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    "Practica 5. Oxidación Del Azufre y Del Ion Ferroso Por Bacterias Quimiolitotróficas". ENCB

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    Reporte de practica 5. Bioquímica Microbiana. Quimilitotrofia. Oxidación del Azufre y del Ion Ferroso por bacterias quimiolitotróficas

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    Reporte de practica 5. Bioquímica Microbiana. Quimilitotrofia. Oxidación del Azufre y del Ion Ferroso por bacterias quimiolitotróficas

    Título original

    “Practica 5. Oxidación del Azufre y del Ion Ferroso por bacterias quimiolitotróficas”. ENCB

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    de 5

    Instituto Politcnico Nacional.

    Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas


    Bioqumica Microbiana

    Practica 5:

    Oxidacin de azufre y de ion ferroso


    por bacterias quimiolitotrficas
    Alumnos:

    Camacho Galn Araceli


    Garca Marrufo Luis Antonio
    Ochoa Poblano Apolinar Rafael
    Solis Castro Korina Amairani
    ASPECTO
    Hiptesis
    Objetivos
    Anlisis de resultados
    finales
    Discusin de
    resultados
    Conclusiones
    Bibliografa

    PORCENT
    AJE
    1%
    1%
    1%
    4%
    2%
    1%

    Grupo: 5IM1
    Equipo: 1
    Fecha de Entrega: 15/11/2016

    CALIFICACIN

    Hiptesis.

    Si Thiobacillus thiooxidans y los microorganismos presentes en el consorcio son


    microorganismos quimiolitotrficos, entonces oxidaran compuestos inorgnicos como
    compuestos reducidos del azufre como fuente de energa.
    Si Thiobacillus thiooxidans y los microorganismos del consorcio son microorganismos que
    viven en pH cidos, entonces el pH del medio despus del cultivo ser menor al pH inicial.
    Si Thiobacillus thiooxidans y los microorganismos del consorcio ocupan el O 2 como aceptor
    final de electrones de su cadena respiratoria, entonces crecern mejor en condiciones en las
    que se incorpore aire constantemente.
    Si Thiobacillus thiooxidans y el consorcio de microorganismos son capaces de oxidar
    compuestos del azufre como fuente de energa, entonces su crecimiento se puede determinar
    por el precipitado formado.

    Objetivos

    Determinar el crecimiento de Thiobacillus thiooxidans y un consorcio de microorganismos


    usando mtodos gravimtricos, volumtricos y yodomtricos.
    Observar el efecto de microorganismos quimiolitotrficos en el medio donde crecen, midiendo
    el H2SO4 formado por mtodos volumtricos.
    Observar el efecto de las condiciones de un cultivo con incorporacin de aire y un cultivo
    estacionario en la actividad metablica de los microorganismos quimiolittrofos.
    Cuantificar los productos generados de Thiobacillus thiooxidans y un consorcio de
    microorganismos por la oxidacin de compuestos reducidos del azufre.

    Resultados.
    Resultados obtenidos

    Cultivos
    Agitados

    Estacionarios

    Cultivo de Thiobacillus thiooxidans en azufre elemental (medio A)


    1-Azufre utilizado (mg)

    48.8

    2-H2SO4 formado (mg)

    177.49

    57.86

    3- S0 de SO4= formado (mg)

    67.24

    18.64

    4-pH (pH inicial= 4.5)

    1.7 | 4.6

    1.8 | 4.5

    Cultivo de un consorcio de microorganismos en tiosulfato (medio B)


    1-Tiosulfato oxidado (mg)
    2-H2SO4 formado (mg)
    3-pH (pH inicial= 7)

    185.39
    77.22
    2.3 | 6.7

    185.38
    51.2
    3

    6.9

    Anlisis de Resultados.
    Medio A
    Azufre utilizado: Comparando entre el cultivo agitado y el estacionario notamos que aparentemente
    no hubo crecimiento en el medio estacionario ya que no hubo consumo de azufre.
    H2SO4 formado: Se aprecia una formacin mayor de cido sulfrico en el cultivo agitado, lo cual
    muestra que bajo stas condiciones Thiobacillus thiooxidans utiliza los recursos ms eficientemente.
    S0 de SO4 formado: Al incorporar aire constantemente es apreciable una mayor produccin de SO 4=
    proveniente del azufre elemental.
    pH: Se hace notable un crecimiento cuando el medio es acidificado, lo cual es comparable con los
    medios no inoculados ya que no hubo acidificacin del medio.
    Medio B
    Tiosulfato oxidado: Se nota una leve diferencia en la oxidacin de tiosulfato a tetrationato en ambas
    condiciones, lo cual indica que para este consorcio no es necesaria la incorporacin de aire para
    tener un correcto crecimiento.
    H2SO4 formado: Se observa una mayor formacin de cido en el medio al cual se le incorpora aire,
    siendo confirmado a su vez por el pH del medio.

    Discusin:
    Las bacterias quimiolitotrficas tiene la facilidad de crecer en medios minerales teniendo como fuente
    de carbono el CO2 y su poder reductor requerido para la reduccin del dixido de carbono es
    obtenido mediante la oxidacin de compuestos inorgnicos. En el caso de las bacterias del azufre
    estas pueden utilizar sulfuro, azufre elemental o tiosulfato como donador de electrones.
    Se estudi la agitacin de los medios como una de las variables que influye en el crecimiento de los
    microorganismos quimiolitotrficos. Los microorganismos utilizados, los medios de cultivo empleados
    y las condiciones de los mismos se mantuvieron constantes. Posteriormente se determin
    indirectamente el crecimiento de los microorganismos
    mediante la cuantificacin de sustratos
    residuales o de los productos oxidados.
    Posteriormente se rest la cantidad de productos oxidados y de sustratos residuales obtenidos en los
    matraces inoculados a los matraces sin inoculo los cuales se encontraban en condiciones de
    agitacin y con la finalidad de cuantificar solo la cantidad de productos oxidados y sustratos por los
    microrganismos; de manera anloga se realiz a los cultivos en condicin estacionaria.
    Thiobacillus thiooxidans es una bacteria oxidante del azufre; ocupando por lo tanto el azufre
    elemental contenido en el medio A como donador de electrones y oxidndolo hasta sulfato que al
    ionizarse se forma cido sulfrico lo cual se pudo denotar con una disminucin del pH inicial de 4.5 a
    1.7-1.8 en el medio agitado y estacionario inoculado con lo que se comprob el crecimiento de
    Thiobacillus thiooxidans y el consorcio de microorganismos respectivamente; tambin se verifico que
    en los medios inoculados no hubo formacin de este producto ya que no hubo cambio en el pH
    inicial.

    Ecuacin 1.

    +
    1
    2

    S +1 O 2+ H 2 O SO 4 + 2 H
    2

    Es importante mencionar que el microorganismo empleado es auttrofo y aerobio estricto por lo que
    se emplea CO2 como nica fuente de carbono y O2 como aceptor final de electrones.
    Mediante el mtodo de acidez titulable se cuantifico el cido sulfrico formado y los resultados
    obtenidos permitieron visualizar con claridad que Thiobacillus thiooxidans presenta un crecimiento
    mayor cuando el medio se mantiene en agitacin en comparacin con un medio estacionario, de
    igual forma en la determinacin del azufre proveniente de sulfatos se observ que a mayor contacto
    con el aire producido como consecuencia de la agitacin se favorece la solubilizacin de O 2 y CO2
    en el medio, lo que favorece el crecimiento del microorganismo y por lo tanto la produccin de
    metabolitos tambin aumenta.
    La cuantificacin del azufre residual se realiz mediante un mtodo gravimtrico, el cual no es
    especifico, por lo que los resultados pudieron verse modificados por varios factores como la
    sensibilidad de la balanza analtica, perdida de filtrado o debido a que distintos analistas realizaron
    las pesadas.
    En el medio B se evalu el crecimiento de un consorcio de bacterias que emplea tiosulfato como
    fuente de energa formando sulfatos que posteriormente se ionizan y producen cido sulfrico,
    causando en el medio una disminucin del pH inicial de 7.0 a 2.3 en el medio agitado y de 3.0 en el
    medio estacionario. Al analizar los resultados de la cuantificacin de cido sulfrico es posible
    determinar que los microorganismos empleados crecen mejor en un medio con agitacin. Sin
    embargo, mediante una titulacin yodomtrica se cuantifico el tiosulfato oxidado y se obtuvieron
    resultados similares en ambos medios, lo cual permite suponer que la agitacin no es un factor que
    modifique el crecimiento del consorcio bacteriano.

    Ecuacin 2.

    +
    2

    S 2 O2
    +O
    +
    H
    3
    2
    2 O SO 4 +2 H

    Conclusiones:
    Se determin el crecimiento de Thiobacillus thiooxidans y del consorcio de microorganismos.
    Los microorganismos quimiolitotrficos tienen mayor actividad metablica al encontrarse en
    condiciones de agitacin que en el cultivo estacionario.

    Se produjo la acidificacin de los medios al llevarse a cabo la oxidacin de las diversas


    fuentes de energa y la formacin de cido sulfrico.

    Bibliografa:
    [1] Cook, Thomas M. (1964) Growth
    Bacteriol. 88:620623.

    of Thiobacillus thiooxidans in

    shaken

    culture. J.

    [2] Gottschalk, G. (1986) Chemolithotropic and Phototrophic Metabolism. Bacterial metabolism 2


    edicin; Paginas consultadas 283 y 284.
    [3] Pars R et al Bioqumica de los microorganismos Reverte; Paginas Consultadas 273-275.

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