Procedimientos Operativos Estndar para Los Laboratorios Clnicos Del Primer Nivel de Atencin
Procedimientos Operativos Estndar para Los Laboratorios Clnicos Del Primer Nivel de Atencin
Procedimientos Operativos Estndar para Los Laboratorios Clnicos Del Primer Nivel de Atencin
MINISTERIO DE SALUD
CONTENIDO:
POE TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE VENOSA.
POE PREPARACIN DE FROTIS SANGUNEO Y FRMULA
DIFERENCIAL.
POE FROTIS DE SANGRE PERIFRICA.
POE EXAMEN GENERAL DE HECES.
POE EXAMEN GENERAL DE ORINA.
EL SALVADOR, C.A.
PRIMERA EDICIN, 2013
Red Nacional de Laboratorios Clnicos
Corriendo por un diagnstico oportuno
INTRODUCCIN
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL:
Proporcionar a la Red de Laboratorios Clnicos del Ministerio de Salud, un
instrumento que facilite el desarrollo adecuado, sistematizado y estandarizado
de los procedimientos tcnicos que se realizan en los Laboratorios del Primer
Nivel de Atencin.
OBJETIVOS ESPECFICOS:
-
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OBJETIVO
Obtener una muestra de sangre venosa adecuada para los anlisis que se
requiera.
2.
CAMPO DE APLICACIN
RESPONSABLES
DEFINICIONES Y SIGLAS
Deniciones:
-
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Fundamento:
La sangre es el espcimen ms usado habitualmente para los estudios
analticos por la riqueza de datos que puede aportar, por su funcionalidad
y por ser relativamente fcil su obtencin. Dependiendo del tipo de estudio
que se vaya a realizar, el tipo de muestra puede coincidir con el espcimen
(sangre total) o ser una parte del mismo (plasma, suero).
Los especmenes de sangre se obtienen para realizar en ellos una gran variedad
de pruebas, entre las que estn los cultivos microbiolgicos (hemocultivos),
los recuentos celulares, las determinaciones de sustancias qumicas (sustratos,
enzimas, hormonas y protenas), la caracterizacin de subpoblaciones
celulares, los estudios de coagulacin y las pruebas inmunolgicas.
Muestra requerida:
Sangre completa obtenida de manera adecuada y acorde a las pruebas
que se van a realizar.
Materiales:
- Jeringa estril con aguja de calibre adecuado (las ms utilizadas son las
de calibre 21G).
- Si se utiliza sistema de extraccin de sangre al vaco: dispositivo para aguja
(holder), aguja de calibre adecuado.
- Torundas de algodn.
- Plumn marcador permanente para rotular tubos.
- Lapicero.
- Torniquete.
- Tubos con o sin anticoagulante.
- Gradilla para tubos.
- Sillas para toma de muestras.
- Mesa para ubicar materiales necesarios para realizar la extraccin.
- Descarte para material cortopunzante (recipiente con paredes rgidas).
- Descarte para material bioinfeccioso (bolsa roja).
- Descarte para desechos comunes (bolsa negra).
- Equipo de proteccin personal como: guantes, gabacha, gafas, zapato
cerrado.
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Reactivos
-
Procedimiento:
1. Lavar y secar las manos.
2. Colocarse el equipo de proteccin personal adecuadamente.
3. Preparar el material necesario para la extraccin.
4. Sentar cmodamente al paciente.
5. Leer atentamente la Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico.
(Anexo 1)
6. Antes de iniciar la extraccin preguntar al paciente su nombre y apellidos,
comprobando que coinciden con los indicados en la Boleta nica para
Pruebas de Laboratorio Clnico.
7. Vericar la preparacin previa del paciente de la prueba a realizar. (Ver
apartado de cuidados especcos para cada rea)
8. Identicar el tubo de acuerdo a la Boleta nica para Pruebas de
Laboratorio Clnico.
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12. Realizar asepsia con torunda de algodn humedecida con alcohol etlico
al 70% de adentro hacia fuera. (Anexo 4)
13. Colocar el torniquete rmemente alrededor del brazo a 8 o 10 cm del rea
de puncin, y pedir al paciente que abra y cierre la mano varias veces
para favorecer la dilatacin de las venas. La aplicacin del torniquete
no debe durar ms de dos minutos.
14. Colocar la aguja con el bisel hacia arriba sobre la vena a puncionar.
(Anexo 5)
15. Proceder a puncionar la vena seleccionada. (La muestra no debe tomarse
en venas con hematomas, fstulas o catter)
16. Introducir la aguja en el centro de la vena y penetrar a lo largo de la
vena de 1 a 1.5 cm.
17. Tirar hacia atrs el mbolo de la jeringa muy lentamente para que penetre
la sangre en la jeringa hasta llenar con la cantidad de sangre necesaria.
Si utiliza sistema de sangrado al vaco, introducir el tubo en el dispositivo
(holder) de manera que al ejercer presin se atraviese el extremo inferior
de la aguja, para que la sangre uya hacia el tubo por efecto del vaco.
(ver orden de llenado de tubos colectores de muestras)
18. Retirar torniquete tirando del extremo doblado y colocar una torunda
de algodn seca sobre la piel donde se encuentra oculta la punta de
la aguja.
19. Extraer la aguja con un movimiento rpido por debajo de la pieza de
algodn, pedir al paciente que presione rmemente la torunda durante 3
minutos con el brazo extendido para prevenir la formacin de hematomas.
20. Separar la aguja de la jeringa cuidadosamente, llenar los tubos deslizando
la sangre por las paredes del mismo. (ver orden de llenado de tubos
colectores de muestras)
21. Llenar el tubo hasta la marca sealada por el fabricante.
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22. Mezclar los tubos recin extrados varias veces por inversin para asegurar
una perfecta mezcla de la sangre con el anticoagulante.
23. Distribuir las muestras con su respectiva boleta nica en las diferentes
reas de laboratorio clnico si este fuera el caso.
24. Si la muestra extrada se enviara fuera de laboratorio deber prepararse
en triple embalaje de la siguiente manera: (Ver Anexo 8).
-
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Condiciones ambientales:
El rea de sangra debe contar una silla de toma de muestras con apoyo de
brazos y una mesa para ubicar los materiales necesarios para la extraccin.
Debe ser un rea limpia con buena iluminacin (luz blanca).
El rea donde se realice el procedimiento debe estar organizada y tener
espacio adecuado para asegurar el desarrollo de trabajo, reuniendo los
requisitos de bioseguridad.
El Laboratorio debe hacer seguimiento, controlar y registrar las condiciones
ambientales (temperatura, humedad) cuando se requiera en especicaciones
pertinentes o cuando puedan inuir en la calidad de los resultados.
Fuentes de error:
-
Precauciones de Bioseguridad
-
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Serologa
-
Hematologa
-
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Coagulacin
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6. FORMULARIOS Y REGISTROS
Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico.
7. REFERENCIAS
1. EL SALVADOR, MINISTERIO DE SALUD. Manual de Procedimientos Tcnicos
de Laboratorio Clnico del Primer Nivel de Atencin. El Salvador, C.A. 2007.
Pg. 31-33.
2. EL SALVADOR, MINISTERIO DE SALUD. Manual de Procedimientos de
Bioseguridad para los Laboratorios Clnicos. El Salvador, C.A. 2008. Pg.49.
3. AZNAR, JAVIER. NUEZ ROLDAN, ANTONIO. LEON JUSTEL, ANTONIO. Manual
de Obtencin y Manejo de muestras para el Laboratorio Clnico. Servicio
Andaluz de Salud. Junta de Andaluca. Espaa. 2009. Pg. 12-14.
4. ROS TAMAYO, RAFAEL. PREZ ZENNI, JAVIER Y COLABORADORES. Gua
Laboratorio Servicio de Hematologa y Hemoterapia. Servicio Andaluz de
Salud. Junta de Andaluca. Espaa. 2011. Pg. 8-11.
5. MANUAL DE PREANALTICA. E.P. Hospital de Poniente. Consejera de Salud.
Junta de Andaluca. Espaa. 2010. Pg. 23,24.
6. DEL SOL, MARIANO. LILLO, EUGENIO Estudio de las Venas de la Fosa Cubital
a travs de la Tomografa Computada Helicoidal y su Aplicacin Clnica
Facultad de Medicina, Universidad de La Frontera, Temuco, Chile, 2012.
10
MINISTERIO DE SALUD
8.
ANEXOS
ANEXO 1
11
ANEXO 2
ANEXO 3
12
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 4
ANEXO 5
ANEXO 6
13
Determinacin de pruebas
bioqumicas e
inmunolgicas
Primeros en tomarse.
Pruebas de coagulacin.
Segundos en tomarse.
Hemograma.
Terceros en tomarse.
Determinacin de
amoniaco.
ANEXO 7
Descartes de desechos.
Descarte para material
cortopunzante (agujas, vidrio)
ANEXO 8
Triple embalaje.
Muestra
Recipiente primario a prueba
de filtraciones y derrame
Material
absorbente de
amortiguacin
Embalaje exterior
Flechas de orientacin
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OBJETIVO
CAMPO DE APLICACIN
RESPONSABLES
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Siglas
-
5.
Fundamento:
Preparacin de un frotis sanguneo coloreado por la tincin de Wright, la cual
est compuesta de eosina y azul de metileno por lo cual se le denomina tincin
policrmica. Las reacciones de tincin dependen del pH, la tincin real de
los componentes ocurre cuando se le agrega una solucin buffer a la tincin.
El azul de metileno libre es bsico y tie de azul los componentes celulares
cidos, por ejemplo el RNA. La eosina libre es cida y tie de rojo los
componentes bsicos, como la hemoglobina o los grnulos de los eosinlos.
Los neutrlos poseen grnulos citoplasmticos que tienen pH neutro y admiten
algunas caractersticas de ambas tinciones.
Muestra requerida:
Sangre capilar o venosa recin extrada sin anticoagulante o sangre con
anticoagulante EDTA.
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Torunda de algodn.
Lpiz graso.
Lapicero.
Perilla de hule.
Papel toalla.
Reactivos:
-
Metanol absoluto.
Colorante de Wright.
Buffer pH 7.
Aceite de inmersin.
Agua destilada.
NAOH 1N.
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Preaparacin de reactivos
Colorante de Wright (1 litro)
Buffer pH 7.
Stock:
Pesar
- 38 gr fosfato de sodio monobsico.
- 30 gr fosfato de potasio de hidrgeno.
- Mezclar y disolver poco a poco con
agua destilada de infusor en Hot plate.
- Completar a 1 litro con agua destilada
de infusor.
- Ajustar a pH 7 con NaOH 1N.
Solucin de trabajo:
-
Equipo:
-
Contmetro diferencial.
Cronmetro.
Procedimiento:
-
Para poder observar las clulas sanguneas se debe realizar primero un frotis
sanguneo.
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Leucocitos
Neutrfilos segmentados
Neutrfilos en banda
Linfocitos
Eosinfilos
Basfilos
Monocitos
Adultos
(%)
50 - 70
0-5
20 - 40
0-5
0-1
2-8
Adultos
(mil x mm3)
2.3 - 8.1
0 - 0.6
0.8 - 4.8
0 - 0.4
0 - 0.1
0.5 - 1.3
Valores absolutos
Leucocitos
Neutrfilos segmentados
Neutrfilos en banda
Linfocitos
Eosinfilos
Basfilos
Monocitos
2.1 - 8.0
0 - 0.4
0 - 0.1
0.5 - 1.3
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Precauciones de Bioseguridad
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FORMULARIOS Y REGISTROS
REFERENCIAS
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8.
ANEXOS
ANEXO 1
Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico.
11
ANEXO 2
Tabulador diario de actividades de laboratorio.
12
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 3
Forma correcta de elaborar el extendido sanguneo.
A. ngulo
adecuado para
sujetar la lmina
extensora (30-45).
B. Distribucin
a lo largo del
portaobjeto.
C. Terminacin
del frotis en cua.
13
30-45
ANEXO 4
Caractersticas morfolgicas de las clulas sanguneas contadas en una frmula
diferencial.
Tipos celulares
Tamao
(m)
Ncleo
Cromatina
Citoplasma
Grnulos
10-15
2-5 lbulos
conectados por
filamentos delgados
sin cromatina visible.
10-15
Forma C o S;
estrechado pero no en
forma de filamento
delgado; la cromatina
debe ser visible en el
filamento.
7-18
Monocitos
12-20
Similar a
encaje.
Muchos grnulos
finos, con
frecuencia
dan un aspecto
de vidrio
esmerilado.
Eosinfilos
12-17
Grumos
gruesos.
Rosa; puede
presentar bordes
irregulares.
1- Inusuales.
2-Abundantes.
Rojos anaranjados,
redondos, grandes.
Basfilos
10-14
En general, 2 lbulos
Neutrfilos
segmentados
Neutrfilos
en banda
Linfocitos
conectados por
filamentos delgados
sin cromatina visible.
Grumos
gruesos.
Azul plido
a rosa.
1- Inusuales.
2- Abundantes
Color lila.
Grumos
gruesos.
Azul plido
a rosa.
1- Escasos.
2-Abundantes.
Color lila.
Condensada
a intensamente
condensada.
Escaso a
moderado;
celeste cielo;
puede
presentar vacuolas.
Grumos
gruesos.
Color lavanda
a incoloro.
Escasos
azurfilos.
1- Inusuales.
2-Variable en
nmero con
distribucin
irregular; puede
ocultar el ncleo
o desprenderse
durante la tincin.
Azul oscuro a
negro.
14
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 5
Morfologa microscpica de las clulas sanguneas contadas en una frmula
diferencial.
Lnea Blanca
Neutrfilo
Eosinfilo
Basfilo
Linfocito
Monocito
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CAMPO DE APLICACIN
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Siglas
-
5.
Fundamento:
Por medio de la observacin microscpica de un frotis teido con colorante
Wright observar las caractersticas morfolgicas de los elementos formes de
la sangre.
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Muestra requerida:
Frotis de sangre perifrica coloreado con Wright, el frotis a observar debe
haber quedado liso, sin irregularidades y libre de rayas, adems es necesario
contar con un extendido bien teido para lograr una interpretacin exacta
de la morfologa celular.
Materiales:
-
Lapicero.
Reactivos:
-
Aceite de inmersin.
Equipo:
-
Procedimiento:
1. Colocarse el equipo de proteccin personal antes de manipular el frotis.
2. Se debe vericar que los datos contenidos en la identicacin de la
lmina sean los mismos que contenga la Boleta nica para Pruebas de
Laboratorio Clnico.
3. Examinar el frotis con el objetivo 10x, lo que permite la rpida deteccin de
grandes clulas anormales, como blastos, linfocitos reactivos y parsitos.
4. Luego se debe examinar con el objetivo 40x, con el propsito de buscar
un rea del frotis en la cual los eritrocitos se encuentren uniformemente
distribuidos y en donde apenas se toquen unos con otros (dos o tres clulas
pueden superponerse).
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Lnea roja:
-
Lnea blanca:
-
Lnea plaquetaria:
-
Cantidad.
Valores de referencia:
-
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Archivo de resultados:
Los resultados se registrarn en el Registro y Tabulador Diario de las Actividades
de Laboratorio (Anexo 2) en el que se deben completar los datos requeridos.
Se conservarn dichos registros por un perodo de 5 aos.
Fuentes de error:
-
Precauciones de Bioseguridad
-
Control de calidad
-
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FORMULARIOS Y REGISTROS
REFERENCIAS
10
8.
ANEXOS
ANEXO 1
Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico.
11
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 2
Tabulador diario de actividades de laboratorio.
12
ANEXO 3
Lnea Roja.
Macro eritrocitos
Micro eritrocitos
Inclusiones eritrocitarias
Cuerpos de Howell- Jolly
Punteado basfilo
Anillos de Cabot
Infecciones parasitarias
Malaria
Gametocito de
Plasmodium vivax
Filariasis
Microfilaria de Wuchereia
bancrofti
Chagas
Tripomastigote sanguneo
de Tripanosoma cruzi
13
MINISTERIO DE SALUD
Cristales de HbC
Dianocito
Drepanocito
Eliptocito
Equinocito
Esferocit
Esquistocito
Estomatocito
Ovalocito
Roleaux
Aglutinacin
14
Clulas en lgrima
Hipocroma
Policromasia
Eritroblastos
ANEXO 4
Lnea Blanca
Maduracin mieloide
Mieloblasto Promielocito
Mielocito
Metamielocito
Banda
Segmentado
Basfilos
Neutrfilos
Eosinfilos
Maduracin linfoide
Linfoblasto
Prolinfocito
Monoblasto
Promonocito
Linfocito
Linfocito
Monocito
Monocito
15
MINISTERIO DE SALUD
Cocos intracelulares
Agranulacin en neutrfilos
Granulacin txica
Ncleo en apoptosis
Inclusiones vacuolares
16
Blastos
Linfocito reactivo
Blastos
Linfocito reactivo
Chediak Higashi
Cuerpos de Dohle
Chediak Higashi
Cuerpos de Dohle
Hipersegmentacin nuclear
Pelger Huet
Hipersegmentacin nuclear
Pelger Huet
ANEXO 5
Lnea Plaquetaria
Lnea Plaquetaria
Morfologa normal
Morfologa normal
Macroplaquetas
Grumos plaquetarios
Macroplaquetas
Grumos plaquetarios
Lnea Plaquetaria
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CAMPO DE APLICACIN
RESPONSABLES
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Siglas:
-
5.
Fundamento:
El Examen General de Heces es realizado para la deteccin de parasitismo
intestinal, demostrando principalmente, la presencia de parsitos de formas
evolutivas mviles, de tamao microscpico (trofozoitos, quistes de protozoos
as como larvas y huevos de helmintos).
Muestra requerida:
3-5 gramos de heces obtenidas por evacuacin espontanea, recin emitidas.
Instruir al paciente que colecte en el frasco adecuado la porcin de muestra
que evidencia el dao intestinal (mucus o sangre).
No son recomendables las muestras obtenidas con laxantes, enemas o
contaminadas con orina.
Materiales:
-
Aplicadores de madera.
Lpiz Graso.
Papel lente.
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Papel lente.
Equipo:
-
Microscopio.
Reactivos:
-
Pesar
Pesar
- 10 gr de yodo cristales.
- 20 gr de yoduro de potasio.
Procedimiento:
-
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Examen Microscpico
-
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Notas:
-
Valores de Referencia.
Examen macroscpico:
-
Color: Caf.
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Desecacin de la preparacin.
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Precauciones de Bioseguridad
-
Descarte de materiales:
-
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8.
ANEXOS
ANEXO 1
Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico.
11
ANEXO 2
Tabulador diario de actividades de laboratorio.
12
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 3
Entamoeba coli
Quiste
Trofozoito
Entamoeba histolytica/E.dispar.
Quiste
Trofozoito
13
Blastocystis hominis
Endolimax nana
Forma vacuolar
Quiste
Giardia lamblia
Quiste
Trofozoito
Chilomastix mesnili
Quiste
Trofozoito
Iodamoeba butschlii
Quiste
Trofozoito
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1.
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OBJETIVO
CAMPO DE APLICACIN
RESPONSABLES
DEFINICIONES Y SIGLAS
Deniciones:
-
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Siglas
-
5.
Fundamento:
El examen fsico de la muestra de orina permite determinar el color y el
aspecto de sta.
El examen qumico permite determinar las sustancias qumicas, as como su
densidad y pH, a travs de las zonas de reaccin presentes en una tira reactiva.
El examen microscpico permite observar, si estn presentes, elementos
celulares, cilindros, cristales, parsitos, lamentos mucoides y bacterias.
Muestra requerida:
-
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Materiales:
-
Papel toalla.
Lpiz graso.
Equipo:
-
Cronmetro.
Macrocentrfuga.
Microscopio.
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Procedimiento:
-
Examen fsico.
Examen qumico.
Examen microscpico.
Examen fsico:
1. Vericar que el frasco est completamente tapado.
2. Mezclar la orina contenida en el frasco realizando movimiento circular
sobre la mesa de trabajo.
3. Observar color y aspecto.
4. Anotar lo observado en la Boleta nica para Pruebas de Laboratorio
Clnico (Anexo 1).
Examen qumico:
1. Identicar el tubo cnico.
2. Mezclar la orina contenida en el frasco realizando movimiento circular
sobre la mesa de trabajo.
3. Verter de 5-10 mL de la muestra de orina en el tubo cnico.
4. Introducir la tira reactiva en la orina.
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Condiciones ambientales
El procedimiento se deber realizar en las instalaciones del laboratorio clnico
(seccin de Urianlisis si se dispone) la cual debe contar con iluminacin y
ventilacin adecuada.
El rea donde se realice el procedimiento debe estar organizada y tener
espacio adecuado para asegurar el desarrollo de trabajo, reuniendo los
requisitos de bioseguridad.
El Laboratorio debe hacer seguimiento, controlar y registrar las condiciones
ambientales (temperatura, humedad) cuando se requiera en especicaciones
pertinentes o cuando puedan inuir en la calidad de los resultados.
Forma de reporte:
Los resultados de la prueba debern reportarse en la Boleta nica para
Pruebas de Laboratorio Clnico.
Examen Fsico:
-
Examen Qumico
-
pH: De 5 a 9.
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Identicacin de parsitos:
Anotar el gnero y especie, as como su estado evolutivo.
-
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Estado evolutivo:
Valores de referencia
Examen Fsico
-
Color: Amarillo.
Aspecto: Limpia.
Examen Qumico
-
pH: de 5 a 6.
Nitritos: Negativo.
Protena: Negativo.
Glucosa: Normal.
Bilirrubina: Negativa.
Examen Microscpico
-
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Valores de alerta:
Color:
-
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Frascos sucios.
Muestras medicamentosas.
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Leer las tiras reactivas despus del tiempo indicado por el fabricante.
Centrifugacin inadecuada.
Precauciones de Bioseguridad
-
Descarte de muestras:
-
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6.
FORMULARIOS Y REGISTROS
REFERENCIAS
12
8.
ANEXOS
ANEXO 1
Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico.
13
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ANEXO 2
Tabulador diario de actividades de laboratorio.
14
ANEXO 3
Elementos microscpicos evaluados en un examen general de orina.
Clulas epiteliales
Escamosas
Redondas
Leucocitos
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Cilindros
Hialinos
Creos
Hemticos
Leucocitarios
Granuloso
Se forman de la descomposicin de restos de clulas a los cuales se les adhieren agregados
de protenas. Tienen la forma de cigarro y son ms grandes que los cilindros hialinos.
Fino
16
Grueso
pH (orina)
Forma
Descripcin
cido
rico
cido
Uratos
amorfos
cido
cido/neutro
Alcalino/neutro
Son de apariencia
granular, similar a los
uratos amorfos.
Alcalino
Oxalatos de
calcio
Fosfatos
amorfos
Fosfatos
triples
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pH (orina)
Forma
Alcalino
Descripcin
Tiene forma de esferas
cubiertas de espculas,
son de color
amarillo-marrn se
asocian con la presencia
de amonaco producido
por bacterias.
Cristales patolgicos
Cristal
pH (orina)
Cistina
cido
Tirosina
cido/neutro
Leucina
cido/neutro
Forma
Descripcin
Tienen forma de placas
hexagonales incoloras.
Se asocia a un trastorno
metablico que previene
la reabsorcin de cistina
por los tbulos renales.
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Cristales patolgicos
Cristal
pH (orina)
Forma
Descripcin
Colesterol
cido
Bilirrubina
cido
Microorganismos en orina
Huevos de Schistosoma haematobium
Hifas de hongos
Phthirus pubis
Espermatozoides en orina
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