Técnicas Cromatográficas

TCNICAS CROMATOGRFICAS
CHROMATOGRAPHIC TECHNIQUES
Autores: Amaya, C. F., Gmez, M. A., y Vsquez, N. P.
Corporacin Tecnolgica de Bogot TRF B V, Fitoqumica
Bogot D.C.-Colombia
Fecha 03/11/2015
Correo: [email protected], [email protected], [email protected]
RESUMEN
choice of solvent and problems from the
La separacin de compuestos desde un extracto
collection of the sample. This is verified by
etanlico de hierbabuena puede verse afectada por
observing in thin plate chromatography alone it
la eleccin del solvente y problemas desde la
was evident a red-violet color with the use of ether
recoleccin de la muestra. Esto se comprueba al
and chloroform as mobile phase (solvent chosen
observar en cromatografa por placa fina, solo
as the most optimum), indicating that the
pudo evidenciarse una coloracin roja-violeta con
components are closely related with the solvent.
el uso de ter y cloroformo como fase mvil
The
(solvente elegido como el ms ptimo), indicando
characteristic colors are generated, but may be due
que los componentes son muy afines con el
to the addition of dyes whose function better
solvente.
artculos
identification of each component, which could
colores
support the fact that he had only given a colored
caractersticos, pero, puede deberse a la adicin
stain and the rest in coffee tones in the samples
de tintes que tienen como funcin una mejor
taken from column chromatography, which are
identificacin de cada componente, con lo cual se
within established ranges rf plant samples.
podra sustentar el hecho de que solo hubiese dado
Key words: Thin layer chromatography, column
una mancha coloreada y el resto en tonos caf en
chromatography, mobile phase, stationary phase,
las muestras tomadas de cromatografa en
peppermint, secondary metabolites.
Lo
consultados
resultante
dice
que
en
se
los
generan
columna, las cuales se encuentran dentro de los

rangos establecidos de rf para muestras vegetales.
Palabras clave: cromatografa en capa delgada,
cromatografa en columna, fase mvil, fase
estacionaria,
hierbabuena,
metabolitos
secundarios.
ABSTRACT
The separation of compounds from an ethanol
extract of peppermint can be affected by the
resulting articles on respondents said
INTRODUCCIN
La cromatografa es un procedimiento importante
para lograr la separacin de los compuestos
presentes en una muestra, en este caso el extracto
etanlico de la hierba buena; a partir de una fase
mvil, una fase estacionaria y un revelador se
pueden evidenciar los metabolitos en la placa, en
la cromatografa en columna estos se separan por
fracciones en tubos eppendford. Es importante
tomar en cuenta la fase mvil a elegir de acuerdo
a la polaridad requerida para la migracin del
fase estacionaria por un tiempo que puede
compuesto, por esta razn se realiza primero la
estimarse por la afinidad de tales componentes
cromatografa en capa fina y generalmente se
con la silica.
realiza una mezcla de solventes, en cuanto a la
Tubos
fase estacionaria habitualmente se utiliza la slica,
obtenidas de la cromatografa en columna luego
que de acuerdo a su capacidad de adsorcin y a la
de que comience a eluir las distintas coloraciones
decantacin generada en la columna, logra retener
obtenidas en la tcnica como mtodo de
los compuestos que son ms a fin a esta y con ello
separacin.
se consigue la separacin de los mismos.
RESULTADOS
MATERIALES Y MTODOS
RESULTADOS
Cromatografa en capa delgada: Se prepararon
tres fases mviles, todas en una proporcin de 6:4,
cromatografa en capa fina, el eluyente sobrepaso
usando reactivos como etanol, cloroformo y ter.
la lnea de siembra en la cmara cromatogrfica,
La cmara cromatogrfica debe saturarse con la
en el segundo procedimiento se alcanz a observar
fase mvil al menos 20 minutos para acelerar la
una mancha en forma de lnea horizontal, aunque
migracin de la fase mvil en la placa fina que
no tena la forma deseada, el color era rojo-
contiene silica como fase estacionaria. Debe
violeta, el cual segn la bibliografa corresponde a
procurar que la cantidad de fase mvil adicionada
la carvona y con un rf equivalente a 0,9. Este
no sobrepase la lnea de siembra de las muestras
metabolito es un terpenoide que se encuentra en el
pues conlleva a que no se produzca la separacin
aceite esencial de la hierbabuena. Por esta razn la
de los componentes de la hierbabuena para este
fase mvil escogida fue la mezcla de ter y
caso. Es importante que la corrida de la fase mvil
cloroformo (6:4) lo cual indica tambin que la
sobre la placa llegue hasta 1 cm de la parte
carvona corresponde a un compuesto apolar ya
superior
que tuvo ms afinidad con la fase mvil (tabla 1).
de
sta
ya
que
puede
que
los
eppendorf:
pesar
de
Contienen
Y
que
las
muestras
DISCUSIN
al
realizar
la
DE
primera
componentes salgan de la silica y no puedan
Otros compuestos presentes en el extracto son el
visualizarse luego de haber dejado secar la placa a
alcohol
temperatura ambiente, haber agregado vainillina y
hidrocarveol, de colores azul intenso cada uno, los
colocado a secar nuevamente en una plancha de
cuales
calentamiento.
cromatografa
Cromatografa en columna: Se prepar 20 mL de
bibliografa puede deberse a reactivos adicionales
solvente (ter-cloroformo) que mezclado con
como lo son colorantes con el fin de diferenciar
cantidad suficiente de silica se adicionaba en la
mejor
columna y se dejaba decantar por un tiempo
resultantes sobre todo en cromatografa de placa
prudente hasta visualizar que la silica quedaba
fina, probablemente sean eventos producto del
retenida a los 2,5 mL de la columna. Se
solvente elegido por disolver en gran medida los
adicionaba extracto etanlico (gotas) y luego ms
compuestos que se buscaban separar.
solvente ya que la fase mvil permite la
Como se dijo anteriormente es importante
separacin de los componentes retenidos en la
determinar cul es la fase mvil adecuada para
dihidrocumnico
posiblemente
cada
pero
estn
lo
separacin.
Acetato
presentes
encontrado
Los
de
en
la
en
la
inconvenientes
manejar en la cromatografa en columna, esto se
que no entraran en este rango sera la del tubo 5
realiz en el inicio de la prctica mediante la
(tabla 2).
elaboracin de varias pruebas con las mezclas de
*A menor rf, la sustancia queda retenida en la FE
los solventes presentes, por lo tanto, la serie
como lo se ve en tubos 1, 2 y 3. A mayor rf tienen
eluotrpica funciona como un patrn para saber la
mayor afinidad por la FM como el caso del tubo 5
capacidad relativa que tienen cada uno de los
y en equilibrio a un rango aproximado a 0,5
solventes para desplazar los metabolitos. La serie
como se evidencia en el tubo 4.
pude presentarse como un listado de la siguiente

manera. De menor polaridad a mayor polaridad:
Bibliografa
Blanco Lozano, V., Daz Lorenzo , S., Velsquez

Gil, A., Snchez Jimnez, O., Luna
Morales, J., & Rivera Hernndez, G. (7
de Febrero de 2013). Destilacin simple
y cromatografa en papel. Obtenido de
http://practicaslaboratorio08.blogspot.co
m.co/2013/02/practica-6-destilacionsimple-y.html
Pentano
ter de petrleo
Hexano
Ciclohexano
Tetracloruro de carbono
Tolueno
Xileno
Benceno
Cloroformo
Acetona
Acetato de etilo
Acetonitrilo
Iso-propanol
Metanol
Agua
adems la fase estacionaria que era la slica es un
De Len Morn, T. M., & Cano Morales, T. M.

(Febrero de 2005). Extraccipon de aceite
esencial crudo de hierbabuena con la
aplicacin del mtodo de extraccin por
arrastre con vapor variando los tamaos
de muestra y humedad a partir de
pruebas a nivel laboratorio. Obtenido de
http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/08/08_0
945_Q.pdf
compuesto altamente polar, se puede decir que el
Anexos
Como la fase mvil se obtuvo de una mezcla de

un solvente apolar y uno medianamente polar, y
modelo bsico de operacin manejado en las

cromatografas corresponde a la fase normal, el
cual indica que la fase mvil es apolar y la fase
estacionaria polar.
Los fenmenos que actan en separacin en las
cromatografas corresponden a la absorcin y a la
adsorcin.
Conclusiones
*El resultado de rf para la separacin de
componentes de la hierbabuena en cromatografa
por columna para extractos vegetales se considera
ptimo en la literatura, cuando los valores estn
entre un rango de 0,1 a 0,8. Por tanto, la muestra

Técnicas Cromatográficas

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Técnicas Cromatográficas

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Técnicas Cromatográficas

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

TCNICAS CROMATOGRFICAS

choice of solvent and problems from the

La separacin de compuestos desde un extracto

collection of the sample. This is verified by

etanlico de hierbabuena puede verse afectada por

observing in thin plate chromatography alone it

la eleccin del solvente y problemas desde la

was evident a red-violet color with the use of ether

recoleccin de la muestra. Esto se comprueba al

and chloroform as mobile phase (solvent chosen

observar en cromatografa por placa fina, solo

as the most optimum), indicating that the

pudo evidenciarse una coloracin roja-violeta con

components are closely related with the solvent.

el uso de ter y cloroformo como fase mvil

(solvente elegido como el ms ptimo), indicando

characteristic colors are generated, but may be due

que los componentes son muy afines con el

to the addition of dyes whose function better

identification of each component, which could

support the fact that he had only given a colored

caractersticos, pero, puede deberse a la adicin

stain and the rest in coffee tones in the samples

de tintes que tienen como funcin una mejor

taken from column chromatography, which are

identificacin de cada componente, con lo cual se

within established ranges rf plant samples.

podra sustentar el hecho de que solo hubiese dado

Key words: Thin layer chromatography, column

una mancha coloreada y el resto en tonos caf en

chromatography, mobile phase, stationary phase,

las muestras tomadas de cromatografa en

peppermint, secondary metabolites.

columna, las cuales se encuentran dentro de los

resulting articles on respondents said

a la polaridad requerida para la migracin del

fase estacionaria por un tiempo que puede

compuesto, por esta razn se realiza primero la

estimarse por la afinidad de tales componentes

cromatografa en capa fina y generalmente se

realiza una mezcla de solventes, en cuanto a la

fase estacionaria habitualmente se utiliza la slica,

obtenidas de la cromatografa en columna luego

que de acuerdo a su capacidad de adsorcin y a la

de que comience a eluir las distintas coloraciones

decantacin generada en la columna, logra retener

obtenidas en la tcnica como mtodo de

los compuestos que son ms a fin a esta y con ello

se consigue la separacin de los mismos.

Cromatografa en capa delgada: Se prepararon

tres fases mviles, todas en una proporcin de 6:4,

cromatografa en capa fina, el eluyente sobrepaso

usando reactivos como etanol, cloroformo y ter.

la lnea de siembra en la cmara cromatogrfica,

La cmara cromatogrfica debe saturarse con la

en el segundo procedimiento se alcanz a observar

fase mvil al menos 20 minutos para acelerar la

una mancha en forma de lnea horizontal, aunque