I.

INTRODUCCION

El microscopio óptico es un instrumento de suma importancia en el laboratorio de biología través

del cual se puede obtener imágenes dimensionales del objeto observado al ser atravesado por
la luz mirando a través de los oculares. De un lado el microscopio provee aumento y permite ver
detalles de objetos tan pequeños que no son visibles a simple vista (menor de 0.1mm) existe una
gran variedad que, según la fuente de iluminación utilizada
En los últimos tres siglos ha permitido ampliar el campo de las investigaciones biológicas y se ha
convertido en el instrumento básico para abrir nuevas fronteras en la biología. La lupa puede
considerarse como el microscopio más simple y fue usada inicialmente por algunos
investigadores para adquirir los primeros conocimientos del mundo microscópico. Posteriormente
se perfeccionó y en la actualidad existen varios tipos de microscopios, algunos de ellos altamente
especializados para una gran variedad de usos.
El microscopio, al aumentar la imagen de los objetos, nos permite analizar la estructura, forma y
tamaño de diferente tipo de muestras.
En esta práctica se utilizará el microscopio compuesto en el cual se combinan dos lentes, el
ocular y el objetivo, para aumentar la imagen.

 Se agrupan en:
MICROSCOPIOS SEGÚN EL SISTEMA DE ILUMINACIÓN

 MICROSCOPIOS ÓPTICOS. La fuente de iluminación es la luz. Amplían la imagen entre

40 y 1000 veces.
a) De campo claro. Permiten la observación de preparaciones en sus colores naturales o
contrastados mediante tinciones, resaltadas sobre un fondo brillante.
b) De campo oscuro. Permiten la observación de formas celulares que destacan brillantes
sobre un fondo oscuro. Este afecto se consigue utilizando diafragmas especiales.
c) De fluorescencia. La fuente de iluminación proporciona luz ultravioleta que excita ciertas
moléculas presentes en las células (bien de forma natural o añadida a la preparación)
que emiten fluorescencia en el espacio visible.
  MICROSCOPIOS ELECTRONICOS: La fuente de iluminación es un chorro de electrones
y los lentes son electroimanes.
a) De transmisión. Permiten la observación de muestras teñidas con sustancias que son
resistentes al paso de electrones y cortadas dando lugar a láminas finas. La imagen
puede recogerse en una película fotográfica o puede observarse en una pantalla. Se
amplía la imagen hasta un millón de veces.
b) De barrido. Permite la observación de células enteras, sin necesidad de cortes finos, de
modo que aparecen los relieves originales y las superficies externas. La imagen que se
observa es tridimensional. Amplia la imagen hasta 100,000 veces.

Durante la práctica se empleara el microscopio óptico de campo claro, cuyos componentes

fundamentales son mecánicos, de iluminación y ópticos. La capacidad de un microscopio
para observar diferentes estructuras se refleja en el número de aumentos y en el límite de
resolución

 MICROSCOPIOS SEGÚN EL NÚMERO DE LENTES

 MICROSCOPIO SIMPLE
Este tipo de microscopio dispone de una única lente y es más habitualmente conocido como lupa.
Aun así, con un microscopio simple pueden conseguirse grandes aumentos. Hay que destacar
que durante el siglo XVII, Antonie van Leeuwenhoek utilizó este tipo de microscopios para
conseguir el mayor aumento alcanzado hasta el momento. A día de hoy, uno de los conceptos
basados en la misma idea es el foldscope.
  MICROSCOPIO COMPUESTO
Este tipo de microscopio es aquél que dispone de por lo menos dos lentes. Este es el caso más
habitual en todos los microscopios modernos. Normalmente los microscopios disponen de
distintas lentes tanto en el objetivo como en el ocultar para corregir las aberraciones ópticas y
alcanzar una imagen con buena calidad. La invención del microscopio está asociada con la
invención del microscopio compuesto. Este apareció en los Países Bajos a finales del siglo XVI.

 MICROSCOPIOS SEGÚN LA TRANSMISIÓN DE LA LUZ

 MICROSCOPIO DE LUZ TRANSMITIDA

En este tipo de microscopio la luz atraviesa la muestra. Para esta clase de microscopios es
necesario preparar la muestra cortándola en láminas muy finas. La muestra se ilumina desde
debajo la platina. La preparación de la muestra hace que esta sea semitransparente y parte de
la luz pueda atravesarla y llegar al objetivo para ser observada posteriormente a través del ocular.
En general este es el sistema de iluminación más utilizado entre los microscopios obticos.

 MICROSCOPIO DE LUZ REFLEJADA

En este caso la luz ilumina la muestra y parte de esta es reflejada y dirigida al objetivo. De este
modo es necesario iluminar la muestra desde la parte superior de la platina. Este tipo de
microscopía es utilizada para examinar materiales opacos como pueden ser estructuras
metálicas, materiales cerámicos, etc. Existen microscopios ópticos que permiten los dos tipos de
iluminación de modo que es posible observar tanto muestras semitransparentes como opacas.
Los microscopios estereoscópicos. (permiten observar la muestra en tres dimensiones) son
siempre de luz reflejada.
  MICROSCOPIOS SEGÚN EL NÚMERO DE OCULAR

 Microscopio monocular

Este tipo de microscopio dispone de un solo ocular a través del cual se puede observar la muestra.
Es el tipo más sencillo y es ideal para aficionados a la microscopía o para alguien que se
introduce en este campo. Su desventaja principal es que puede resultar un poco incómodo si
tiene que utilizarse durante largos periodos de tiempo. Por este motivo los microscopios
monoculares no son en general utilizados en ámbitos profesionales.

 Microscopio binocular

Los microscopios binoculares disponen, como indica su nombre, de dos oculares.

Esto permite observar la muestra simultáneamente con los dos ojos resultando en una mayor
comodidad para el usuario. Este es el tipo de microscopio más utilizado en los laboratorios de
investigación. La distancia entre los dos oculares puede regularse para adaptarse a las
necesidades del usuario. No hay que confundir el microscopio binocular con el microscopio. El
microscopio estereoscópico siempre es binocular. Sin embargo, no todo microscopio binocular
es estereoscópico.
  Microscopio trinocular

El microscopio trinocular está equipado con dos oculares para observar la muestra además de
un tercer ocular para conectar una cámara. En el caso de conectar una cámara digital esta puede
conectarse a un ordenador para ver las imágenes de la muestra en tiempo real. Con este
microscopio es posible observar la muestra y al mismo tiempo tomar fotografías o videos con la
cámara.
Microscopios según la configuración de los elementos

 Microscopio invertido

Los microscopios convencionales tienen una configuración vertical. Esto significa que el foco de
luz se encuentra en la parte inferior de la estructura. A continuación hay la platina donde se
coloca la muestra y finalmente el cabezal con los objetivos y el ocular en la parte superior. Esta
es la configuración más habitual pero no la única.
Existen también los microscopios invertidos. Esto microscopios tienen una configuración
totalmente opuesta a la del microscopio vertical. La muestra es iluminada desde la parte superior
y los elementos ópticos se encuentran debajo la platina. Con este tipo de microscopio es posible
observar muestras colocadas en el fondo de un recipiente. Esto es muy útil para mantenerlas
hidratadas y poder así observar muestras vivas y procesos biológicos que duran días.
  Microscopios digitales

Son aquellos que capturan una imagen digital de la muestra. Esto se consigue conectando una
cámara digital en lugar del ocular. Existen microscopios digitales con distintas configuraciones.
Habitualmente deben conectarse al ordenador para poder transmitir las imágenes y a
continuación visualizarlas. También es cierto que existen microscopios digitales con una pantalla
incorporada. Estos permiten ver la muestra en la pantalla y almacenar imágenes que pueden
transmitirse a continuación a un ordenador mediante conexión USB o tarjeta SD.
Un tipo especial de microscopios digitales son los microscopios USB. Estos microscopios
consisten únicamente en una lente de gran aumento y una cámara digital. El aumento que se
alcanza es limitado en comparación con un microscopio óptico convencional. Aun así son
instrumentos muy versátiles y útiles para observar objetos cotidianos. Los microscopios USB se
conectan al ordenador mediante conexión USB y permiten guardar imágenes de la muestra.

 Microscopio estereoscópico

Un tipo de microscopio que permite observar la muestra de forma tridimensional. Estos

microscopios están equipados siempre con dos oculares. La imagen de la muestra que llega a
cada ocular es ligeramente distinta de modo que cuando se combinan se consigue el efecto 3D.
Este efecto no podría conseguirse si la muestra se observara con un solo ocular.
El aumento que se consigue con el microscopio estereoscópico es inferior al que se consigue
con un microscopio óptico convencional. Sin embargo, los microscopios convencionales solo
permiten una observación bidimensional de la muestra. Los microscopios estereoscópicos son
muy utilizados en aplicaciones donde debe manipularse la muestra mientras se observa. Por
ejemplo para el montaje de circuitos o relojes.
Otros tipos de microscopios
Además de los microscopios anteriormente presentados existen multitud de técnicas de
microscopía adicionales optimizadas para tipos de muestra específicas. Algunos de los que vale
la pena mencionar son:

1) Microscopio con focal

Este es un tipo de microscopio de fluorescencia. En lugar de iluminar la muestra de forma global

se ilumina punto a punto de forma sucesiva y se reconstruye la imagen al final del proceso. Este
proceso de escaneado de la muestra es similar al que se produce en los microscopios
electrónicos de barrido. Este tipo de microscopio fue inventado por Marvin Minsky en 1957.
 2) Microscopio de campo oscuro

Esta técnica de microscopía consiste en iluminar la muestra oblicuamente. De este modo los
rayos de luz que llegan al objetivo no provienen directamente del foco de luz sino que han sido
dispersados primero por la muestra. Esta técnica permite ver muestras que de otro modo no
serían visibles debido a su transparencia. También tiene la ventaja que no requiere teñir la
muestra para aumentar su contraste y poder observarla.

Muestra observada en un microscopio de campo

oscuro

3) Microscopio de contraste de fases

La luz viaja a distintas velocidades dependiendo del medio de propagación. Esta propiedad es
utilizada en el microscopio de contraste de fases ya que la luz atraviesa la muestra con distintas
velocidades en distintas secciones. Este efecto es amplificado para generar la imagen de la
muestra. Mediante esta técnica no hace falta utilizar tintes y, por lo tanto, pueden observarse
células vivas. El microscopio de contraste de fases fue inventado por Frits Zernike en 1932 y
recibió por ello el premio Nobel de física en 1953
 II. OBJETIVOS
 Conocer las diferentes partes del microscopio compuesto y sus respectivas funciones.
 Reconocer la importancia del microscopio en el desarrollo de las ciencias biológicas.
 Observar diversas muestras en el microscopio.
 Nos permite reconocer diferentes tipos de microorganismos o dependiendo lo abservado

III. MATERIALES:

*Material de vidrio:
 Laminas porta objetos
 Laminas cubre objetos

*Material biológico:
 Agua estancada
 Agua destilada
 Algodón
 Alcohol de 70°
 Papel de periódico
*Equipos:
 Microscopios ópticos
 Agujas o lancetas

3.1 PROCEDIMIENTO ( no se realizó por el tiempo )

a) Cuidados del microscopio

Es importante tener en cuenta los siguientes cuidados y precauciones al usar el microscopio:

Cuando se transporte el microscopio tómelo siempre con las dos manos. Nunca tenga objetos
adicionales en sus manos.
Al colocar el microscopio sobre la mesa, sitúelo a unos 10 o 15 cm del borde.
Si se requiere limpiar los lentes utilice sólo el papel y solución destinada para tal fin. No utilice
ningún otro tipo de papel.
Cuando termine de trabajar deje el microscopio en el lente objetivo de 4X.

Posición correcta en el microscopio papel especial para limpieza del microscopio

Partes del microscopio compuesto y sus funciones

1. PARTE MECANICA

 Base: Parte inferior del microscopio que hace contacto con la mesa.
Columna o Brazo: Estructura rígida situada en la parte posterior del microscopio, sostiene el

 Columna de brazo: estructura regida situada en la parte superior del microscopio,

sostiene el tubo binocular y la platina, y sirve para transportarlo.

 Tubo: Pieza vertical que sostiene el revólver y las lentes oculares.

 Revólver: Sistema giratorio localizado en la parte inferior del tubo, al cual se incorporan
los lentes objetivos.

 Tornillo macrométrico: Sirve para alejar o acercar el tubo y la platina, permite enfocar
la imagen.

 Tornillo micrométrico: Sirve para dar claridad a la imagen.

 Platina: Lámina con un orificio central en donde se coloca la muestra que se desea
observar.
 Carro: Sistema de pinzas colocado encima de la platina. Sirve para desplazar la
muestra hacía adelante y hacía atrás, y de derecha a izquierda.

2. PARTE OPTICA

 Oculares: Lentes convergentes situados en la parte superior del tubo. Aumentan la

imagen que proviene del objetivo. Su aumento es de 10X.

 Objetivos: Lentes convergentes incorporados en la parte inferior del revólver. Aumenta

la imagen del objeto observado.
 Condensador: Sistema de lentes convergentes encargados de concentrar los rayos de
luz en el centro del orificio de la platina. Sirve para enfocar la luz hacia el objeto que se
va a examinar.

3. SISTEMA DE ILUMINACION

 Diafragma o Iris: Esta situado debajo de la platina, inmediatamente debajo del

condensador. Sirve para regular la entrada de luz al condensador y se acciona
mediante una palanca.

 Fuente de luz: Bombilla o espejo incorporado al microscopio.

 b) OBSERVACION DE LA MUESTRA

1.- Imagen Invertida

 Tome un portaobjetos y un cubreobjetos. Asegúrese de que estén limpios.

 Coloque sobre el portaobjetos la muestra (letras del papel periódico “e”) en el centro de
este.
 Deje caer una gota de aceite sobre la muestra.
 Coloque el cubreobjetos sobre la muestra. Déjelo caer lentamente para evitar la
formación de burbujas.

IV. RESULTADOS

 Al observar la muestra de la letra “e” de papel periódico se observa que la letra esta
invertida.
 Se observa la letra invertida y aumentada por la capacidad de los lentes que están
ubicados en los oculares.
 Cuando observamos con el objetivo de color rojo que tiene una capacidad de 4 x se
multiplica por la capacidad de los oculares que en este caso es de 10 x teniendo como
resultado lo siguiente:
4x.10x = 40x veces su tamaño original
 Cuando vamos cambiando de objetivos la imagen va aumentando hasta lo máximo que
es 1000x veces su tamaño original.
 Al aumentar el tamaño de la imagen vamos observando: fibras del papel periódico y
celulosas.
 También observamos que la tinta de la letra no está completa sino tiene espacios.
V. CONCLUSIONES

 El microscopio es un equipo muy importante en el laboratorio ya que nos da la

posibilidad de poder observar microorganismos.
 También es un equipo que requiere de cuidados especiales para su buen uso y
mantenimiento.

VI. BIBLIOGRAFIA

 ACEVEDO T., M. Y OTROS. Conciencia 6. Grupo Editorial Norma. Bogotá. 2003.

 CARRILLO CH., E. Y OTROS. Contextos Naturales 6. Editorial Santillana. Bogotá.
2004.
 CASTILLO S., C. F Y OTROS. Descubrir 6. Grupo Editorial Norma. Bogotá. 1991
 LINETH D. Y LOZANO P. Ciencias Naturales y Educación Ambiental, Vida 6. Editorial
Voluntad. Bogotá. 2005.
 http://www.tiendamicroscopios.com