PROTOCOLO DE TESIS

Crecimiento
biorremediacin
cultivada

en

y
de
aguas

capacidad
Chlorella

de

vulgaris

residuales

con

efluentes de origen domstico, industrial

y agrcola en el lago de Chapala.

VANESSA MONSERRAT ALDANA CASTOLO

NDICE

I.

RESUMEN 3

II.

INTRODUCCIN

III.

ANTECEDENTES

IV.

JUSTIFICACIN 6

V.

HIPOTESIS

VI.

OBJETIVOS

VII. MATERIALES Y MTODOS 7

VIII. LITERATURA CITADA 8
IX.

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

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1.

Resumen

En los pases en va de desarrollo, existe un crecimiento sin control ni planeacin tanto de industrias como de
asentamientos humanos, originando entre otros el problema de alteracin de la calidad del agua en los ecosistemas
acuticos, ya que se utilizan como un sistema de eliminacin muy cmodo, en donde los ros tienen un papel
fundamental, dada su naturaleza ltica. El deterioro de la calidad del agua, supone un grave problema medioambiental y
socioeconmico, que se acenta en zonas de escasos recursos. El uso del agua potable para abastecimiento urbano e
industrial, debe ir acompaado de una correcta depuracin que permita su reutilizacin para riego agrcola, de reas
verdes, aguas recreativas, reutilizacin industrial, piscicultura, o bien como elemento que no perturbe el equilibrio
biolgico de la zona de vertido y que evite la contaminacin de acuferos subterrneos y masas superficiales de aguas
continentales o marinas.
El Lago de Chapala ha estado expuesto a diversas fuentes y niveles de contaminacin, como descargas municipales de
diferentes comunidades, aguas de retorno agrcola y aguas residuales provenientes del ro Lerma, vertidas por
industrias.
El uso de las microalgas, como biosistema alternativo, en el tratamiento de las aguas residuales, ha sido el objeto de
numerosas investigaciones debido a su capacidad de remover cantidades significativas de N y P durante su crecimiento,
absorber metales y acelerar la inactivacin de bacterias patgenas. Adems la biomasa algal producida, durante el
procesamiento de estos efluentes, representa una fuente potencial de alimentos, qumicos y pigmentos, entre otras
importantes aplicaciones

Abstract
In developing countries, there is a growth without control or planning of human settlements, both industries originating
among others the problem of deterioration of the water quality in aquatic ecosystems, since they are used as a
convenient removal system, where the rivers have a key role, given its lotica nature. The deterioration of the quality of
the water, is a serious environmental and socio-economic problem which is accentuated in low-income areas. The use of
drinking water for urban and industrial supply, must be accompanied by a proper debugging that allows their reuse for
agricultural irrigation, landscaping, recreational waters, industrial reuse, farming or as element which do not disturb the
biological balance of the spill area and to avoid contamination of underground aquifers and surface masses of
continental or marine waters. Lake Chapala has been exposed to different sources and levels of pollution, such as
municipal discharges from different communities, agricultural return water and wastewater from the Lerma River,
poured by industries. The use of microalgae, as alternative biosystem, in the treatment of wastewater, has been the
subject of numerous research due to their ability to remove significant amounts of N and P during its growth, absorb
metals and accelerate the inactivation of pathogenic bacteria. In addition the biomass produced algal, during the
processing of these effluents, represents a potential source of food, chemicals and pigments, among other important
applications.

2.

Introduccin
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En los pases en va de desarrollo, existe un crecimiento sin control ni planeacin tanto de industrias como de
asentamientos humanos, originando entre otros el problema de alteracin de la calidad del agua en los ecosistemas
acuticos, ya que se utilizan como un sistema de eliminacin muy cmodo, en donde los ros tienen un papel
fundamental, dada su naturaleza ltica. El deterioro de la calidad del agua, supone un grave problema medioambiental y
socioeconmico, que se acenta en zonas de escasos recursos. El uso del agua potable para abastecimiento urbano e
industrial, debe ir acompaado de una correcta depuracin que permita su reutilizacin para riego agrcola, de reas
verdes, aguas recreativas, reutilizacin industrial, piscicultura, o bien como elemento que no perturbe el equilibrio
biolgico de la zona de vertido y que evite la contaminacin de acuferos subterrneos y masas superficiales de aguas
continentales o marinas1.
En el caso del lago de Chapala, el ro Lerma constituye la principal fuente de contaminacin debido a que todos los
desechos que son vertidos en l desembocan en el lago2.
El Lago de Chapala ha estado expuesto a diversas fuentes y niveles de contaminacin, como descargas municipales de
diferentes comunidades, aguas de retorno agrcola y aguas residuales provenientes del ro Lerma, vertidas por
industrias3.
La inmensa mayora de los usuarios no tratan el agua una vez que la utilizan, y ms bien la aprovechan como vehculo
para eliminar desechos. Ejemplo de ello ha sido la escasa infraestructura de saneamiento para tratar las descargas de las
industrias ms importantes de la cuenca, el incumplimiento de reglamentos y condiciones de descarga, las bajas tarifas
por uso de agua, as como el incremento en el volumen de los efluentes urbanos y de los retornos agrcolas de zonas de
riego.
En ambientes acuticos naturales o artificiales, marinos o de agua dulce, las microalgas estn siempre asociadas a
bacterias ya sea como promotoras de crecimiento, simbiontes o bien contaminantes 4. Las microalgas, organismos
auttrofos que ocupan el primer eslabn en la cadena trfica, han recibido mucha atencin en los ltimos aos,
especialmente en las regiones tropicales y subtropicales, en donde se emplean como un biosistema alternativo para la
remocin de nutrientes de este tipo de aguas. Estos microorganismos incorporan nitrgeno en forma de amonio que es
utilizado para formar aminocidos; aunque tienen la capacidad de incorporarlo en forma de nitrato 5.
El uso de las microalgas, como biosistema alternativo, en el tratamiento de las aguas residuales, ha sido el objeto de
numerosas investigaciones debido a su capacidad de remover cantidades significativas de N y P durante su crecimiento,
absorber metales y acelerar la inactivacin de bacterias patgenas 6. Adems la biomasa algal producida, durante el
procesamiento de estos efluentes, representa una fuente potencial de alimentos, qumicos y pigmentos, entre otras
importantes aplicaciones7.
El gnero Chlorella as como algunas especies del grupo de las cianobacterias, se han descrito en el tratamiento de
diferentes tipos de aguas residuales, destacando las provenientes de plantas de tratamiento convencionales 8, de origen
industrial, urbano y las derivadas de excretas animales. El objetivo de la presente investigacin es evaluar el uso de
Chlorella vulgaris para la remocin de nitrgeno, fsforo y DQO del lago de Chapala.

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3.

Antecedentes

El tratamiento de las aguas residuales es solo una parte del sistema de limpieza del agua, la produccin de lodos y el
manejo del agua tratada es otro aspecto de esta actividad. Existen varios mtodos para el tratamiento de aguas
residuales. De acuerdo con el grado de complejidad y del espectro de sustancias, materiales y organismos eliminados, se
dividen en los siguientes niveles: primario, el cual elimina el 60 % de los slidos suspendidos, un 30 % de materia
orgnica y entre un 5 a un 15 % de nutrientes; secundario, elimina el 90 % de los slidos suspendidos y el 90 % de la
demanda bioqumica de oxgeno. El deterioro de la calidad del agua, supone un grave problema medioambiental y
socioeconmico, que se acenta en zonas de escasos recursos. El uso del agua potable para abastecimiento urbano e
industrial, debe ir acompaado de una correcta depuracin que permita su reutilizacin para riego agrcola, de reas
verdes, aguas recreativas, reutilizacin industrial, piscicultura, o bien como elemento que no perturbe el equilibrio
biolgico de la zona de vertido y que evite la contaminacin de acuferos subterrneos y masas superficiales de aguas
continentales o marinas9.
Diferentes estudios se han realizado para probar los efectos de crecimiento y capacidad de biorremediacin de
Chlorella vulgaris; Las microalgas, organismos auttrofos que ocupan el primer eslabn en la cadena trfica, han
recibido mucha atencin en los ltimos aos, especialmente en las regiones tropicales y subtropicales, en donde se
emplean como un biosistema alternativo para la remocin de nutrientes de este tipo de aguas. Estos microorganismos
incorporan nitrgeno en forma de amonio que es utilizado para formar aminocidos; aunque tienen la capacidad de
incorporarlo en forma de nitrato10. La utilizacin de microalgas para remocin de nutrientes ha sido estudiada por ms
de 50 aos, comprobando que la biomasa algal obtenida tiene un alto contenido de protenas, lpidos, carbohidratos, y
otros productos de valor agregado. Por lo tanto, los esfuerzos para cultivar este tipo de microorganismos en aguas
residuales han buscado conseguir un doble beneficio, la produccin de biomasa para diferentes usos y un efluente
limpio con una tecnologa relativamente simple11.
Los gneros Chlorella y Scenedesmus, as como algunas especies del grupo de las cianobacterias, se han reportado para
el tratamiento de diferentes tipos de aguas residuales, destacando las provenientes de plantas de tratamiento
convencionales de origen industrial y urbano12.

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4. Justificacin
El lago de Chapala est siendo contaminado por las descargas de ciudades, industrias y la agricultura. Aunque grandes
esfuerzos se han hecho para incrementar el nmero y la capacidad de plantas de tratamiento de aguas residuales en la
cuenca y en la ribera del lago, hoy grandes volmenes de efluentes son todava descargados sin ningn tratamiento
previo. La concentracin existente de nutrientes en el lago genera eutroficacin asociada por el crecimiento de
vegetacin acutica flotante que podran causar problemas de sabor y olor en agua para abastecimiento urbano y afectar
la sanidad del ecosistema.

5. Hiptesis
La realidad de uno de los problemas que se plantea en el lago Chapala es la gran cantidad de sedimentos que recibe de
sus afluentes. Cada ao el lago recibe 930.000 toneladas de slidos que van en aumento desde los ltimos aos. Las
causas de este aumento se atribuyen a la reduccin en el volumen almacenado de agua, as como a la disminucin de
salidas por el ro Santiago desde 1981. Los cambios en el uso del suelo a lo largo del Lerma tambin contribuyen a que
reciba un mayor volumen de sedimentos. Los procesos de deforestacin propiciados por prcticas agrcolas
tradicionales contribuyen tambin al azolve del lago.
Otro problema en el lago es su alta contaminacin, solo el 8% del agua del lago se considera aceptable, el 92% restante
est contaminado en diferentes niveles, el 52% est moderadamente contaminado y el 41% est altamente contaminado.
La contaminacin del lago se produce por residuos industriales, qumicos agrcolas y aguas negras municipales. La
contaminacin del agua, se puede clasificar en dos tipos diferentes: Bacteriolgica, por las aguas residuales urbanas y
de centros de produccin porcina, y, qumica, de origen tambin urbano pero fundamentalmente en las reas
industriales. El agua est altamente contaminada con DDT, qumicos agrcolas, cobre, plomo, cromo, zinc, cianuro,
aguas negras y fsforo. Un estudio de las descargas de nueve plantas de tratamiento que vacan directamente en el lago
encontr niveles de fsforo 74 veces ms elevado que la norma de USEPA. El 64% del agua que llega al lago est sin
tratar y se considera que se necesitaran unas 130 plantas de tratamiento de aguas negras para mejorar la calidad del
lago.
Las consecuencias ambientales y econmicas an se desconocen, pero se advierte un fuerte deterioro ambiental y, con
ello, la degradacin del medio ambiente a largo plazo. Salvar el Lago de Chapala sera congruente con una poltica
sustentable, para lo cual se propone probar la capacidad y crecimiento de la alga verde Chlorella vulgaris en dichas
aguas para su biorremediacin.

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6.

Objetivos

Objetivo general:

Desarrollar tecnologas eficientes y de bajo costo para el tratamiento de aguas residuales de uso domstico.

Objetivo especfico particular:

Evaluar el crecimiento y la eficacia de remocin de nutrientes de Chlorella vulgaris en efluentes generados por
poblacin jalisciense de origen domstico, industrial y agrcola en el lago de Chapala.
7.

Materiales y Mtodos

Empleando sepas de Chlorella vulgaris, aisladas. Para el medio de cultivo se utilizara agua residual proveniente del
lago de Chapala. Por lo tanto el agua que analizaremos solo ser sometida a un tratamiento preliminar de cribado, por lo
que contendr mayor concentracin de nutrientes. Tomando dos muestras ms; una sometida a esterilizacin durante 20
minutos a 121C y 15 libras de presin, mientras que la otra alcuota solamente ser filtrada usando dos veces papel
Whatman N 42. Las muestras sern rotuladas como:
Agua con contaminacin inicial.
Agua esterilizada.
Agua filtrada.
Los tratamientos controles se prepararon con agua destilada esterilizada y medio de Cultivo ALGAL 13 a una
concentracin equivalente a 6,0 mM de NaNO3 y 0,3 mM de NaHPO4 como nicas fuentes de nitrgeno y fosfato.
Los bioensayos se iniciaran con un inculo de 0.64 x 10 6 de Chlorella vulgaris, el cual provenan de cultivo en fase
exponencial y desarrollado en medio ALGAL a 6,0 mM de NaNO 3. Los experimentos se desarrollaron, por triplicado,
en recipientes de vidrio con un volumen de 200 mL, se mantuvieron con una radiacin de 137 mol.q.m2.s1, bajo
ciclos de luz: oscuridad de 12:12 horas, a una temperatura promedio de 28 2C y sin aireacin por un perodo de 27
das.
7.1 Densidad celular, contenido de pigmentos y protenas
El crecimiento de cada microalga se determin mediante el conteo celular de los cultivos cada 3 das, utilizando una
cmara de Neubaer. El contenido de clorofila total y de carotenoides se cuantific a partir del extracto metanlico de la
biomasa algal fresca cada 3 das. Los extractos obtenidos se clarificaron por centrifugacin y la concentracin de los
pigmentos se determin mediante espectrofotometra.

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7. 2 Anlisis fisicoqumicos

El contenido de fosfato (P-PO4-3), nitrgeno amoniacal (N-NH4+) y DQO. Estos anlisis se realizaron en:
a) Agua residual cruda: agua residual sin ningn tratamiento.
b) Agua residual para el cultivo de las microalgas: agua residual esterilizada y agua residual filtrada no esterilizada, y
luego de inocular la microalga a las 24 h y a los 27 das de iniciado el experimento.
En estos anlisis se utilizaron los sobrenadantes de los cultivos por rplica de cada tratamiento, luego de una
centrifugacin de 30 mL de cada cultivo durante 15 minutos a 1000 rpm.
7. 3 Anlisis estadstico
Los resultados se expresaron como los promedios de los triplicados de cada tratamiento.

8. Literatura citada
1. Aranda-Cirerol, N., Herrera-Silveira, J.A., Comn, F.A. 2006. Nutrient water quality in a tropical
coastal zone with ground water discharge, northwest Yucatn, Mexico. Estuar Coast Shelf Scien
2.

68:445454.
Limn J., Jaramillo, J., Ledesma, R., West, L., lvarez, S. y Ruz, R., (1986), recopilacin, Segunda
etapa de evaluacin sobre calidad del agua en el lago de Chapala, Jalisco. Subsecretara de

3.

Ecologa, Direccin General de Prevencin y Control de la Contaminacin Ambiental. Vol 1, pp. 404.
Casteln, H. Mora, L. Molina, I. Garca, J.. (2004). Calidad del agua. En Variacin de los
Organismos Fitoplanctnicos y la Calidad del Agua en el Lago de Chapala, Jalisco, Mxico.(pp.

4.

47 -56). Mxico: Acta universitaria.

Mouget, J. L; Dakhama, A.; Lavoie, M. C; De la Noe, J. 1995. Algal growth enhancement by
bacteria: is consumption of photosynthetic oxygen involved?. FEMS Microbiology Ecology 18:

5.
6.

35-44.
Contreras, E.F. 1994. Manual de tcnicas hidrobiolgicas. Ed. Trillas. Ciudad de Mxico, 141p.
ABALDE J., A. CID, P. FIDALGO, E. TORRES y C. HERRERO. 1995. Microalgas: Cultivos y
Aplicaciones. Monografa N 26. Laboratorio de Microbiologa, Facultad de Ciencias, Universidad de

7.

Corua. 210 pp.

BOROWITZKA M.A. y L.J. BOROWITZKA. 1988. Vitamins and Fine Chemical from
Microalgae. In: Borowitzka M.A. & Borowitzka L.J. Microalgal Biotechnology. Cambridge

8.

University Press, Cambridge 153-196.

LAVOIE A. y J. DE LA NOE. 1985. Hyperconcentrated Cultures of Scenedesmus obliquus: A
New Approach for Wastewater Biological Tertiary Treatment. Wat. Res. 19: 1437-1442.

9.

Aranda-Cirerol, N., Herrera-Silveira, J.A., Comn, F.A. 2006. Nutrient water quality in a tropical
coastal zone with ground water discharge, northwest Yucatn, Mexico. Estuar Coast Shelf Scien
68:445454

10. Jeanfils, J., Canisius, M.F., Burlion N. 1993. Effect of high nitrate concentrations on growth and
nitrate uptake by free-living and immobilized Chlorella vulgaris cells. J Appl Phycol 5:369374.
11. J. De la Noe, N. De Pauw. 1988. The potential of microalgal biotechnology. A review of
production and uses of microalgae Biotechnol. Adv., 6, pp. 725770

Pgina 8

12. Andrade, R.C., Vera, B.A.L., Cardenas, L.C.H., Morales-Avendao, E.D. 2009. Produccin de
biomasa de la microalga Scenedesmus sp. utilizando aguas residuales de pescadera. Rev Tec Ing
Univ Zulia 32(2):126134.
13. Fbregas J., J. ABALDE Y C. HERRERO. 1989. Biochemical Composition and Growth of the
Marine Microalgae Dunaliella tertiolecta (Butcher) with different Ammonium Nitrogen
Concentration as Chloride, Sulphate, Nitrate and Carbonate. Acuaculture 83: 289-304.

9. Cronograma de actividades
Actividades

Fechas

Inicio de protocolo de tesis

27 de agosto de 2015

Indagar algn tema de inters

3-15 de septiembre de 2015

Redaccin del titulo

17 de septiembre de 2015

Anlisis e investigacin del tema

24 de septiembre-17 de octubre de 2015

Introduccin del tema

19-23 de octubre de 2015

Consulta de antecedentes

26 de octubre de 2015

Justificacin e importancia de la investigacin

3 de noviembre de 2015

Objetivos de la investigacin

5 de noviembre de 2015

Mtodos a utilizar

9 de noviembre

Recoleccin y procesamiento de datos

11 de noviembre de 2015

Diseo de presentacin de diapositivas

13 de noviembre de 2015

Revisin y correccin del trabajo final

16-20 de noviembre de 2015

Entrega de protocolo de tesis

20 de noviembre de 2015

(trabajo final)

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