucosa y la maltosa
forman un espejo de plata mientras que la sacarosa no nuestra ningún tipo de
reacción.
La formación del espejo de plata demuestra la presencia de un azúcar reductor
como también una prueba positiva.
REACCIONES QUÍMICAS
CON GLUCOSA
CON MALTOSA
CON SACAROSA
OBSERVACIONES:
Si a los 3 tubos que contienen Reactivos de Benedict, le agregamos los
carbohidratos (glucosa, maltosa y sacarosa respectivamente), luego al calentarlo
en baño maría y finalmente al dejarlo en reposo, la glucosa forma coloración
amarillo melón y la maltosa forman color verde, mientras que la sacarosa no
reacciona.
El precipitado rojo indica la presencia del azúcar reductor y una prueba positiva.
Los reactivos debieron estar alterados, por tal motivo no se obtuvo los resultados
esperados, como indica la guía de un precipitado rojo q indicara que es un azúcar
reductor.
3. REACCIONES DE DIFERENCIACIÓN ENTRE MONOSACÁRIDOS Y
DISACÁRIDOS:
a) Con el Reactivo de Barfoed:
En un tubo de ensayo poner 1 mL del Reactivo de Barfoed y 10 mg de un
carbohidrato, calentar en bañomaría durante 5 minutos. La formación de un
precipitado rojo indica presencia de un monosacárido.
Muestras: glucosa, maltosa y sacarosa.
REACCIONES QUÍMICAS
CON GLUCOSA
CON SACAROSA
OBSERVACIONES:
Si a 3 tubos que contienen 1 mL del reactivo de Barfoed cada uno se le agregan
los carbohidratos (glucosa maltosa y sacarosa), éstas toman una coloración
celeste.
Cuando a estas soluciones calentamos en baño maría durante 5 minutos la
glucosa forma un precipitado rojo mientras que la sacarosa y maltosa no
reaccionan.
El precipitado rojo indica la presencia de un monosacárido y los que no
reaccionaron pertenecen a los disacáridos.
CON FRUCTOSA
OBSERVACIONES:
Si al tubo que contiene la fructosa, previamente mezclado con el reactivo de
seliwanoff, calentamos a ebullición ésta forma una solución rojo débil, lo cual
indica la presencia de una cetosa.
Cuando al tubo que contiene la glucosa más el reactivo de Seliwanoff le
sometemos en baño maría, ésta no reacciona, lo cual demuestra la presencia de
una aldosa.
ENSAYO DE BIAL:
Reacción del furfural e hidroximetil-furfural con orcinol en medio de HCl, dando
lugar a derivados de color azul. Es una prueba específica de pentosas.
6. IDENTIFICACIÓN DE POLISACÁRIDOS:
a) Ensayo de Lugol:
En un tubo de ensayo echar 1 mL de la solución de almidón y agregar 2 gotas de
Reactivo de Lugol. Mezclar y observar, la formación de un color azul-violeta es una
prueba positiva para almidón.
Soluciones: almidón
REACCIONES QUÍMICAS
CON ALMIDÓN
OBSERVACIONES:
CONCLUSIONES:
RECOMENDACIONES:
Los materiales a utilizar deben estar completamente limpios y secos para así
evitar resultados erróneos.
Observar detenidamente los fenómenos que ocurren durante la experimentación
y anotarlos a cada detalle.
Utilizar los productos en cantidades fijas para obtener resultados óptimos.
En algunas reacciones no es muy representativa la identificación, se debería
tener en cuenta la influencia de la temperatura en las reacciones con baño
maría.
En otros casos que no se obtuvo el resultado indicado en la guía de práctica, se
debería tener cuidado con los reactivos de no mezclarlos, para asi no afectar su
efectividad ni su concentración (no diluirlos).
VI. CUESTIONARIO:
Los azucares reductores están formados por un conjunto de azúcares con una función cetónica
o aldehídica con acción reductora sobre la solución cupro-alcalina.
Son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo intacto, y que a través del mismo pueden
reaccionar con otras especies. Es capaz de reducir su carbono Anomérico, formando enlaces
glucosidicos con otras moléculas de azúcares.
Los azúcares reductores pueden reducir al ácido 3,5-dinitrosalicílico (DNS) bajo determinadas
condiciones. Preparar el reactivo DNS: 100ml de solución DNS 2mM en NaOH 0,2N y 250ml
de solución de tartrato de sodio y potasio 4-hidrato 2,12M. Mezclar ambas soluciones y se
llevar a 500ml. Si la muestra contiene proteínas éstas pueden producir falsos negativos, para
evitarlos desproteinizar 5ml de leche añadiendo 1 ml de ácido acético 1N; centrifugar a 4.000
x g durante 10 minutos. Si en la muestra es posible la presencia de di, tri o polisacáridos con
más de un componente reductor, neutralizar con NaOH 1N para evitar una posterior hidrólisis
ácida (se sobrestimaría la cantidad del sacárido).Añadir 4,475ml de agua destilada y 25ml de
muestra 500µl de reactivo DNS. Mantener la mezcla en baño de agua hirviendo durante 5
minutos y medir a continuación absorbancia a 540nm, interpolando el valor obtenido con los
valores calculados para soluciones de sacárido de concentración conocida.
2.- Que es mutarrotación?
Por tratarse de una rotación del carbono simple carbono anomérico al pasar de un confórmero al
otro, se concluye que el compuesto cambia su actividad óptica, variando su valor, pero
raramente se invierte. El compuesto original y el resultante son isomeros ópticos entre sí, pero
no imágenes especulares.
En relación a las formas cíclicas la glucosa (Glc) se presenta casi exclusivamente en la forma
piranosa, la fructosa se presenta en un 67% en su forma piranosa y un 33% en la forma
furanosa, y la ribosa está en un 75% en su forma furanosa y el 25% en la forma piranosa. No
obstante, en los polisacáridos, la glucosa se presenta exclusivamente en la forma piranosa y la
fructosa y la ribosa en su forma furanosa.
VIII. BIBLIOGRAFÍA
QUÍMICA ORGÁNICA II
PRÁCTICA N°5.
IDENTIFICACIÓN Y REACCIONES DE LOS CARBOHIDRATOS
AYACUCHO-PERÚ
2015