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    Práctica 2 Determinación de Cafeína PDF

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    Este documento describe un experimento para determinar la concentración de cafeína en refresco de cola y té usando espectrofotometría UV-Vis. Se prepararon soluciones patrones de cafeína en diferentes concentraciones y se realizó una curva de calibración. Luego, se midieron las muestras de refresco de cola y té, y usando la curva de calibración se calcularon las concentraciones de cafeína, las cuales fueron de aproximadamente 300 mg/L para el refresco de cola y 140 mg/L para el

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    Este documento describe un experimento para determinar la concentración de cafeína en refresco de cola y té usando espectrofotometría UV-Vis. Se prepararon soluciones patrones de cafeína en diferentes concentraciones y se realizó una curva de calibración. Luego, se midieron las muestras de refresco de cola y té, y usando la curva de calibración se calcularon las concentraciones de cafeína, las cuales fueron de aproximadamente 300 mg/L para el refresco de cola y 140 mg/L para el

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    INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

    ESCUELA SUPERIOR DE INGENIERA QUMICA E INDUSTRIAS


    EXTRACTIVAS

    DEPARTAMENTO DE INGENIERA QUMICA INDUSTRIAL


    LABORATORIO DE ESPECTROSCOPIA MOLECULAR Y ATOMICA

    PRCTICA 2
    DETERMINACIN DE CAFENA EN REFRESCO DE COLA
    Y T
    ALUMNO:
    ORANTES MONTES MAURICIO

    SECCIN A
    GRUPO: 3IM69

    PROFESORA
    JEMMIMA TAMARA VAZQUEZ RODRIGUEZ
    Objetivo:
    Manejar con mayor seguridad un espectrofotmetro UV-VIS
    Determinar la concentracin de sustancias orgnicas en muestras problema por medio de una curva
    de calibracin, aplicando la ley de Beer.
    Consideraciones tericas:

    La espectroscopia estudia la interaccin


    Qu ES? de la radiacin electromagntica con la
    materia a nivel de los electrones que
    forman el enlace.

    FUENTE
    MONOCROMADOR
    Partes de un AREA DE MUESTRA
    ESPECTROFO DETECTOR
    TOMETRO REGISTRO

    Las fuentes ms comunes


    FUENTE
    son:
    Deuterio UV
    Tungsteno VIS
    Espectro
    UV-VIS. Cuenta con Rejillas de entrada
    Rendijas de dispersin
    Espejos
    MONOCROMADOR Filtros
    D
    Rejillas de salida
    Y su funcin es el de separar la a
    la que trabaja el analito.

    Celdas de cuarzo
    AREA DE
    MUESTRA Cubetas de cuarzo

    DETECTOR Y Fototubos o
    AREA DE Fotomultiplicadores
    REGISTRO Computadora
    La absorcin de la radiacin ultravioleta o visible, se
    POR produce por lo general como consecuencia de la
    QUE? excitacin de los electrones de enlace.
    PRODE

    Todos los compuestos orgnicos pueden absorber


    radiacin electromagntica porque todos contienen
    Compuestos electrones de valencia que pueden ser excitados a
    Orgnicos niveles de energa ms altos.
    Por qu
    absorben?

    Tiene aplicaciones algo limitadas en el


    anlisis cualitativo debido a que en estos
    Espectroscopia espectros existe un nmero relativamente
    Ultravioleta escaso de mximos o mnimos. Las
    visible
    aplicaciones de los mtodos cuantitativos de
    APLICACIONES absorcin ultravioleta-visible son numerosas
    DETERMINACIN
    y abarcan todos los campos en que se
    DE CAFEINA
    demanda informacin qumica cuantitativa.

    Establece la cantidad de luz absorbida por la


    muestra, aumenta a medida que se
    Ley Lambert- incrementa la cantidad de dicha muestra o
    Beer conforme es mayor el camino ptico de la
    radiacin a travs de la misma.

    Es un alcaloide del grupo de las xantinas, slido


    cristalino, blanco y de sabor amargo, que acta
    CAFEINA
    como una droga psicoactiva, levemente
    disociativa y estimulante por su accin
    antagonista no selectiva de los receptores de
    adenosina

    QUE PASA SI Cuando abusamos de ella se puede volver en


    TOMO nuestra contra. A corto plazo un abuso produce:
    MUCHA nerviosismo, palpitaciones, temblores,
    CAFEINA insomnio, falta de reflejos y en general
    reduccin del rendimiento, ya que la persona al
    estar inquieta se dispersa mucho
    ms.
    CLCULOS PREVIOS DE LAS SOLUCIONES
    C1= 100 ppm
    C1V1=C2V2
    Despejando V1:
    V1=C2V2/C1
    Conociendo los valores de:
    V1 [mL] V2 [mL] C2 [PPM]
    0.5 10 5
    1 10 10
    1.5 10 15
    2 10 20

    Para 5 ppm:
    V1= (5 mg/L)(10 mL)/100 mg/L =0.5 mL

    Para 10 ppm:
    V1= (10 mg/L)(10 mL)/100 mg/L =1 mL

    Para 15 ppm:
    V1= (15 mg/L)(10 mL)/100 mg/L =1.5 mL
    Para 20 ppm:
    V1= (20 mg/L)(10 mL)/100 mg/L =2 mL
    DESARROLLO EXPERIMENTAL

    PREPARACIN 1.PRENDER LA FUENTE 2. PRENDER ESPECTROFOMETRO 3. PRENDER EQUIPO DE COMP.


    ESPECTROFOTOMETRO

    3.APAGAR LA FUENTE 2.APAGAR ESPECTROFOMETRO 1. APAGAR EQUIPO DE COMP. APAGADO


    ESPECTROFOTOMETRO
    Desarrollo experimental:
    DETERMINACIN DE
    CAFENA

    1. Encender la lmpara de Uv. PREPARACIN DEL 4. Seleccionar Velocidad de barrido de 120


    2. Seleccionar el Modo ABS nm/min.
    3. Colocar el intervalo de longitud 5. Colocar las ordenadas lmite entre 0 y 1.5
    de onda entre 300 a 200 nm. EQUIPO
    6. Velocidad de carta 60 nm/min
    7. RUN
    PREPARACIN DE ESTANDARES

    Tener listo material

    Tomar una Alcuota de la solucin


    de cafena 100 ppm dependiendo
    el estndar a preparar

    0.5 ml, 1 ml, 1.5 ml o 2 ml

    Colocar la muestra de cafena en un


    matraz de 10 ml y aforar con la solucin
    de etanol al 10% hasta 10 ml.

    AGITAR PARA HOMOGENIZAR


    CURVA DE CALIBRACIN
    CURVA DE CALIBRACIN

    Ya que los estndares estn preparados se


    procede a realizar la curva de calibracin
    Tener ya con las caractersticas antes
    mencionadas el equipo

    1. EL EQUIPO TE IR PIDIENDO
    ESTANDAR POR ESTANDAR

    PREPARACIN DE SOLUCIONES

    PREPARACIN DE MUESTRAS

    Al tener todo el estndar ledo por el


    espectrofotmetro te quedara un espectro de la
    siguiente forma.
    PREPARACIN DE MUESTRAS
    ESPECTRO FINAL
    CALCULOS
    CLCULOS METODO GRAFICO
    Concentraciones obtenidas con grfico:
    Muestra Coca Cola
    C1= 9 mg/L
    Muestra T
    C2=7 mg/L

    Calculando Concentracin Real;



    = = ( ) = /
    .


    = = ( ) = /
    .

    Clculos mtodo Matemtico


    MUESTRA A V alicu b
    Coca Cola 0.4 0.3 ml
    1 cm
    T 0.3 0.5 ml
    A= abc
    a = A/bc
    a1=0.21/(1cm)(5mg/L)=0.042 L/mg x cm
    a2=0.46/(1cm)(10mg/L)=0.046 L/mg x cm
    a3=0.8/(1cm)(15mg/L)=0.053 L/mg x cm
    a4=1/(1cm)(20mg/L)=0.05 L/mg x cm
    aprom = 0.04775 L/mg x cm

    Ccoca cola = Acoca cola/aprom x b =0.4/(0.04775 L/mg x cm) x (1 cm) = 8.38 mg/L
    CT = AT/aprom x b =0.3/(0.04775 L/mg x cm) x (1 cm) = 6.28 mg/L


    = = . ( ) = . /
    .


    = = . ( ) = . /
    .
    OBSERVACIONES
    1. Durante el preparado de los estndares pudimos notar que la toma de volmenes de
    la solucin madre, esto se observ de manera ms clara a la hora de realizar la curva
    de calibracin.
    2. Se present una mala elaboracin de estndares debido a que se not que dos
    estndares eran iguales.
    3. La alcuota de la coca cola fue muy pequea ya que si se tom en primera valores
    ms grandes se podra salir de los valores de la curva de calibracin.

    CONCLUSIN
    La determinacin de cafena en bebidas es un estudio analtico muy cuidadoso que se debe
    tener consiente que una mala preparacin de muestras o de estndares afectara en como
    una interferencia en dicha experimentacin.

    Usando como solvente una solucin de etanol al 10% y aforando las muestras a 10 ml, todo
    estudio que se haga en la regin UV-VIS debe cumplir con la LEY DE LAMBERT-BEER, la cual
    dice que al graficar la A vs C se obtendr una lnea recta, la preparacin de los estndares
    deber ser exacta y precisa ya que no es recomendable realizar regresiones lineales para
    corregir.

    La coca cola siendo una de las bebidas ms populares de la sociedad mexicana y en general
    del mundo tiene una mayor concentracin de cafena que el t que es un producto natural,
    como se sabe la cafena en pequeas cantidades no es daina, pero tomarla en exceso puede
    llegar a provocar problemas como alteracin o problemas de corazn.

    Se tiene una relacin entre los valores en el mtodo grfico y con el matemtico siendo las
    variaciones menores a 5 %.

    Si la alcuota de la muestra es muy grande puede salirse de la curva de calibracin y esto no


    permitira su cuantificacin, debido a esto las alcuotas fueron pequeas.

    Se afecta por el factor de correccin ya que se aforo la muestra a 10 ml y no se tom directo


    del envase.
    CUESTIONARIO
    1. Explique la ley de Lambert-Beer
    R: Establece la cantidad de luz absorbida por la muestra, aumenta a medida que se incrementa la
    cantidad de dicha muestra o conforme es mayor el camino ptico de la radiacin a travs de la
    misma.
    2. Diga cuales son las principales limitaciones de esta ley
    R: Limitaciones Reales, Instrumentales y Qumicas.

    3. En la ecuacin de Lambert-Beer. Explique que es el coeficiente de Absorcin Molar


    R: Es el coeficiente que indica la capacidad que tienen las especies qumicas para absorber una
    determinada onda de luz.

    4. Explique en que consiste el mtodo de cuantificacin por curva de calibracin.


    R: Consiste en graficar la A vs C y de ah obtener cada C del analito con la absorbancia medida a la
    longitud de onda de cada analito.

    5. Qu otro mtodo de cuantificacin existe y en qu casos puede ser utilizado?


    R: Matemtico cuando se tienen los datos de absortividad y un promedio de ellas, o cuando la
    curva no es una recta por una mala realizacin de estndares.

    6. Defina los siguientes trminos:


    Absorbancia: Medida que refleja cmo se atena la radiacin cuando se atraviesa un elemento.
    Transmitancia: es una magnitud que expresa la cantidad de energa que atraviesa un cuerpo en la
    unidad de tiempo.
    7. Cules son los factores que influyen en los mximos de la absorbancia?
    R: Ancho de celda, absortividad y concentracin

    8. Mencione los factores que influyen en los corrimientos de la longitud de onda


    R: la concentracin y el solvente

    9. Qu caractersticas debe tener los disolventes empleados en la tcnica UV-VIS?


    R: disolver a la muestra, que no reacciones con e analito y que no absorbe Radiacin
    electromagntica a la misma longitud de onda que el analito.

    Referencias
    Department of Chemistry, U. o. (30 de SEPTEMBER de 2010). Espectroscopy ("filled-empty")
    Orbital Interactions. Obtenido de http://chemistry.umeche.maine.edu/CHY252/HOMO-
    LUMO.html

    McBride, J. M. (2011). Espectroscopia UV-VIS. Obtenido de https://sstti.ua.es/es/instrumentacion-


    cientifica/unidad-de-rayos-x-de-monocristal-y-espectroscopias-vibracional-y-
    optica/espectroscopia-ultravioleta-visible.html

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