FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

CATEDRA DE BIOQUMICA

DOCENTE : Dra. Gisela Oliveira Bardales

Dr. Percy Ureta Sierra
TEMA : Determinacin de Glucosa en suero
ALUMNA : Becerra Cueva , Yessica Yvon
CICLO : IV
SECCIN : E
AO : 2017
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RESUMEN

El presente informe abarca de Determinacin de la Glucosa en suero cuya

prctica fue realizada en el laboratorio de Inmunologa el da 07 de Junio del
2017.
En el Marco terico se brindara algunas generalidades de la glucosa, sus
caractersticas y el fundamento de la prctica.
Se desarrollara la determinacin de glucosa en sangre mediante el uso del
reactivo para determinacin de glucosa, previo preparado de tubos los cuales
estn especificados en la parte de procedimientos.
As mismo explicaremos los procedimientos desarrollados en la prctica los
cuales estarn seguidos de imgenes de los mismos.
Al final de los procedimientos se ha elaborado una tabla con los resultados
obtenidos, a los cuales hemos aplicado las frmulas para obtener finalmente el
resultado de la glucosa encontrada en el paciente.
Se adjunta cuestionario de la gua desarrollada como anexo.

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INTRODUCCIN
La glucosa es la principal fuente de energa para el metabolismo celular. Se
obtiene fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena
principalmente en el hgado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento
de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se
mantengan y el almacenamiento en el hgado sea adecuado, se precisa la ayuda
de la insulina, sustancia producida por el pncreas.
La glucosa es un azcar que es utilizado por los tejidos como forma de energa
al combinarlo con el oxgeno de la respiracin. Cuando comemos el azcar en la
sangre se eleva, lo que se consume desaparece de la sangre, para ello hay una
hormona reguladora que es la insulina producida por el pncreas (islotes
pancreticos). Esta hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los
tejidos y sea utilizada en forma de glucgeno, aminocidos, y cidos grasos.
Cuando la glucosa en sangre est muy baja, en condiciones normales por el
ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagn que hace lo contrario y
mantiene los niveles de glucosa en sangre. Cuando la insulina es insuficiente, la
glucosa se acumula en sangre, y si esta situacin se mantiene, da lugarar una
serie de complicaciones en distintos rganos. Esta es la razn principal por la
que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y
alteraciones que tambin la provocan.
El tejido ms sensible a los cambios de la glucemia es el cerebro, en
concentraciones muy bajas o muy altas aparecen sntomas de confusin mental
e inconsciencia.
El mantenimiento de la glucemia, o concentracin plasmtica de glucosa, en los
organismos superiores el fundamental para el funcionamiento de todos los
rganos, al ser la glucosa un metabolito energtico principal.
La coordinacin de los procesos metablicos implicados en este cometido se
lleva a cabo por la relacin de dos hormonas insulina/glucagn. La ingestin de
glucosa o sustancias que la produzcan (almidn, fructosa, galactosa, protenas,
pero no grasas) va seguida, en las personas sanas, por un aumento de la
glucosa en sangre. Este aumento origina la puesta en marcha del mecanismo
regulador: aumento de la utilizacin de glucosa (por gluclisis, entre otras),
aceleracin de la glucogenognesis y disminucin de la glucogenlisis; todo ello
ocurre principalmente mediante la secrecin de insulina, una hormona
pancretica de tipo polipeptdico. En el caso de que la produccin de insulina
est disminuida, la glucosa no puede ser utilizada por las clulas, lo cual
ocasiona niveles elevados de glucosa en sangre (hiperglucemia); as ocurre en

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las personas que sufren diabetes del tipo denominado "dependiente de insulina"
o "tipo 1".
El diagnstico de la diabetes dependiente de insulina es sencillo y se basa en
antecedentes, sntomas clnicos y comprobacin de una hiperglucemia
significativa. Las determinaciones de glucemia basal permiten el diagnstico de
la diabetes, pero constituyen valores puntuales y aislados en el tiempo que no
reflejan los niveles medios de glucemia ni la duracin de la misma. Por lo tanto,
es necesario disponer de pruebas que indiquen el grado del control metablico
de la enfermedad a corto y medio plazo. Estas pruebas estn basadas en el
fenmeno de unin de la glucosa a diversas protenas. Esta glucosilacin tiene
lugar por una reaccin no enzimtica y afecta tanto a protenas de vida media
corta (albmina, hemoglobina, etc.) como de vida media larga (colgeno, mielina,
etc.). La intensidad de la glucosilacin depende de varios factores, siendo los
ms importantes los niveles medios de glucemia, la duracin de la hiperglucemia,
la vida media de las protenas y la concentracin de stas. Como consecuencia,
la medida de la glucosilacin proteica constituye un buen marcador bioqumico
del grado de compensacin del enfermo diabtico.
Los niveles de glucosa en sangre se mantienen en la sangre entre unos lmites
muy estrechos y constantes gracias a la accin de dos hormonas: insulina y
glucagn. En general, dichos valores nunca deben sobrepasar los 110 mg/dl, por
grande que sea la ingestin de hidratos de carbono, ni descender por debajo de
70 mg/dl en condiciones fisiolgicas.

Interpretacin de los datos de laboratorio

Hiperglucemia: Son elevaciones de la glucosa en sangre que cursan con

valores de glucosa mayores a 120 mg/dl.

Diabetes mellitus: sndrome caracterizado por un aumento en los niveles

fisiolgicos de la glucosa y que cursa de manera caracterstica con polifagia,
poliuria y polidipsia. Durante las clases tericas se explicar detalladamente
las pruebas de laboratorio que llevan a su diagnstico.

Disminucin de la tolerancia a la glucosa: glucemia basal inferior a 140

mg/dl y, a las dos horas de sobrecarga oral de glucosa, valores
intermedios entre los fisiolgicos y los tpicos de la diabetes.

Hipoglucemia: hablamos de hipoglucemia cuando los niveles de glucosa en

sangre se sitan entre 40 y 45 mg/dl. La hipoglucemia puede presentarse en
ayunas, o bien ser reactiva a la ingestin de alimentos o a la toma de
medicamentos.
.

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OBJETIVOS

Reconocer la importancia que tiene la glucosa en el organismo y las

diferentes patologas que se presenta por una alteracin en el
metabolismo del analito.

Que capaz de identificar mediante prueba de laboratorio la presencia del

analito (Glucosa).

Identificar la presencia del analito y su aplicacin en la clnica.

Reconocer que pruebas auxiliares ayudan al diagnstico del paciente.

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Dedicatoria:
A nuestros docentes del curso de Bioqumica
por transmitirnos sus conocimientos
y sus experiencias en cada clase,
y a mis padres por el esfuerzo
que hacen y ser el motor para que sea
posible continuar mis estudios.

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MARCO TEORICO
DETERMINACION DE GLUCOSA EN SANGRE

1. La glucosa

Es un glcido o carbohidrato, ms precisamente un monosacrido, la estructura

ms sencilla dentro de los azcares simples, presente en forma libre en las frutas
y la miel. Entre los carbohidratos de absorcin rpida, la glucosa es la que se
absorbe ms rpidamente.

La glucosa es una fuente importante de energa para la mayora de las clulas

del cuerpo, incluidas las del cerebro. Los carbohidratos que se encuentran en las
frutas, los cereales, el pan, la pasta y el arroz se transforman rpidamente en
glucosa en el cuerpo, lo que eleva el nivel de dicho azcar en la sangre.

Las hormonas producidas en el cuerpo llamadas insulina y glucagn ayudan a

controlar los niveles de azcar en la sangre. Es un examen que mide la cantidad
de un azcar llamado glucosa en una muestra de sangre.

2. Caractersticas

La glucosa, libre o combinada, es el compuesto orgnico ms abundante de la

naturaleza. Es la fuente primaria de sntesis de energa de las clulas, mediante
su oxidacin catablica, y es el componente principal de polmeros de
importancia estructural como la celulosa y de polmeros de almacenamiento
energtico como el almidn y el glucgeno.

A partir de su estructura lineal, la D-glucosa sufre una ciclacin hacia su forma

hemiacetlica para dar sus formas furano y pirano (D-glucofuranosa y F-
glucopiranosa) que a su vez presentan anmeros alfa y beta. Estos anmeros
no presentan diferencias de composicin estructural, pero si diferentes
caractersticas fsicas y qumicas.

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La glucosa es uno de los tres monosacridos dietticos, junto con fructosa y

galactosa, que se absorben directamente al torrente sanguneo durante la
digestin. Las clulas lo utilizan como fuente primaria de energa y es un
intermediario metablico. La glucosa es uno de los principales productos de la
fotosntesis y combustible para la respiracin celular.

Todas las frutas naturales tienen cierta cantidad de glucosa (a menudo con
fructosa), que puede extraerse y concentrarse para preparar un azcar
alternativo. Sin embargo, a escala industrial tanto el jarabe de glucosa (disolucin
de glucosa) como la dextrosa (glucosa en polvo) se obtienen a partir de la
hidrlisis enzimtica de almidn de cereales (generalmente trigo o maz).

3. Biosntesis

Los organismos fotoauttrofos, como las plantas, sintetizan la glucosa en la

fotosntesis a partir de compuestos inorgnicos como agua y dixido de carbono,
segn la reaccin:

Los seres hetertrofos, como los animales, son incapaces de realizar este
proceso y toman la glucosa de otros seres vivos o la sintetizan a partir de otros
compuestos orgnicos. Puede obtenerse glucosa a partir de otros azcares,
como fructosa o galactosa. Otra posibilidad es la sntesis de glucosa a partir de
molculas no glucdicas, proceso conocido como gluconeognesis. Hay diversas
molculas precursoras, como el lactato, el oxalacetato y el glicerol.

Tambin existen ciertas bacterias anaerobias que utilizan la glucosa para

generar dixido de carbono y metano segn esta reaccin:

4. Fundamento :

La glucosa por accin de la glucosa oxidasa se transforma en cido Glucnico y

perxido de hidrogeno. El perxido de hidrogeno en presencia de la 4-
aminofenazona y la Peroxidasa se transforma en una quinonimina coloreada
cuyo color es directamente proporcional a la concentracin del analito.

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5. Forma en que se realiza el examen:

Se necesita una muestra de sangre. Esto se realizar antes del procedimiento

de la glucosa a travs de la venopuncin o flebotoma.

Preparacin para el examen:

Despus de no haber comida nada (en ayunas) durante 7-8 horas.

Lo que se siente durante el examen:

Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un

dolor moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin de
picadura. Posteriormente, puede haber algo de sensacin pulstil.

Razones por las que se realiza el examen:

El mdico puede solicitar este examen si uno tiene signos de diabetes. Sin
embargo, otros exmenes (prueba de tolerancia a la glucosa y examen de
glucemia en ayunas) son mejores para diagnosticar la diabetes.

El examen de glucemia tambin se utiliza para monitorear a pacientes que

padezcan diabetes. Tambin se puede hacer si usted presenta:

Un cambio en el comportamiento

Episodios de desmayo

Convulsiones por primera vez

Por qu se hace esta prueba?

Por lo general, la prueba de glucosa en la sangre se hace para detectar la

diabetes mellitus.

Recomendaciones para el anlisis de glucosa?

La forma ms fcil de detectar la diabetes es medir la cantidad de azcar en la

sangre (glucosa) antes de que el paciente coma o beba algo por la maana. En
la mayora de los casos, el paciente deber ayunar durante la noche anterior,
no comer ni beber nada ms que agua despus de la cena y por la maana antes
de la extraccin de sangre.

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UNIVERSIDAD PRIVADA TELESUP

FACULTAD DE SALUD Y NUTRICIN

CARRERA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

LABORATORIO CENTRAL

HOJA DE REQUERIMIENTO DE MATERIALES

ESCUELA: MEDICINA ASIGNATURA: INMUNOLOGA

DOCENTE: DR. GISELA OLIVEIRA BARDALES - PERCY URETA SIERRA

NO LABORATORIO: Seccin E

FECHA DE PRCTICA: 07 DE JUNIO HORARIO: 8:50 12.10 PM

N Y NOMBRE DE LA PRCTICA: N 5 Determinacin de la Glucosa en suero

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CANT. MATERIALES /EQUIPOS CANT. REACTIVOS U OTROS

04 Tubos de ensayo de 13 x 100 Frasco Reactivo de glucosa enzimtica
Pipeta automtica de 10
01 Frasco Pisceta ms agua destilada
200 ul
01 Pipeta automtica de 1000 ul
01 Lpiz marcador
01 Punteras de color amarillo
01 Punteras de color azul
01 Cronometro
01 Ligadura
01 Mascarilla, gorro, etc
Par Guantes
Tubos vacutainer con gel
02
separador
Agujas de doble bisel 1x
01
para vacutainer
Algodn
Alcohol de 70
Gradilla

. .
FIRMA Y NOMBRE DEL ESTUDIANTE JEFE DE LABORATORIO

AUTORIZACIN
PROCEDIMIENTOS

Tendremos en cuenta que todos los procedimientos se realizaran debidamente

con el uso de las medidas de bioseguridad como guardapolvo, gorro, guantes,
mascarillas, etc.

PROCEDIMIENTO 1 - BENEDICT
1. Teniendo ya nuestra de sangre que ha sido sometida a centrifugada .
procedemos a ponerlo al tubo correspondiente segn las indicaciones .

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2. En tres tubos marcados B (Blanco) S (Standard) y D.

En este caso utilizamos un tuvo blanco donde estuvo solo el reactivo , en el otro la
muestra standard , dos muestras 1 (que pertenecan al mismo alumno) y una
muestra 2
3. Los cuales contienen lo
siguiente:

Con la ayuda de la pipeta automatizada procedemos a llenar los respectivos tubos

ya sea con el reactivo de determinacin de glucosa y/o con la muestra .

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Cualitativamente ya podramos decir si ha habido variacin en el color lo que

indicara presencia de glucosa y observamos la diferencia de los mismos

4. Luego procedemos a hacer la lectura en el equipo Espectrofotmetro .

- Primero calibramos el equipo con la base.

Standard Muestra 1

Muestra 2 Muestra 3

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RESULTADOS OBTENIDOS .

TUBOS DENSIDAD ABSORBANCIA FC

OPTICA
Blanco 0.061
Standard 0.290 0.290 0.061 = 0.229 100
= = 436
0.229
Muestra 1 0.330 0.330 0.061 = 0.269 Abs1=436x0.269=117
Muestra 2 (se tom 0.392 0.392 0.061 = 0.331 Abs2=436x0.331=144
del mismo tubo del
paciente de la
muestra 1)
Muestra 3 ( Otro 0.429 0.429 - 0.061 = 0.368 Abs3=436x0.368=160
paciente )

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RECOMENDACIONES

Se recomienda seguir los procedimientos de la gua para obtener mejores

resultados.

Trabajar siempre bajo la supervisin y ayuda del docente a cargo.

Estar en todo momento con el equipo de bioseguridad necesaria como

guantes y mandil.

Calibrar bien el equipo, para una mejor lectura ya que estos al final sern
dato importante para la obtencin de datos, las cuales se encuentran en la
seccin de Resultados de este informe.

Desechar cuidadosamente todos los materiales contaminados y lavar

adecuadamente los materiales de laboratorio.

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CONCLUSIONES

Aprendimos a realizar la prueba de medicin de glucosa en suero con el

reactivo de determinacin de glucosa.

As mismo pudimos observar que al dejar reaccionar el reactivo con la

muestra ya se poda observar una diferencia de colores (cualitativo).

Utilizamos nuevamente el equipo espectrofotmetro para medir la

absorbancia , y con los datos obtenidos pudimos aplicar las frmulas de

para determinar el Fc, y la Abs total de la muestra .

Debemos tomar en cuenta de la D.O obtenida se le debe restar la D.O de

la base.

De los dos alumnos a quienes se le tomo la muestra, uno en el resultado

cuantitavo final luego de aplicar las formulas Fc, y al hallar la Abs. Total

de c/muestra obtuvimos que el primer paciente se encuentra normal

mientras que el segundo se encuentra un poco ms elevado de los valores

normales.

Se cumpli el objetivo de la prctica de laboratorio .

ANEXO: CUESTIONARIO

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1. Cul es la finalidad del blanco? Cmo se ajusta el espectrofotmetro

con el blanco? Ha realizado un blanco de reactivos o de suero? por qu?
- El blanco el es tubo el cual esta solo con la solucin del reactivo es decir
con 2ml de Reactivo de determinacin de glucosa, la finalidad de este es
que al determinar la absorbancia del mismo nos sirve para que una vez
obtenida la observancia de las otras muestras, le restaremos la d.o de
este reactivo para obtener unos mejores resultados; as como tambin
nos sirve para calibrar el espectrofotmetro con este, y es en base a este
que se mide la absorbancia de las muestras restantes.

- Se debe colocar la muestra blanco en la celda respectiva del

espectrofotmetro , luego cerrar el equipo y presionar el botn de 0%ADJ
y luego 100%ADJ , los cuales se muestran en la siguiente figura

2. Calcule la concentracin de glucosa en el suero indicando los clculos

realizados.
El calculo de glucosa total en el suero se encuentran en la parte de
Resultados del informe , los cuales vuelvo a presentar .

TUBOS DENSIDAD ABSORBANCIA FC

OPTICA
Blanco 0.061
Standard 0.290 0.290 0.061 = 0.229 100
= = 436
0.229
Muestra 1 0.330 0.330 0.061 = 0.269 Abs1=436x0.269=117
Muestra 2 (se tom del 0.392 0.392 0.061 = 0.331 Abs2=436x0.331=144
mismo tubo del
paciente de la muestra
1)
Muestra 3 ( Otro 0.429 0.429 - 0.061 = 0.368 Abs3=436x0.368=160
paciente )

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3. Si la concentracin de glucosa hubiera sido superior a 800 mg/dL.

Cmo actuaria?
Primero debemos saber que En un paciente sano: en ningn momento se
superan los 200mg/dL
En un paciente diabtico: la glucemia a las 2 horas es superior a 200
mg/dL y al menos otro valor intermedio es tambin superior a 200 mg/dL.

Puede que el paciente este en un coma hiperglucmico hiperosmolar no-

cetonmico (CHHNC) se caracteriza por una severa hiperglicemia
(niveles de glucosa por encima de 600 a 800 mg/dL) .

El ndice de mortalidad del CHHNC es bastante alto (50% o ms),

primariamente debido a la edad de la poblacin que lo padece a las
causas agudas que lo precipitan.

El tratamiento est primariamente dirigido hacia la sustitucin de fludos y

electrolitos mientras se administran cuidados de soprte. La terapia con
insuina est diseada para hacer retornar lentamente en 24-48 horas los
niveles de glucosa a niveles normales.
Cuando el tratamiento es exitoso, el enfermo puede ser significativamente
sensible a una insulina de ms. En ltimo trmino, el enfermo alcanzar
en control metablico mediante la dieta y/o agentes orales.

4. Para la determinacin ha utilizado un mtodo enzimtico. Se trata de

un mtodo cintico? Fundamente su respuesta.
S, ya que la cintica enzimtica estudia la velocidad de las reacciones
qumicas que son catalizadas por las enzimas. El estudio de la cintica y
de la dinmica qumica de una enzima permite explicar los detalles de su
mecanismo cataltico, su papel en el metabolismo, cmo es controlada su
actividad en la clula y cmo puede ser inhibida su actividad por frmacos
o venenos o potenciada por otro tipo de molculas.

En general, no se determina la concentracin de enzimas en tejidos y/o

fluidos orgnicos, sino su actividad. El motivo es que la concentracin de
enzimas en suero es baja; sin embargo, dada su elevada capacidad
cataltica es posible determinar su actividad con fiabilidad y se
presupone que, por lo general, la actividad es proporcional a la
concentracin.
Por tanto, es sumamente importante el procesado adecuado de las
muestras, para que se garantice la conservacin de la estructura
proteica, fcilmente alterable por variaciones de:
temperatura, pH muy cidos o alcalinos, detergentes, metales pesados o
la presencia de microorganismos en el recipiente, lo cual degradara la
protena. La conservacin de los sueros a T ambiente genera la
inactivacin de las enzimas.

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BIBLIOGRAFIA

Graff, Laurine (1987). 2. Anlisis de orina - Atlas Color (1 edicin).

Ed. Mdica Panamericana. p. 59. ISBN 950-06-0841-3. Consultado el 14
de marzo de 2012.

3,4,5 - Murray, Robert; Granner, Daryl; Rodwell, Victor; Mayes, Peter;

1997; BIOQUMICA DE HARPER; Mxico; Editorial El Manual Moderno;
p.77-110.

2,4 - Mier, Geraldine; Rhodes, V.J.; Maharg, Leta; Webb, Nancy, S; et

al.: BEEF TENDERIZATION WITH PROTELYITIC ENZYMES; E.E.U.U.;
Food Tech; p.16,111; Dairy Sci. Abstracts; p.23,197.

1 - PRODUCTION AND APPLICATION OF ENZYME PREPARATIONS

IN FOOD MANUFACTURE; (Symposium, London,1959); Monograph
No.11; Industrial Chemical Society; London.

Pginas de Internet consultadas:

5 - http://www.uco.es/organiza/departamentos/bioquimica-
biolmol/pdfs/08III%20ESPECTROFOTOMETRA.pdf

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