Rev Peru Med Exp Salud Publica 23(3), 2006

artculo original

Vibrio cholerae No O1 EN MUESTRAS DE AGUAS NO CLORADAS

CONSUMIDAS POR POBLADORES DE LAS LOCALIDADES
DE SANTA Y COISHCO (ANCASH), 2003 - 2004
Ana Garca P1, Leoncio Pedreros R1, Blanca Huapaya2
RESUMEN
Objetivo: Identificar la presencia de Vibrio cholerae en muestras de agua no cloradas para consumo humano en las
localidades de Santa y Coishco. Materiales y mtodos: Entre julio de 2003 a junio de 2004 se tomaron muestras de
agua, en forma semanal, provenientes de siete pozos con bomba manuable y de seis pozos con reservorio. A cada
muestra de agua se le midi in situ el cloro residual mediante un comparador de cloro Hatch, mtodo colorimtrico,
usando para ello las pastillas DPD 1. En las muestras con cloro <0,05mg/L se realiz el cultivo segn los manuales
de procedimientos del Instituto Nacional de Salud (INS, Lima). Las cepas aisladas se enviaron al INS para confirmacin diagnstica y pruebas serolgicas. Resultados: Se incluyeron 308 muestras de agua para consumo humano en
ambos distritos (201 de pozos con bomba manuable y 107 con reservorio). Se realiz el aislamiento en 70(22,7%)
muestras: Aeromonas caviae 34(11,0%), Aeromonas hidrophyla 17(5,5%) y Vibrio cholerae No O1 19(6,2%), no se
encontr V. cholerae del serotipo O139. El Vibrio cholerae No O1 se aisl en 11(5,5%) muestras de pozos con bomba
manuable y en 8(7,4%) pozos con reservorio, respectivamente. Conclusin: El agua de consumo humano proveniente
de pozos tubulares representa un reservorio potencial para bacterias como Aeromonas y Vibrio cholerae, resaltando la
necesidad de realizar la desinfeccin correspondiente de sta antes de su consumo.
Palabras clave: Vibrio cholerae no-O1; Aeromonas; Aguas subterrneas; Consumo de agua (fuente: DeCS BIREME).
ABSTRACT
Objective: Identify the presence of Vibrio cholerae in unchlorinated water samples intended for human consumption
in locations of Santa and Coishco. Materials and methods: Between July 2003 and June 2004, water samples were
collected weekly from seven water wells with manual pumps and from six wells with reservoir. Residual chlorine levels
were measured at the site using a Hatch chlorine comparing tool, chlorimetric method, using DPD 1 pills. Well samples
were cultured according to National Institute of Health (INS Lima) standard operating procedures. Isolated strains
were submitted to the INS for diagnostic confirmation and serologic testing. Results: A total of 308 drinking water
samples from both districts were included (201 from wells with manual pumps and 107 with reservoir). Isolates were
obtained from 70(22,7%) samples. Aeromonas caviae 34(11,0%), Aeromonas hidrophyla 17(5,5%) and Vibrio cholerae
non-O1 19(6,2%) were detected; V. cholerae O139 was not found. Vibrio cholerae non-O1 was isolated in 11(5,5%)
samples from manual pump wells and 8(7,4%) from wells with reservoirs. Conclusions: Drinking water from tubular
wells represents a potential reservoir for bacteria, such as Aeromonas and Vibrio cholerae, highlighting the need for
disinfection before use.
Keys word: Vibrio cholerae non-O1; Aeromonas; Groundwaters; Water consumption (source: DeCS BIREME).

INTRODUCCIN
En 1991 el clera golpe a Latinoamrica luego de
aproximadamente 100 aos de ausencia1,2. Esta enfermedad se dispers tan rpidamente en el Per que,
segn los resultados de coprocultivos confirmados en
1995, los casos de diarrea acuosa fueron ocasionados
en 52,7% por Vibrio cholerae serovar Ogawa3,4.

El V. cholerae se clasifica en dos serogrupos O1 y No

O1, dentro del serogrupo O1 existen tres serotipos
(Ogawa, Inaba e Hikojima) y dos biotipos (Clsico y
El Tor), en el grupo No O1 se han identificado hasta
154 variedades antignicas, algunas de ellas responsables tambin de casos de clera, como el serotipo
O1395,6,7.

1
2

Hospital de Apoyo La Caleta. Direccin Regional de Salud Ancash. Chimbote, Per.

Centro Nacional de Salud Pblica, Instituto Nacional de Salud. Lima, Per.

Esta investigacin cont con el apoyo tcnico - financiero del proyecto Enfrentado las amenazas de las enfermedades infecciosas
emergentes y reemergentes Viga (MINSA / USAID) en el marco del IV Concurso para Proyectos de Investigacin en Enfermedades Infecciosas Emergentes y Reemergentes ao 2003.

168

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A travs de los aos se ha logrado un mejor control de

la enfermedad diarreica aguda (EDA) en nuestro pas,
las tasas de morbi-mortalidad han ido disminuyendo y el
grado de saneamiento ambiental ha ido mejorando, reduciendo los reportes de aislamientos de V. choleare7.

Vibrio cholerae No 01 en agua de consumo

el control de sus servicios como la cloracin de agua,

decidimos investigar la presencia de Vibrio cholerae en
muestras de agua no cloradas para consumo humano
en las localidades de Santa y Coishco

MATERIALES Y MTODOS
Sin embargo, en ciertas zonas del pas la situacin es diferente, tal es el caso de la jurisdiccin de la Unidad Territorial de Salud (UTES) La Caleta, ubicada en Chimbote,
Ancash, ciudad de la costa del Per, donde la frecuencia
de casos de EDA durante los aos 2001 y 2002 fue alta:
18112 y 17951 casos, respectivamente. Adems, segn
los coprocultivos realizados en dicha UTES, desde el
ao 1999 el Vibrio cholerae No O1 fue identificado como
otro agente causal de EDA (datos estadsticos obtenidos
en el rea de Microbiologa del Departamento de Laboratorio Clnico del Hospital La Caleta Chimbote).
Por otro lado, pese a la promocin del consumo de
agua segura por parte del sector salud, hasta el ao
2003 el Laboratorio de Microbiologa de dicha UTES ha
reportado muestras de agua no cloradas con un alto
nmero de coliformes totales, las cuales en su mayora
provienen de los distritos Santa y Coishco. En estos
distritos algunas localidades se proveen de agua para
consumo humano a travs de pozos tubulares, que son
abastecidos por las aguas subterrneas que contienen
cierto grado de salinidad, necesaria para el crecimiento
de algunas especies de Vibrio cholerae6.
Un tipo de pozos tubulares son los construidos artesanalmente, provistos de una bomba manual para extraer
el agua subterrnea desde aproximadamente 11 metros
de profundidad, no requieren personal dedicado, pero
no permiten la cloracin del agua (pozo con bomba manuable). Otro tipo son los pozos subterrneos provistos
de motores con capacidad de extraer agua a unos 50
metros de profundidad y poseen reservorios ubicados a
una altura aproximada de 10 a 15 metros, y requieren
personal dedicado para su mantenimiento y cloracin
del agua (pozo con reservorio).

Estudio descriptivo prospectivo, realizado en localidades de los distritos de Santa y Coishco, de la provincia
de Santa, departamento de Ancash, en la costa central
del Per (Figura 1); durante un periodo de 12 meses, de
julio de 2003 a junio de 2004. Los distritos tienen una
poblacin de 32 234 habitantes, y en sus respectivos
centros de salud acuden un promedio de 700 pacientes
con sntomas diarreicos al ao.
Para la muestra del estudio, se seleccionaron arbitrariamente los pozos de las localidades que segn estudios
bacteriolgicos realizados por la Direccin Ejecutiva de
Saneamiento Ambiental tenan agua contaminada con
mayor frecuencia, escogiendo para el seguimiento seis
pozos tubulares de cada tipo. En cada pozo tubular se
tom una muestra de agua con las respectivas condiciones de esterilidad, en forma semanal, durante un
ao. A cada muestra de agua se le midi in situ el cloro
residual mediante un comparador de cloro Hatch, mtodo colorimtrico, usando para ello las pastillas DPD
1 (Dietil Parafenileno Diamino). Aquellas muestras de
agua con valores de 0,05 mg/L de cloro residual fueron excluidas (segn el reglamento de la Ley General
de Aguas Ley N. 17752).

Dentro de las actividades para el control de la diarrea y

el clera, el Laboratorio de Microbiologa y la Unidad de
Saneamiento Ambiental de la UTES La Caleta realizan
en forma conjunta el control del agua de consumo humano directo en casas y reservorios, midiendo la presencia de cloro residual y realizando cultivos bacteriolgicos para la deteccin de coliformes fecales y totales,
restringiendo la bsqueda de Vibrio cholerae slo a las
aguas del mar, donde se encuentra mayoritariamente8.
Por lo expuesto, a fin de contribuir al planteamiento
de estrategias donde las comunidades participen en

Figura 1. Ubicacin de la provincia de Santa (distrito de Coishco y Santa), departamento de Ancash, Per.

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Cuando el cloro residual era <0,05mg/L, se tom una

segunda muestra de agua para ser llevada al Laboratorio de Saneamiento Ambiental de la UTES La Caleta
donde se realiz el respectivo anlisis bacteriolgico,
adems de medir el pH y la temperatura de la muestra.
El mtodo de aislamiento consisti en filtrar 100 mL de
muestra con el equipo de filtracin Millipore, mediante
una membrana de acetato de celulosa de 0,22 de porosidad, seguido de incubacin en agua peptonada alcalina (APA) por seis a ocho horas a 35 C, y, finalmente, se sembr una alcuota del caldo de enriquecimiento
en una placa de TCBS por estriado para el aislamiento
de colonias. La metodologa fue realizada siguiendo las
pautas establecidas por el Instituto Nacional de Salud
(INS) para el aislamiento V. cholerae en muestras ambientales9. El control de calidad de los aislamientos se
realiz en el Laboratorio de Referencia Nacional de Enteropatgenos, del Centro Nacional de Salud Pblica
del INS en Lima, para confirmacin diagnstica y enfrentamiento a los serotipos O1 y O139.

mento de Laboratorio Clnico y la jefatura de la Unidad

Tcnica de Saneamiento Ambiental. Por no involucrar a
seres humanos, fue exonerado de revisin por un comit de tica en investigacin.

El presente estudio cont con la aprobacin de la Direccin del Hospital La Caleta, la jefatura del Departa-

Fueron tomadas 389 muestras de agua para consumo

humano en ambos distritos. De ellas 76 fueron exclui-

Los datos fueron incluidos en un base de datos, previo

control de calidad se analizaron con el paquete estadstico SPSS v.11.0, para comparacin de promedios se
us la prueba t student para muestras independientes
previa comprobacin de su distribucin normal con la
prueba de Kolomogorov-Smirnov. Se consider significativo con un p<0,05.

RESULTADOS
De julio de 2003 a junio de 2004 se realiz la colecta de
muestras de agua en siete pozos con bomba manuable
y en seis con reservorio; al tercer mes de seguimiento,
una localidad inaugur un pozo con reservorio y clausur su bomba manuable.

Tabla 1. Evaluacin microbiolgica de las muestras de agua de consumo humano segn procedencia.
UTES La Caleta, julio 2003 junio 2004.

N.

Pozo
Tubular

Localidad

Muestras
excluidas*

Muestras cultivadas
Aeromonas sp.

Vibrio cholerae

Negativa

Total

(%)

(%)

(%)

(%)

Con Bomba Manuable (BM)

1

Santa

Castillo

(-)

(-)

10

(100)

10

(5,0)

Santa

Pampa la Grama

(19,1)

(10,6)

33

(70,2)

47

(23,4)

Santa

Rami

(20,7)

(3,4)

22

(75,9)

29

(14,4)

Santa

Rio Seco*

(-)

(-)

(100)

(1,5)

Santa

Santa Cruz

(22,9)

(2,9)

26

(74,3)

35

(17,4)

Santa

Santa Rosa

10

(20,4)

(8,2)

35

(71,4)

49

(24,4)

Coishco

Coishco

(10,7)

(-)

25

(89,3)

28

(13,9)

36

(17,9)

11

(5,5)

154

(76,6)

201

(65,3)

(3,6)

7,1

25

(89,3)

28

(26,2)

Subtotal
Con Reservorio (RES)
1

Santa

Javier Heraud

Santa

Rio Seco*

(-)

(-)

(100)

(7,5)

Santa

San Carlos

22

(-)

(-)

(100)

(3,7)

Santa

San Dionisio

(21,4)

(3,6)

21

(75,0)

28

(26,2)

Santa

Santa Cruz 2

(18,2)

(9,1)

24

(72,7)

33

(30,8)

Coishco

Coishco 1

21

(33,3)

(33,3)

(33,3)

(2,8)

Coishco

Coishco 2

21

(33,3)

(33,3)

(33,3)

(2,8)

81

15

(14,0)

(7,5)

84

(78,5)

107

(34,7)

81

51

(16,6)

19

(6,2)

238

(77,3)

308

100

Subtotal
Total

* Presentaron cloro residual 0,05 mg/L o no se realiz esta medicin (cinco casos).

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Vibrio cholerae No 01 en agua de consumo

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Tabla 2. Caractersticas fsico-qumicas del agua segn aislamiento y tipo de pozo de

procedencia. UTES La Caleta, julio 2003 - junio 2004.
Caractersticas
del agua

Segn aislamiento

Segn tipo de pozo

(+)

(-)

Manuable

Reservorio

Cloro residual

0,007

0,019

NS

0,001

0,043

<0,001

pH

6,70

6,59

NS

6,59

6,66

NS

Temperatura (C)

24,1

23,2

0,001

23,4

23,4

NS

das por presentar cloro residual 0,05 mg/L y otras cinco por no contar con tal medicin; todas provinieron de
pozos con reservorio.
De las 308 muestras finalmente incluidas, 201 correspondieron a pozos tubulares con bomba manuable y
107 a pozos tubulares con reservorio (Tabla 1), los resultados microbiolgicos mostraron aislamiento en 70
(22,7%) muestras: Aeromonas caviae en 34 (11,0%),
Aeromonas hidrophyla en 17 (5,5%) y Vibrio cholerae
No O1 en 19 (6,2%), no se identificaron V. cholerae del
serotipo O139.
Se realiz el aislamiento en 47 (23,4%) muestras de
pozos con bomba manuable y en 23 (21,5%) de pozos
con reservorio. El Vibrio cholerae No O1 se aisl en 11
(5,5%) muestras de pozos con bomba manuable y en
ocho (7,4%) muestras de pozos con reservorio, respectivamente.

cloro. Tanto Aeromonas como Vibrio cholerae No O1

causan alteraciones gastrointestinales, por lo que una
ingesta considerable de estos grmenes podra provocar enfermedades diarreicas agudas13,14.
Existe evidencia que muestra la presencia natural de
Vibrio cholerae en ambientes clidos y salinos6,12. Debemos considerar que, incluso en reas endmicas,
resulta difcil el aislamiento de Vibrio cholerae O1 del
ambiente, particularmente durante periodos interepidmicos, mientras que el Vibrio cholerae No O1 es detectado con mayor facilidad15. Ello podra explicar el hecho
de encontrar serotipos No O1; sin embargo, dados los
antecedentes en nuestra regin, podemos acreditar que
la ausencia del serotipo O1 se debe a una situacin real
ms que a un defecto de aislamiento.

DISCUSIN

Si bien el nivel ptimo de salinidad para el crecimiento

est entre 5 y 25%, Vibrio cholerae es uno de los pocos
Vibrios que pueden tolerar salinidades menores16,17.
Al respecto, se realiz un seguimiento de cinco meses
(hasta diciembre de 2004) en las mismas localidades,
encontrndose valores de salinidad de 0 a 1% en pozos con bombas manuales y de 0 a 0,7% en pozos con
reservorio, con slo un aislamiento (Aeromonas sp.) en
86 muestras de cuatro pozos con bomba manuable y
ninguno en las 35 muestras de seis pozos con reservorio. Considerando que la salinidad del agua subterrnea se mantiene estable a lo largo del ao, entonces el
aislamiento de especies del gnero Vibrio demostrara
su tolerabilidad a niveles bajos de salinidad.

Estudios previos han demostrado la presencia del Vibrio

cholerae en agua marina de la costa norte, centro y sur
de nuestro pas (1998-2000)10, reportndose inclusive
cuadros compatibles de clera antes del inicio de la epidemia11; afortunadamente, ninguno encontr presencia
del serogrupo O1397. Este estudio muestra que el agua
de consumo humano proveniente de pozos tubulares
representa un reservorio potencial para bacterias como
Aeromonas y Vibrio cholerae, resaltando la necesidad
de realizar la desinfeccin correspondiente de sta antes de su consumo, ya sea hirvindola o adicionndole

Por otro lado, la ausencia de aislamientos durante el

seguimiento indicara la existencia de otros factores
influenciando este crecimiento bacteriano. Por ejemplo, en la costa peruana, se encontr una correlacin
significativa entre la incidencia del clera y la elevada
temperatura de la superficie marina desde octubre de
1997 a junio de 2000, periodo que incluye el fenmeno
de El Nio 1997-199818. En este estudio encontramos
que una mayor temperatura del agua (1 C) est asociada con un aislamiento positivo, lo cual concuerda
con lo mencionado anteriormente. Otros factores am-

Al comparar los valores promedio de cloro residual, pH

y temperatura en muestras con (+) y sin (-) aislamiento,
se encontr diferencia significativa slo en el nivel de
temperatura, aproximadamente 1 C ms en las que se
aisl algn agente. De la misma manera, al comparar
estas caractersticas segn tipo de pozo de procedencia, se observ diferencias significativas slo en el nivel
de cloro residual, que fue superior en los pozos con
reservorio (Tabla 2).

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Garca A. et al.

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bientales, en el caso del agua marina, son la carga de

zooplancton y fitoplancton derivados de las condiciones
acuticas globales o locales, y la presencia de vibriofagos relacionados con el cese de brotes epidmicos19.
Este estudio sirvi para demostrar adems la necesidad de estimular la cloracin del agua (prctica promovida por el Estado), no slo de aquella que proviene
de pozos con bombas manuales (donde debera ser
obligatorio), sino incluso de los reservorios, ya que los
niveles encontrados resultaron inadecuados para el fin
propuesto en la mayora de muestras (107 de 188). Esto
resulta an ms importante considerando que un gran
sector de la poblacin de estas localidades se dedica a
actividades agrcolas, la mayor parte del da fuera de
casa, consumiendo agua derivada de los pozos. Por lo
que es imperativo educar a la poblacin en aspectos de
promocin y prevencin en el consumo de agua potable
para evitar ms episodios de diarrea20.
En conclusin, si bien se encontr Vibrio cholerae No
O1 solamente en 4,6% de las muestras de agua para
consumo humano en dos localidades costeras de la
provincia Santa, los aislamientos ocurrieron en la mayora de pozos, independientemente de tener o no reservorio. Acciones educativas y de saneamiento ambiental en forma oportuna resultan prioritarias a fin de
evitar el desencadenamiento de brotes epidmicos de
enfermedades diarreicas agudas.
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Correspondencia: Ana Victoria Garca Pino.
Direccin: Hospital de Apoyo La Caleta. Urb. Nicols Garatea
Mz. 45 Lte. 24. Nuevo Chimbote, Santa. Ancash, Per.
Telfono: (51) 043-310646.
Correo electrnico: [email protected], [email protected].