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    Tricrómica de Pollack

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    alejandro perez sanchez
    Este documento describe un método tricrómico de Pollack para teñir cortes histológicos. Incluye instrucciones detalladas para preparar soluciones de hematoxilina, tricrómica de Pollack y ácido acético glacial, así como los pasos del proceso de teñido que involucra desparafinado, teñido, diferenciación y montaje. El resultado es núcleo negro, colágena verde azulada, músculo rojo y queratina rojo anaranjado.

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    alejandro perez sanchez
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    Este documento describe un método tricrómico de Pollack para teñir cortes histológicos. Incluye instrucciones detalladas para preparar soluciones de hematoxilina, tricrómica de Pollack y ácido acético glacial, así como los pasos del proceso de teñido que involucra desparafinado, teñido, diferenciación y montaje. El resultado es núcleo negro, colágena verde azulada, músculo rojo y queratina rojo anaranjado.

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    Tricrómica de Pollack

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    de 3

    MÉTODO: TRICRÓMICA DE POLLACK 1

    Fijador: Bouin
    Cortes: Histosec a 6 mµ.

    Soluciones:

    Hematoxilina de Weigerth

    Sol. A Hematoxilina en polvo 1 g.


    Alcohol de 96% 100 ml.

    Sol. B Cloruro férrico al 29% 4 ml.


    Agua destilada (de calidad óptima) 95 ml.
    HCl concentrado (calidad reactivo) 1 ml.

    Solución de Trabajo

    Unir volúmenes iguales de Solución A y B momentos antes de colorear.

    Tricrómica de Pollack

    Fucsina ácida 0,5 g.


    Ponceau 2R 1 g.
    Verde claro S.F. 0.45 g.
    Orange G 0.75 g.
    Ácido fosfotúngstico 1.5 g.
    Ácido fosfomolíbdico 1.5 g.
    Ácido acético glacial 3 ml.
    Alcohol etílico al 50% 300 ml.

    Preparación

    Disolver el ácido acético en el alcohol, dividir el total de solución en 4 volúmenes iguales, en balones.

    En el primer balón disolver la Fucsina ácida y el Ponceau 2R.


    En el segundo balón disolver el Verde Luz S.F.
    El el tercer balón disolver el Orange G y el Ácido fosfotúngstico
    En el cuarto balón disolver el Ácido fosfomolíbdico (al calor suave)
    A continuación mezclar y filtrar
    Esta solución se conserva muy bien por un periodo largo de tiempo
    2

    Ácido Acético Glacial

    Ácido acético glacial 100% (grado reactivo) 1 ml.


    Agua destilada 99 ml.

    Técnica de Coloración

    1. Desparafinar en dos cambios de xilol, tiempo 5 minutos c/u.


    2. Neutralizar el xilol en alcohol de 96%, por 5 minutos.
    3. Hidratar en agua destilada, por 5 minutos.
    4. Colorear en Solución de Trabajo de Hematoxilina de Weigert, por 10 minutos.
    5. Baño en agua corriente hasta que el agua sea incolora, por 10 minutos.
    6. Controlar al microscopio la intensidad de la coloración nuclear.
    7. Diferenciar si es necesario en alcohol ácido al 0.5%, por breves segundos.
    8. Controlar al microscopio.
    9. Colorear en Tricrómica de Pollack, por 60 minutos a 24 horas, controlar al microscopio la coloración óptima y por tanto el
    tiempo adecuado.
    10. Lavar el exceso de colorante, en agua destilada brevemente.
    11. Controlar al microscopio la intensidad de coloración de las estructuras histológicas coloreadas.
    12. Diferenciar las estructuras histológicas con sol. de ácido acético glacial.
    13. Baño breve en agua destilada, para eliminar exceso del ácido.
    14. Deshidratar en:
    Alcohol de 70% x 5 minutos
    Alcohol de 96% x 5 minutos
    Alcohol de 96% x 5 minutos
    Alcohol de 96% x 5 minutos
    Etanol Absoluto x 5 minutos
    Etanol Absoluto x 5 minutos
    Etanol Absoluto x 5 minutos

    15. Diafanización o aclaramiento en:


    Xilol x 5 minutos
    Xilol x 5 minutos

    Xilol x 5 minutos

    16. Montaje en bálsamo del Canadá.


    3

    Resultados:

    Núcleo: Color negro.


    Colágena: Color Verde azulado.
    Músculo: Color rojo.
    Queratina: Color rojo naranja.

    José Soldado Muro


    Tecnólogo Médico
    Histólogo

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