INGESTA RICA

EN CARBOHIDRATOS

1) MOVILIZACIÓN DE GLUCOSA
DEL TORRENTE SANGUÍNEO

2) METABOLISMO DE LA GLUCOSA
METABOLISMO DE LA GLUCOSA
INGESTA RICA EN CARBOHIDRATOS

GLUCOSA

GLUCÓLISIS
GLUCÓGENO
PIRUVATO NADPH
RIBOSA 5-FOSFATO
CONDICIONES
DURANTE ELAERÓBICAS
AYUNO
DESTINO DEL PIRUVATO EN CONDICIONES AERÓBICAS:

RESPIRACIÓN AERÓBICA: INCLUYE GLUCÓLISIS, CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO

Y FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

CICLO DEL ÁCIDO

CÍTRICO FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

¿EN DÓNDE SUCEDE ESTO?

PARTE DEL PROCESO DE RESPIRACIÓN ES LLEVADO
A CABO EN LA MITOCONDRIA
MATRIZ

MEMBRANA
INTERNA
MITOCONDRIAL

MEMBRANA
EXTERNA
MITOCONDRIAL
 Espacio Membrana externa
intermembranal Permeable a moléculas pequeñas e iones

Membrana interna
Impermeable a moléculas pequeñas e iones (H+)

Presenta:
Complejos I a IV
ADP-ATP translocasa
ATP sintasa (FoF1)
Otros transportadores de membrana

Matriz
Contiene:
Complejo piruvato deshidrogenasa
Enzimas del ciclo del ácido cítrico
Enzimas de la b-oxidación
Enzimas de la oxidación de aa
DNA, ribosomas
ATP, ADP, Pi, Mg2+, Ca2+, K+
VII. CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO

I. Generalidades
II. Fuentes del Acetil-CoA. Reacciones anapleróticas
III. Regulación
IV. Importancia del ciclo como proveedor de esqueletos
carbonados para otras vías metabólicas
 CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO

CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS (CICLO TCA)

CICLO DE KREBS (Por su descubridor)

FORMA PARTE DEL PROCESO DE RESPIRACIÓN CELULAR

Procesos moleculares mediante los que las células

consumen oxígeno (O2) y producen dióxido de carbono (CO2)
 GRASAS POLISACÁRIDOS PROTEÍNAS

ÁCIDOS GRASOS GLUCOSA Y AMINOÁCIDOS

Y GLICEROL OTROS AZÚCARES

ACETIL CoA
CoA
CICLO
CO2
DE
KREBS

ATP
FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
 CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO

CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS (CICLO TCA)

CICLO DE KREBS (Por su descubridor)

Hans Krebs Lipmann

EL CICLO DE KREBS ES
UN CICLO ANFIBÓLICO PORQUE:
A) ES CATABÓLICO (Se lleva a cabo la oxidación del carbono
proveniente de otras vías)
B) ES ANABÓLICO (Es proveedor de esqueletos carbonados
para otras vías metabólicas)
Glucosa
Proteínas Lípidos
Acetil-CoA
SÍNTESIS

CICLO
DE
KREBS CO2

SE LLEVA A CABO EN LA MATRIZ MITOCONDRIAL

PARA PODER INICIAR EL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO
ES NECESARIA LA PRODUCCIÓN DE

ACETIL-CoA
(ACETATO ACTIVADO)
1. EL PIRUVATO SE OXIDA A ACETIL-CoA Y CO2
1. Es una reacción previa al ciclo de Krebs
2. Es una reacción irreversible ΔG’0= -33.4 kJ/mol
3. Es una reacción catalizada por el complejo de la PIRUVATO DESHIDROGENASA
(SON TRES ENZIMAS: E1 + E2 + E3)
4. El complejo requiere de 5 COENZIMAS: el pirofosfato de tiamina (TPP), el flavina
adenina dinucleótido (FAD), el coenzima A (CoA-SH), el nicotinamida adenina
dinucleótido (NAD) y el lipoato.
VITAMINAS

TIAMINA TPP
RIBOFLAVINA FAD
NICOTINAMIDA NAD
PANTOTENATO CoA-SH
5. Cataliza una DESCARBOXILACIÓN OXIDATIVA, proceso de oxidación irreversible,
donde el piruvato pierde un grupo carboxilo en forma de molécula de CO2, mientras
que los dos carbonos restantes se transforman en el grupo acetilo del Acetil-CoA
ESTRUCTURA DEL COMPLEJO DE LA PIRUVATO DESHIDROGENASA

E1= PIRUVATO DESHIDROGENASA

E2= DIHIDROLIPOIL TRANSACETILASA

E3= DIHIDROLIPOIL DESHIDROGENASA

E2
LA PIRUVATO DESHIDROGENASA CONSTA DE 3 ENZIMAS
Y CINCO COENZIMAS
E1= PIRUVATO DESHIDROGENASA
Contiene TPP en su sitio activo

E2= DIHIDROLIPOIL TRANSACETILASA

Contiene 3 dominios: de unión a lipoilo, de unión a E1 y E3 y
el dominio de aciltransferasa y CoA-SH

E3= DIHIDROLIPOIL DESHIDROGENASA

Contiene FAD y NAD
Grupos prostéticos
 EL COENZIMA CONTIENE UN GRUPO TIOL REACTIVO (-SH) DE IMPORTANCIA
FUNDAMENTAL EN SU PAPEL COMO TRANSPORTADOR DE GRUPOS ACILO
EN DIVERSAS REACCIONES METABÓLICAS
LOS GRUPOS ACILO SE UNEN COVALENTEMENTE AL GRUPO TIOL FORMANDO
TIOÉSTERES QUE SON DE ELEVADA ENERGÍA LIBRE DE HIDRÓLISIS
Grupo tiol
reactivo

Adenina

b-Mercapto-
etilamina Ácido pentoténico
Ribosa 3’-fosfato

3’-Fosfoadenosina difosfato
Coenzima A
EL LIPOATO TIENE DOS GRUPOS TIOL QUE PUEDEN SER OXIDADOS
REVERSIBLEMENTE FORMANDO UN ENLACE DISULFURO

PUEDE TRANSPORTAR ELECTRONES Y GRUPOS ACILO

LOS NUCLEÓTIDOS DE NICOTINAMIDA

DESHIDROGENACIÓN

340 nm

OXIDORREDUCTASAS
“DESHIDROGENASAS”
260 nm

NAD+ + 2e- + 2H+ NADH + H+ E’o

NADP+ + 2e- + 2H+ NADPH + H+ E’o

LOS NUCLEÓTIDOS DE FLAVINA

Se encuentran fuertemente
unidos a las FLAVOPROTEÍNAS
GRUPOS PROSTÉTICOS
TIPO DE REACCIONES LLEVADAS A CABO DURANTE LA DESCARBOXILACIÓN
OXIDATIVA DEL PIRUVATO:

1. Descarboxilación.-El piruvato se combina con el TPP y se descarboxila formando

un hidroxietilo
2. Oxidación .- El grupo hidroxietilo se oxida formando un grupo acetilo E1

3. Transferencia .- El acetilo formado se transfiere al lipoato que está unido a un

residuo de lisina en E2
DESCARBOXILACIÓN OXIDATIVA DEL PIRUVATO A ACETIL-CoA POR
EL COMPLEJO DE LA PIRUVATO DESHIDROGENASA

Piruvato

Hidroxietil-
TPP

Piruvato Dihidrolipoil Dihidrolipoil

deshidrogenasa transacetilasa deshidrogenasa
E1 E2 E3
DURANTE LA DESCARBOXILACIÓN OXIDATIVA, LOS INTERMEDIARIOS NUNCA
ABANDONAN LA SUPERFICIE ENZIMÁTICA
VISIÓN GENERAL DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO
4 de las 8 reacciones son
oxidaciones:
requieren coenzimas que entran
oxidadas y salen reducidas, lo que
implica que los sustratos quedaron
oxidados

Los productos del Ciclo

son CO2, ATP/GTP,
NADH y FADH2

En una vuelta del Ciclo

hay dos
descarboxilaciones que
no tienen los CARBONOS
transportados por la
Acetil-Co-A
REACCIÓN 1. Formación de citrato

1. Primera reacción del ciclo de Krebs

2. Es una reacción irreversible ΔG’0= -32.2 kJ/mol
3. Es catalizada por la CITRATO SINTASA
4. Cataliza la condensación de Acetil-CoA con oxalacetato para dar lugar a citrato
REACCIÓN 2. Formación de isocitrato vía cis-aconitato

1. Es una reacción reversible ΔG’o=13.3 kJ/mol

2. Es catalizada por la aconitasa (aconitato hidratasa)
3. Requiere de un centro ferro-sulfurado (no es una reacción redox)
4. Cataliza la isomerización reversible del citrato y el isocitrato, con el cis-aconitato
como intermediario
LA ACONITASA CONTIENE UNA AGRUPACIÓN [4 Fe-4S]
REACCIÓN 3. OXIDACIÓN DEL ISOCITRATO A a-CETOGLUTARATO Y CO2

1. Es una reacción irreversible

2. Es catalizada por la isocitrato deshidrogenasa (IDH)
3. Requiere de Mg2+ o Mn2+ y NAD+ o NADP+ (dependiendo de la especie)
4. Cataliza la descarboxilación oxidativa del isocitrato dando lugar a la formación
de a-cetoglutarato

ES UN HOMODÍMERO

IDH (NADP+) de corazón

de mamíferos

Ceccarelli et al. (2002)

J. Biol. Chem. 277:43454
MECANISMO CATALÍTICO DE LA ISOCITRATO DESHIDROGENASA

EL ISOCITRATO PIERDE UN CARBONO POR DESCARBOXILACIÓN OXIDATIVA

1. El isocitrato se une al enzima y es oxidado a través de una transferencia de

hidruro al NAD+ O NADP+ formando oxalosuccinato

2. El carbonilo resultante favorece el paso de descarboxilación junto con la interacción

con el Mn2+

3. Reordenamiento del intermediario enol para generar a-cetoglutarato

REACCIÓN 4. OXIDACIÓN DEL a-CETOGLUTARATO A
SUCCINIL-CoA Y CO2
1. Es una reacción irreversible ΔG’0= -33.5 kJ/mol
2. Es catalizada por el complejo de la a-cetoglutarato deshidogenasa
3. Cataliza la descarboxilación oxidativa del a-cetoglutarato liberando los
segundos CO2 y NADH del ciclo
4. EL COMPLEJO ES ANÁLOGO AL DE LA PIRUVATO DESHIDROGENASA
E1 (a-cetoglutarato deshidrogenasa)
E2 (dihidrolipoil transuccinilasa)
E3 (dihidrolipoil deshidrogenasa) idéntica al de la piruvato deshidrogenasa

Complejo de la
a-cetoglutarato
deshidrogenasa
a-cetoglutarato Succinil-CoA
REACCIÓN 5. CONVERSIÓN DE SUCCINIL-CoA EN SUCCINATO

Succinil- CoA sintetasa : Fosforilación a nivel de

sustrato – Rotura tioester y formacion de GTP

Succinil-CoA
sintetasa

Succinil-CoA Succinato
REACCIÓN 5. CONVERSIÓN DE SUCCINIL-CoA EN SUCCINATO

1. Es una reacción reversible ΔG’0= -2.9 kJ/mol

2. Es catalizada por la succinil-CoA sintetasa (Succínico tiocinasa) indicando
la participación de un nucleósido trifosfato
3. Es la hidrólisis del enlace tioéster favoreciendo la síntesis de un enlace fosfoanhídrido
del GTP (MAMÍFEROS) o del ATP (PLANTAS Y BACTERIAS)

Es un heterotetrámero

Las subunidades a contienen el residuo

His246 y el sitio de unión para el CoA

Las subunidades b confieren especificidad

por ADP o GDP

CoA

Wolodko et al. (1994)

J. Biol. Chem. 269:10883
 1 MOLÉCULA DE ACETIL-CoA

OXIDADO HASTA:
2 MOLÉCULAS DE CO2

2 NADHs

1 GTP

PARA COMPLETAR EL CICLO EL SUCCINATO DEBE SER CONVERTIDO EN

OXALOACETATO, LO CUAL SE CONSIGUE MEDIANTE LAS TRES REACCIONES
RESTANTES DEL CICLO
CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO
REACCIÓN 6. OXIDACIÓN DEL SUCCINATO A FUMARATO

Succinato
deshidrogenasa

Succinato Fumarato
 REACCIÓN 6. OXIDACIÓN DEL SUCCINATO A FUMARATO
1. Es una reacción reversible ΔG’0= 0 kJ/mol
2. Llevada a cabo por la succinato deshidrogenasa (COMPLEJO II: succinato:quinona
oxidoreductasa)
Es una proteína unida a la membrana interna mitocondrial (en procariotas unida a la
membrana plasmática)
3. Requiere de FAD+ y de agrupaciones Fe-Sulfurados

Es un tetrámero

Agrupaciones Fe - S

FAD+ Y QUINONAS

Oyedotun y Lemire (2004)

J. Biol. Chem. 279:9424
La Succinato deshidrogenasa es una proteína unida a la
membrana interna mitocondrial

(en procariotas unida a la membrana plasmática)

Oyedotun y Lemire (2004)

J. Biol. Chem. 279:9424
LA SUCCINATO DESHIDROGENASA CATALIZA LA OXIDACIÓN
DEL SUCCINATO PARA FORMAR FUMARATO

ESPECIE OXIDADA: SUCCINATO

ESPECIE REDUCIDA: FADH2

PASO DE ELECTRONES DESDE EL SUCCINATO A TRAVÉS DEL FAD Y LOS

CENTROS Fe-S HACÍA LA CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES
REACCIÓN 7. HIDRATACIÓN DEL FUMARATO A MALATO

1. Es una reacción reversible ΔG’0= -3.8 kJ/mol

2. Llevada a cabo por la Fumarasa (Fumarato hidratasa)
3. Cataliza la hidratación del doble enlace del fumarato a través de un estado de
transición de un carbanión

Fumarasa

Fumarato

Fumarasa

Malato
 REACCIÓN 8. OXIDACIÓN DE MALATO A OXALOACETATO
1. Última reacción del ciclo
2. Es una reacción reversible
3. Catalizada por la malato deshidrogenasa
4. Requiere de NAD+
5. El enzima unido al NAD+ cataliza la oxidación del malato a oxalacetato,
mediante la oxidación del grupo hidroxilo del malato para formar una cetona

Malato
deshidrogenasa

Malato Oxaloacetato
 GLUCOSA
ÁCIDOS GRASOS AMINOÁCIDOS
REACCIONES IRREVERSIBLES
PIRUVATO

CONDENSACIÓN
ACETIL-CoA
ISOMERIZACIÓN
DESCARBOXILACIÓN
CITRATO OXIDATIVA

OXALOACETATO ISOCITRATO

DESHIDRATACIÓN a-CETOGLUTARATO

MALATO SUCCINIL-CoA
DESCARBOXILACIÓN
OXIDATIVA
FUMARATO SUCCINATO
FOSFORILACIÓN A
NIVEL DE SUSTRATO
HIDRATACIÓN
DESHIDROGENACIÓN
PRODUCTOS DE UNA VUELTA DEL CICLO=
3 NADH, 1 FADH2, 1 GTP Y 2 CO2
POR UNA VUELTA DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO
SE PRODUCEN LAS SIGUIENTES TRANSFORMACIONES:

1. Un grupo acetilo es oxidado a dos moléculas de CO2, un proceso en el

que participan 4 pares de electrones (los átomos de carbono del acetilo
entrante al ciclo “Acetil-CoA” NO SE OXIDAN)

2. Tres moléculas de NAD+ son reducidas a NADH (3 pares de e-)

3. Una molécula de FAD+ es reducida a FADH2 (1 par de e-)

4. Se produce un grupo fosfato de “alta energía” en forma de GTP (o ATP)

8 electrones CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES

NADH (2 e-) rinde 3 ATP por lo tanto de 3 NADH se producen 9 ATP

FADH2 (2 e-) rinde 3 ATP

UNA VUELTA DEL CICLO DE KREBS GENERA 12 ATP

REGULACIÓN DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO
REGULACIÓN DE LA PRODUCCIÓN DE ACETIL-CoA A
TRAVÉS DEL COMPLEJO DE LA PIRUVATO DESHIDROGENASA

E1 + E2 +E3
1) POR ALOSTERISMO

ES INHIBIDA ALOSTÉRICAMENTE
POR LOS METABOLITOS QUE INDICAN UNA
SUFICIENCIA DE ENERGÍA METABÓLICA
(ATP, Acetil-CoA, NADH y ácidos grasos)

ES ACTIVADA CUANDO LAS DEMANDAS

ENERGÉTIAS SON MAYORES
(AMP, CoA, NAD+, Ca2+

2) POR MODIFICACIÓN COVALENTE

EL COMPLEJO ES INHIBIDO POR LA FOSFORILACIÓN DE E1
REGULACIÓN DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO
ENZIMAS QUE CATALIZAN
LAS REACCIONES
IRREVERSIBLES DEL
CICLO:
CITRATO SINTASA

ISOCITRATO
DESHIDROGENASA

a-CETOGLUTARATO
DESHIDROGENASA
 MECANISMOS DE REGULACIÓN DEL CICLO DE KREBS

3 MECANISMOS:

1) DISPONIBILIDAD DE SUSTRATO

2) INHIBICIÓN POR PRODUCTO

3) INHIBICIÓN COMPETITIVA POR RETROALIMENTACIÓN

DE LOS INTERMEDIARIOS QUE SE LOCALIZAN MÁS
ADELANTE A LO LARGO DEL CICLO

4) POR MODIFICACIÓN COVALENTE (ISOCITRATO

DESHIDROGENASA SE REGULA POR FOSFORILACIÓN)
 REGULACIÓN DE LA CITRATO SINTASA

1) LA ACTIVIDAD DE ESTE ENZIMA VARÍA EN FUNCIÓN DE

LA CONCENTRACIÓN DE SUSTRATOS (OXALACETATO Y
ACETIL-CoA)

DISPONIBILIDAD DE SUSTRATO

2) EL CITRATO ES UN INHIBIDOR COMPETITIVO, ÁSÍ COMO

EL SUCCINIL-CoA (POR RETROALIMENTACIÓN)

3) ES INHIBIDA POR NADH

4) EL ATP
REGULACIÓN DE LA ISOCITRATO DESHIDROGENASA

1) POR MODIFICACIÓN COVALENTE:

LA FOSFORILACIÓN DEL RESIDUO

SER113 (SITIO ACTIVO)
INACTIVA EL ENZIMA

2) POR ALOSTERISMO

MODULADOR POSITIVO ES EL ADP

3) ES ACTIVADA POR Ca2+

REGULACIÓN DE LA a-CETOGLUTARATO
DESHIDROGENASA

1) ES INHIBIDA POR SU PRODUCTO EL SUCCINIL-CoA

2) POR NADH

3) ES ACTIVADA POR Ca2+

EL CICLO DE KREBS ES
UN CICLO ANFIBÓLICO PORQUE:
A)ES CATABÓLICO (Se lleva a cabo la oxidación del carbono
proveniente de otras vías)
B) ES ANABÓLICO (Es proveedor de esqueletos carbonados
para otras vías metabólicas)
Glucosa
Proteínas Lípidos
Acetil-CoA
SÍNTESIS

CICLO
DE
KREBS CO2
VÍAS QUE UTILIZAN INTERMEDIARIOS DEL CICLO:

1. LA BIOSÍNTESIS DE GLUCOSA (GLUCONEOGÉNESIS)

SE UTILIZA EL MALATO

2. LA BIOSÍNTESIS DE LÍPIDOS (ÁCIDOS GRASOS Y

ESTEROLES)
SE UTILIZA CITRATO Y SUCCINIL-CoA

3. LA BIOSÍNTESIS DE AMINOÁCIDOS
SE UTILIZA EL a-CETOGLUTARATO, EL OXALOACETATO
(POR TRANSAMINACIÓN)

4. LA BIOSÍNTESIS DE PORFIRINAS
UTILIZA EL SUCCINIL-CoA

EL CICLO ES PROVEEDOR DE ESQUELETOS CARBONADOS

REACCIONES QUE REPONEN LOS INTERMEDIARIOS
DEL CICLO DE KREBS

DENOMINADAS REACCIONES ANAPLERÓTICAS (RELLENAR)

Piruvato carboxilasa
1)

PEP carboxicinasa
2) Fosfoenolpiruvato +CO2 + GDP Oxalacetato + GTP

PEP carboxilasa
3) FOSFOENOLPIRUVATO + HCO3- OXALACETATO + Pi

Enzima málico
-
4) PIRUVATO + HCO3 + NAD(P)H MALATO + NAD(P)+
DIAGRAMA DEL CICLO DEL
ÁCIDO CÍTRICO
QUE INDICA
LAS
POSICIONES
EN LAS QUE SE RETIRAN
ALGUNOS METABOLITOS
(VÍAS ANABÓLICAS)

Y LOS PUNTOS EN LOS

QUE LAS REACCIONES
ANAPLERÓTICAS
REPONEN LOS
INTERMEDIARIOS
DEL CICLO QUE SE
HAN AGOTADO