Revista INGENIERA UC

ISSN: 1316-6832
[email protected]
Universidad de Carabobo
Venezuela

Arias, Daniel; Vzquez, Greta; Montaez, Laura; lvarez, Ruth; Prez, Vctor
Determinacin del Azadiractina de los aceites esenciales del rbol de Neem (Azadirachta Indica)
Revista INGENIERA UC, vol. 16, nm. 3, septiembre-diciembre, 2009, pp. 22-26
Universidad de Carabobo
Valencia, Venezuela

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 R I UC, V. 16, N. 3, 2009 22 - 26

Determinacion del Azadiractina de los aceites esenciales del a rbol de Neem

(Azadirachta Indica)

Daniel Arias, Greta Vazquez, Willmer Acosta, Laura Montanez, Ruth Alvarez, Vctor Perez
Departamento de Qumica, Facultad de Ciencias y Tecnologa, Universidad de Carabobo.Avenida Salvador Allende, Ciudad
Universitaria, BarbulaCarabobo. TeleFax 0058 241 8678805

Resumen.-
El azadiractina es el componente activo en la propiedad repelente de insectos de los aceites esenciales del a rbol de neem
(Azadirachta indica). En el presente trabajo, se realiza la extraccion del aceite de las semillas, hojas y corteza del a rbol Neem
del estado Carabobo, por las tecnicas de extraccion con solventes, arrastre con vapor y CO2 Supercrtico; adicionalmente se
extrajo aceite vegetal de las semillas por prensado al fro. Se cuantifico el azadiractina presente en los aceites por la tecnica de
HPLC, empleando el patron correspondiente. La extraccion con solventes fue el metodo que mostro los mejores rendimientos
tanto para el aceite obtenido (8, 35 0,01) % en las semillas), como de la cantidad de azadiractina (2434, 46 0,01) ppm
en las hojas. Para el aceite del prensado al fro se encontraron (1127, 38 0,01) mg de azadiractina/Kg de semilla con un
(38,000,01 %) en peso de rendimiento, este aceite vegetal presenta propiedades fisicoqumicas que le permiten ser propuesto
como una potencial materia prima para la industria de jabon.
Palabras clave: Neem, Aceite de Neem, Azadiractina, extraccion de aceite, prensado al fro

Determination of the azadirachtin of the essential oils of

Neem tree (Azadirachta Indica)
Abstract.-
The azadirachtin is the active component in the repellent property of insects of the essential oils from the neem tree
(Azadirachta indica). In this work, extraction of oil from seeds, leaves and bark of the tree neem, is carried out using the
haulage methods with vapor, solvents and supercritical carbon dioxide; additionally extraction is done by cold press of seeds.
Azadirachtin is characterized by HPLC. The extraction with solvents should the best yields for the obtained oil (8,35 0,01) %
in the seeds, as well for the quantity of azadirachtin (2434,46 0,01) ppm in leaves. For the cold pressed oil, (1127,38 0,01)
mg de azadirachtin for each Kg. of seeds, with a yield of (38,000,01) %, this vegetable oil presents physiochemical properties
that allow him to be proposed, as a potential available raw material for the soap industry
Keywords: Neem, Neem oils, Azadirachtin, Oil Extraction, cold pressed

1. Introduccion mas ecologicamente amigable [1]. El a rbol de neem

(Azadirachta indica A. Juss), es una especie de gran
La gran cantidad y biodiversidad de flora que importancia y potencialidad, que ha despertado la aten-
existe en Venezuela permitira un aprovechamiento de cion del mundo cientfico por sus multiples propiedades
e stos a nivel nacional, de tal manera que impulse y usos de sus componentes: semillas, cascara de la
el desarrollo del pas convirtiendolo en productor de semilla, hojas, corteza y madera. Desde hace varios
bienes (aceites esenciales), para el consumo interno y siglos, las diversas partes del neem o sus aceites,
exportacion. El incremento de los costos de produccion han sido utilizados en medicina para tratar diversos
y los danos irreversibles que ocasiona al hombre y al males, desde malestares estomacales y fiebre, hasta
medio ambiente el uso de plaguicidas sinteticos, hace enfermedades tales como viruela y malaria; tambien
importante el desarrollo de campanas ecologicas para se le ha empleado como material para construccion,
promover el uso de productos de origen natural que sea combustible, lubricantes y como repelente de insectos.
Por ejemplo el aceite que se extrae de algunas partes
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como agente activo el azadiractina, el cual se ha vegetal de las semillas por la tecnica del prensado al
comprobado que funciona como insecticida natural que fro. Todos los procesos se efectuaron por triplicado.
compite ventajosamente con los insecticidas sinteticos,
ya que algunos insectos han desarrollado resistencia 2.3. Extraccion por solventes
a estos u ltimos, y son controlados por derivados Se utilizo el procedimiento descrito por Williams. D.,
del aceite de neem, de esta manera, extractos con del 2004 [14]. Hojas: se colocaron 100 g en 200 ml
alta concentracion de azadiractina podran ser los de hexano y se agito por 24 h, se filtra y al filtrado se
precursores de una nueva generacion de productos le separa en un equipo rota evaporador, recuperandose
insecticidas, fungicidas, acaricdas y protectores de las el hexano. La fraccion aceitosa se recogio y guardo en
cosechas sin contaminar el entorno [24]. refrigeracion hasta su caracterizacion
En Venezuela existen mas de dos millones de
a rboles de neem sembrados, lo que demuestra su buena Semillas y corteza:
adaptacion a nuestros suelos, por lo que establecer Se trituran 100 g y se mezclaron con metanol por
los mejores metodos de extraccion del aceite de neem 24 h, se filtro y al filtrado se le separo en un rota
y caracterizar la presencia de azadiractina, se plantea evaporador, recuperandose el metanol de la fraccion
como una excelente alternativa, con miras a obtener aceitosa. Al aceite se le agrego un pequena cantidad
un producto de gran calidad que a futuro pueda ser de agua y se agito, se le agrego luego diclorometano
industrializado. Es por ello que este trabajo tiene como en una relacion de 4:3; se gito por 45 min. Finalmente
objetivo principal extraer los aceites esenciales de las se recupero la fase organica y se guardo, lavando
hojas, semillas y corteza del a rbol de neem y cuantificar nuevamente la fase acuosa con diclorometano en la
el azadiractina presente. Con esta investigacion se misma proporcion, dos veces mas. Los tres lavados
espera contribuir al conocimiento del a rbol de neem se mezclaron, esta mezcla se seca con sulfato de
y sobre los procesos de extraccion de sus aceites y magnesio, se paso por el rota evaporador recuperando
que al mismo tiempo se brinde informacion sobre la el solvente y un extracto aceitoso que se guardo en
composicion qumica de e stos, a fin de aprovechar al refrigeracion hasta su caracterizacion.
maximo su potencial.
2.4. Hidrodestilacion:
2. Metodologa Se colocaron 100 g de material vegetal en un sistema
Kettles de 4 l con un refrigerante con trampa tipo
2.1. Material vegetal: Clevenger a la salida. el destilado se conecto en
La zona de estudio seleccionada fue las inmedia- una trampa fra. Al lquido colectado se le realizaron
ciones del municipio San Diego, estado Carabobo. Se extracciones con diclorometano de manera similar al
escogieron a rboles sanos y de tamano similar entre punto anterior, obteniendose un aceite que se guardo en
ellos, aislados de posibles fuentes de contaminacion refrigeracion hasta su caracterizacion. La extraccion
(vas de circulacion, aguas residuales, etc), se realizo la por prensado al fro, se realiza a semillas secas y
recoleccion de partes del a rbol: hojas verdes y frutos descascaradas en lotes de 100 g aproximadamente, los
verdeamarillentos tomados directamente del a rbol y cuales se colocan de forma continua y separada en una
la corteza de la zona media del tronco. Lo colectado prensa provista de un tornillo sin fin, el cual moviliza,
se coloco en bolsas, se etiquetaron y se llevaron corta y prensa las semillas que se van adicionando,
al laboratorio donde se lavaron cuidadosamente. Se obteniendose as el aceite, este sale a traves de unos
verifico su estado antes de comenzar a procesarlas. Los pequenos agujeros y se colecta en recipientes de vidrio.
frutos se lavaron y despulparon, las semillas se secaron A este aceite se le determinaran sus caractersticas
a la sombra por tres das, una vez secas se desconchan fisicoqumicas, para ello se emplearan los metodos
antes de ser procesadas indicados en las normas COVENIN, para el ndice de
acidez se utiliza el metodo de la norma 325:2001, para
2.2. Extracciones: el ndice de saponificacion se utiliza la 323:2001, para
Se utilizaron las tecnicas de extraccion con solventes, el ndice de peroxido la 508:2001, para el ndice de
hidrodestilacion y fluidos supercrticos, para extraer refraccion la 702:2001, para la densidad la 703:2001
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se utiliza el procedimiento descrito por Montanez [9]. 5. Analisis y discusion de resultados

Para la determinacion del porcentaje de rendimiento de
aceite obtenido, se divide el peso del aceite crudo entre 5.1. Rendimientos y concentraciones obtenidas por
el peso inicial de material. los metodos de extraccion seleccionados
En la Tabla 1, se muestra la media de los rendimien-
2.5. Fluidos supercrticos: tos de aceite esencial obtenidos por las distintas
El proceso de extraccion en condiciones crticas tecnicas de extraccion empleadas de las diversas partes
se realizo en una planta de extraccion a escala de vegetales evaluadas, as como la concentracion de
laboratorio que utiliza dioxido de carbono supercrtico Azadiractina determinada por HPLC.
como solvente extractivo, segun las condiciones repor-
tadas por Mukhopadhyay [15] usadas para optimizar
la extraccion del azadiractina de los aceites de neem Tabla 1: Rendimiento obtenido y concentracion de Azadiractina
(presion: 375 bar, temperatura 55 C, flujo: 3 l/min, determinada por HPLC
tiempo estatico: 30 min). Se utilizaron 30 g de material Tecnica de ex- Material Rendimiento Concentracion
traccion vegetal de aceite de Azadiractina
vegetal por extraccion y el aceite colectado se guardo en evaluado esencial determinada
refrigeracion hasta su caracterizacion. (0,01 %) (0,01) g/g
de materia vegetal
Semilla 8,35 2416.11
3. Prensado en fro: Solventes Hoja 2,37 2434.46
Corteza 2,74 1013.94

El procedimiento se realizo a las semillas secas Semilla 3,60 152,42

Hidrodestilacion Hoja 0,68 32,94
y descascaradas en lotes de 100 g. Las mismas se Corteza 0,89 17,39
colocaron en una prensa provista de un tornillo sin Semilla 2,64 5,68
fin, el cual moviliza, corta y prensa las semillas que Fluido supercrticoHoja 0,64 6,38
Corteza 0,07 131,98
se van adicionando, obteniendose as un aceite que
se colecta y se filtra para eliminar el particulado. El
aceite fue pesado y guardado en refrigeracion hasta su
caracterizacion. En los resultados presentados, se observa que por la
tecnica de extraccion por solventes, se logro obtener
4. Caracterizacion: un mayor rendimiento en aceite esencial que con las
otras dos tecnicas empleadas. Esto podra explicarse
A los aceites esenciales y al aceite vegetal se les por la afinidad que presentan los solventes con los
determino el contenido de azadiractina por la tecnica aceites esenciales, lo que permite un facil arrastre de
de cromatografa lquida de alta eficiencia (HPLC), estos aceites de las celulas vegetales que lo contienen.
segun lo reportado por Giraldo [16]. El equipo fue El rendimiento por la tecnica de hidrodestilacion es
facilitado por el Laboratorio Qumico del Ministerio relativamente bajo, aunque es mejor que el del CO2
de Salud y Desarrollo Social, Maracay, estado Aragua, en condiciones supercrticas. En todos los casos, se
este es de marca Dionex modelo 170 uvd, con bomba observa que para las semillas se logro el mejor
cuaternaria, con una columna empacada de silica C18 rendimiento, esto es debido a que en e stas, se encuen-
y dimensiones de 25 cm de largo, 4,6 mm de diametro tran concentrados la mayor cantidad de aceites que la
y 5 m tamano de poro, con un detector UVVisible. planta posee.
Para la cuantificacion se uso una curva de calibracion, En cuanto a la concentracion de Azadiractina deter-
preparada a partir de un estandar puro de azadiractina. minada, la tecnica de extraccion por solventes presenta
Al aceite vegetal se le determinaron sus caractersticas los mejores resultados. Esto coincide con lo reportado
fisicoqumicas, empleando los metodos indicados en las en la bibliografia para las semillas de neem, que
normas COVENIN, tales como: ndice de acidez [17 se encuentran en un rango de 2333 3300 g/g,
a], ndice de saponificacion [17 b], ndice de peroxido las diferencias con nuestros valores experimentales
[17 c], ndice de refraccion [17 d], densidad [17 e] se pueden deber a las condiciones de humedad,
e impurezas insolubles [17 f]. Para la deteminacion precipitaciones y temperaturas que afectan a la planta,
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cantidad de aceite en las hojas, con respecto a las vegetal para consumo humano. Con respecto al valor
semillas, la conectracion de azadiractina resulto en un encontrado del ndice de saponificacion, se puede
valor muy similar a lo encontrado con las semillas. Sin catalogar como un aceite altamente factible para la
embargo, estos valores no se encuentran reportados en industria del jabon. El valor de las impurezas insolubles
la literatura consultada. es bajo < 1 %, estos corresponden a sustancias que
no fueron solubles en hexano, y consideramos que son
5.2. Prensado al frio de las semillas restos de cascara o semilla que psan en el proceso
En el proceso de extraccion por esta tecnica, se de prensado, las cuales no fueron eficientemente
logro un rendimiento en aceite vegetal de 38,00 eliminadas con el filtrado. Se puede considerar que el
0,01 % en peso. La concentracion de azadirectina aceite vegetal obtenido por prensado al fro, presenta
obtenida para este aceite vegetal extrado, fue de buenas propiedades fsicas y qumicas, que permiten
1127,28 0,01 g/g de semilla. Al aceite obtenido que sea propuesto para su uso en la industria de
se le realizo una caracterizacion fisicoqumica a fin jabones. Aunque tambien para el consumo humano,
de conocer sus propiedades generales. Los resultados con previos procesos de refinacion. En cuanto a su uso
obtenidos de esta caracterizacion se muestran en las en la industria de pesticidas, habra que concentrar la
Tablas 2 y 3 respectivamente. cantidiad de azadiractina, eliminando los a cidos grasos
presentes y estabilizar el aceite restante para que no se
descomponga rapidamente.

Tabla 2: Propiedades f`sicas del aceite prensado al fro

Propiedad Valor 6. Conclusiones
Densidad 20 C/agua 20 C (0,0001) 0,9332
La tecnica de extraccion por solvente del aceite esen-
Indice de refraccion (0,0001) 1,4559
Punto de ebullicion (1 C ) 159 161 cial presento los mejores rendimientos. De las partes
Viscosidad (0,1 cP) 51,3 vegetales estudiadas, la hoja fue la que presento la
mayor concentracion de azadiractina con 2434,6
0,01 ppm, seguido por las semillas con 38,00
0,01 % en peso en aceite vegetal y 1127,38
La densidad del aceite de neem, es menor a la 0,01 g de azadiractina/g de semilla. Las propiedades
densidad del agua, lo cual es caracterstico en los fisicoqumicas del aceite vegetal lo perfilan como una
aceites vegetales, el ndice de refraccion, el punto de potencial materia prima disponible para la industria del
ebullicion y la viscosidad coincide con lo reportado en jabon.
la literatura, segun Montanez [9].

7. Agradecimientos

Tabla 3: Propiedades qumicas del aceite prensado al fro Los autores quieren agradecer el financiamien-
Propiedad Valor to otorgado por el CDCDUC en el proyecto de
Indice de acidez (mg KOH/g muestra) 8.86 inversion menor (PIM) numero CDCH070005.
Indice de saponificacion (mg KOH/g muestra) 169.33 Al Laboratorio Qumico del Ministerio de Salud y
Indice de peroxidos (meq O /Kg muestra) 3.74 Desarrollo Social de Maracay, estado Aragua, en la
2
Impurezas insolubles ( %) 0.69 persona del Lic. Juan Uztariz, a los Laboratorios de
Cromatografia y Elucidacion Espectroscopica y al de
Analisis Instrumental del Departamento de Qumica de
la FACYTUC
Dentro de las caractersticas qumicas, los valores
encontrados para el ndice de acidez y el de peroxidos
son altos, en comparacion con lo reportado en la Referencias
industria alimentaria para aceites vegetales, el cual no
[1] Biswas K., Chattopadhyay I., Banerjee R.K. and Bandyopad-
debe superar el ndice de acidez de 5,00 mg KHO/g hyay U. (2002). ((Biological activities and medical properties
26 D. Arias et al / Revista Ingeniera UC, Vol. 16, No. 3, diciembre 2009, 22-26

[2] Schmutterer, H. (ed., 1.995). ((The Neem Tree Azadirachta

indica A. Juss. and other meliaceous plantssources of unique
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[7] Giraldo, F. y col. (2.002).((Determinacion de Azadirachtina
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9 No 1, Universidad de Antioquia, Medelln Colombia. pp.
5963
[8] Normas Covenin a) 325:2001; b)323:2001; c) 508:2001; d)
702:2001; e) 703:2001; f) 509:2001.
[9] Montanez, L. (2.005). ((Desarrollo de un Bioinsecticida a
partir de la Azadiractina presente en el aceite de neem
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de Ingeniera, Universidad de Carabobo, Venezuela
[10] Romero. C. (2.003). ((Evaluacion de la extraccion de la
semilla de neem)). Trabajo de Ascenso para optar al titulo
de Profesor Agregado, Facultad de Ingeniera, Universidad de
Carabobo, Venezuela.