Los Niveles

Nivel de Bioseguridad 1
En este nivel se trabaja con agentes que presentan un peligro mnimo para el personal del laboratorio y para el ambiente. El acceso al laboratorio no es
restringido y el trabajo se realiza por lo regular en mesas estndar de laboratorio. En este nivel no se requiere equipo especial ni tampoco un diseo
especfico de las instalaciones. El personal de estos laboratorios es generalmente supervisado por un cientfico con entrenamiento en microbiologa.
Incluye varios tipos de bacterias y virus como la hepatitis canina, Escherichia coli no patgena, as como algunos cultivos de clulas y las bacterias noinfecciosas. En este nivel las precauciones tomadas con los materiales de riesgo biolgico en cuestin, son los guantes de plstico y algn tipo de
proteccin facial. El laboratorio no est necesariamente aislado de las dems instalaciones del edificio. El trabajo se realiza generalmente en mesas de
trabajo abiertas. Por lo general, los materiales contaminados se desechan en recipientes de residuos abiertos. Los procedimientos de
descontaminacin para este nivel son similares en muchos aspectos a las precauciones modernas contra los microorganismos de la vida cotidiana (por
ejemplo, lavarse las manos con jabn antibacteriano, lavar todas las superficies expuestas del laboratorio con los desinfectantes, etc.)
Nivel de Bioseguridad 2
Es similar al nivel 1 y en l se manejan agentes de peligro moderado hacia el personal y el ambiente, pero difiere del nivel 1 en las siguientes
caractersticas:
1.

El personal de laboratorio tiene entrenamiento especfico en el manejo de agentes patgenos

2.

El acceso al laboratorio es restringido cuando se est realizando algn trabajo

3.

Se toman precauciones extremas con instrumentos punzocortantes contaminados

4.

Ciertos procedimientos en los cuales pueden salpicar los agentes o aerosoles se llevan a cabo en gabinetes de trabajo biolgico

Nivel de Bioseguridad 3
Este nivel es el que se encuentra en los laboratorios clnicos, de diagnstico, algunos laboratorios universitarios y tambin de investigacin, en el cual
se realiza trabajo con agentes exticos o que pueden causar un dao serio y potencialmente mortal como resultado de la inhalacin o exposicin a los
mismos (por ejemplo, el Carbunco).
El laboratorio cuenta con un diseo y caractersticas especiales y todos los materiales son manipulados utilizando vestimenta y equipo de proteccin. El
personal de laboratorio tiene una formacin especfica en el manejo de patgenos y agentes potencialmente letales, y son supervisados por cientficos
competentes con experiencia en el trabajo con estos agentes. Todos los procedimientos que implican la manipulacin de materiales infecciosos se
llevan a cabo dentro de los gabinetes de seguridad biolgica, campanas de diseo especial, u otros dispositivos de contencin fsica, o por personal
que use el equipo de proteccin personal y equipos.
Sin embargo, se reconoce que no todos los laboratorios llegan a cumplir con las normas recomendadas para este nivel de bioseguridad. En estas
circunstancias, es aceptable el realizar las siguientes prcticas para poder seguir operando de una manera segura:
1.

Ventilar el aire del laboratorio al exterior

2.

La ventilacin del laboratorio se tiene que hacer con un flujo de aire direccional controlado

3.

El acceso al laboratorio est restringido

4.

Seguir el estndar de prcticas microbiolgicas y equipamiento de seguridad impuesto para el nivel de bioseguridad 2.

Nivel de Bioseguridad 4
Este nivel es el que se utiliza para trabajar con agentes biolgicos que representan un alto riesgo individual de contagio y que adems son un riesgo
para la vida. Los agentes nuevos que tienen un cierto parecido con los antgenos de los agentes conocidos que operan en el nivel 4, son confinados a
este nivel hasta que se tiene suficiente informacin para confirmar que pertenecen a este nivel o bien pasarlos al nivel adecuado.
El personal de estos laboratorios cuenta con entrenamiento especfico y extensivo en el manejo de agentes infecciosos y cuentan con entrenamiento
para trabajar en el ambiente estril y controlado de los mismos.
Por lo regular los cientficos que trabajan aqu, utilizan trajes especiales que cubren la totalidad de sus cuerpos y que adems tienen una
leve sobrepresin para evitar que entren partculas infecciosas al mismo si es que ste llega a desgarrarse.
Los laboratorios se mantienen con una presin de aire negativa, lo cual ayuda a impedir que los agentes nocivos escapen al ambiente. Adems, las
instalaciones estn en un edificio separado o en un rea controlada dentro de un edificio, que est completamente aislada de las dems reas del
edificio.

NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Normas generales

No fumes, comas o bebas en el laboratorio.

Utiliza una bata y tenla siempre bien abrochada, as protegers tu ropa.

Guarda tus prendas de abrigo y los objetos personales en un armario o taquilla y no los dejes nunca sobre la mesa
de trabajo.

No lleves bufandas, pauelos largos ni prendas u objetos que dificulten tu movilidad.

Procura no andar de un lado para otro sin motivo y, sobre todo, no corras dentro del laboratorio.
Si tienes el cabello largo, recgetelo.
Dispn sobre la mesa slo los libros y cuadernos que sean necesarios.
Ten siempre tus manos limpias y secas. Si tienes alguna herida, tpala.
No pruebes ni ingieras los productos.
En caso de producirse un accidente, quemadura o lesin, comuncalo inmediatamente al profesor.
Recuerda dnde est situado el botiqun.
Mantn el rea de trabajo limpia y ordenada.

Normas para manipular instrumentos y productos

Antes de manipular un aparato o montaje elctrico, desconctalo de la red elctrica.

No pongas en funcionamiento un circuito elctrico sin que el profesor haya revisado la instalacin.
No utilices ninguna herramienta o mquina sin conocer su uso, funcionamiento y normas de seguridad especficas.
Maneja con especial cuidado el material frgil, por ejemplo, el vidrio.
Informa al profesor del material roto o averiado.
Fjate en los signos de peligrosidad que aparecen en los frascos de los productos qumicos.
Lvate las manos con jabn despus de tocar cualquier producto qumico.
Al acabar la prctica, limpia y ordena el material utilizado.
Si te salpicas accidentalmente, lava la zona afectada con agua abundante. Si salpicas la mesa, lmpiala con agua y
scala despus con un pao.
Evita el contacto con fuentes de calor. No manipules cerca de ellas sustancias inflamables. Para sujetar el
instrumental de vidrio y retirarlo del fuego, utiliza pinzas de madera. Cuando calientes los tubos de ensayo con la
ayuda de dichas pinzas, procura darles cierta inclinacin. Nunca mires directamente al interior del tubo por su

abertura ni dirijas esta hacia algn compaero. (ver imagen)

Todos los productos inflamables deben almacenarse en un lugar adecuado y separados de los cidos, las bases y
los reactivos oxidantes.
Los cidos y las bases fuertes han de manejarse con mucha precaucin, ya que la mayora son corrosivos y, si caen
sobre la piel o la ropa, pueden producir heridas y quemaduras importantes.
Si tienes que mezclar algn cido (por ejemplo, cido sulfrico) con agua, aade el cido sobre el agua, nunca al
contrario, pues el cido saltara y podra provocarte quemaduras en la cara y los ojos.
No dejes destapados los frascos ni aspires su contenido. Muchas sustancias lquidas (alcohol, ter, cloroformo,
amonaco...) emiten vapores txicos.

BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO CLINICO

Los laboratorios de anlisis clnicos constituyen un rea en la cual coinciden muchos agentes
potencialmente agresivos, tanto para la salud del personal como para las propias instalaciones.
Por ello, todos los procedimientos analticos entraan un riesgo, a veces indeterminado, que
aumenta con la introduccin de nuevas tcnicas, productos qumicos y biolgicos, as como con los
equipos.
AGENTES DE RIESGO
Los agentes potenciales de riesgo para la salud en
el trabajo de los laboratorios se clasifican para su estudio
en cuatro grupos:
1. Biolgicos.
2. Qumicos.
3. Fsicos.
4. Humanos y ambientales.

Cristalera de Laboratorio Se denomina cristalera de laboratorio, al conjunto de objetos utilizados

en la realizacin de diferentes procedimientos tcnicos, que independientemente de su forma y
tamao estn constituidos solamente por vidrio.

CLASIFICACION
La cristalera de laboratorio de clasifica de la siguiente manera: Cristalera de almacenaje y cristalera de medicin.
1. Cristalera de almacenaje: incluye todas las unidades destinadas a contener o almacenar productos qumicos. Estas deben
tener una alta resistencia qumica, cierre hermtico y, en algunos casos, fotorresistencia, para evitar que la luz dae su
contenido. En esta categora se agrupan los frascos de Erlenmeyer y Kitasoto, los frascos para reactivos y los vasois
precipitado (beakers y Koplin; las placas de petri, los tubos de ensayo en todos sus tamaos y variantes; lminas
portaobjetos, embudos y morteros.
2. Cristalera de medicin:

Volumtrica: en este grupo se encuentran los instrumentos de mayor inters y mas amplia aplicacin en le laboratorio. Incluye
la gran mayora de las pipetas, las probetas, los matraces aforados y las copas graduadas, as como las cmaras de conteos
celulares. Todos estos instrumentos estn calibrados a una temperatura de 20 C, lo que quiere decir que los volmenes de
lquido medidos a esta temperatura tiene una exactitud confiable, si el enrase se efecta de manera correcta, es decir, con el ojo
del operador formando plano horizontal con la seal del aforo y haciendo coincidir con ste la parte inferior del menisco, si la
solucin es incolora; si se trata de soluciones coloreadas, entonces debe hacerse el enrase por encima del menisco. A medida
que la temperatura se aleja de 20 C, la medida se hace mas inexacta.

No volumtricos: este grupo incluye a los instrumentos de vidrio que revelan magnitudes que no expresan volumen. Ese es el
caso de las pipetas de toma y de Westergreen.

CARACTERIZACIN
CRISTALERA.

DE

LOS

DIFERENTES

TIPOS

DE

CRISTALERA GENERAL DE TRABAJO.

Erlenmeyer Los erlenmeyer son recipientes de forma cnica y fondo plano, que se caracteriza por tener un dimetro 3 5 veces
mayor en su porcin inferior con respecto a su porcin superior. Si lo colocamos sobre la mesa de trabajo y lo observamos de arriba
hacia abajo podemos percatarnos que en el extremo superior presenta una abertura circular con rebordes, que corresponde a la boca,
seguida de una porcin cilndrica de algunos cm a manera de cuello. Al concluir este espacio se va ensanchando progresivamente de
forma oblicua adquiriendo la forma cnica que lo caracteriza. Aunque los erlenmeyer pueden emplearse para la preparacin de
diferentes reactivos, esta cristalera est diseada especficamente para la preparacin de compuestos que requieran ser sometidos a
la accin del calor, como por ejemplo, la preparacin de medios de cultivo, debido a que su forma cnica, hace que los vapores se
condensen en el cuello, lo que propicia que no afecte significativamente el volumen de la preparacin. Los erlenmeyer se fabrican de
diferentes tamaos. Los ms empleados en el laboratorio de microbiologa son los de: 100, 250, 300,500 y 1 000 ml. Los de menor o
mayor volumen de capacidad se utilizan con menor frecuencia.
Kitasatos Los frascos de Kitasatos, son similares a los erlenmeyer con la diferencia de que en el cuello tiene insertado un pequeo
tubo corto en direccin horizontal abierto en su porcin distal siendo las paredes de vidrio ms gruesas, para soportar las diferencias
de presiones externas e internas provocadas por las tcnicas de filtracin al vaco para los que bsicamente son empleados. Al igual
que los erlenmeyer se fabrican de diferentes tamaos.
Frascos para reactivos Los frascos para reactivos son de diferentes tipos y pueden contener de acuerdo a su tamao entre 25 ml y 1
litro. La tapa del frasco puede ser de cristal esmerilado o plstica si el cierre es de rosca, lo que depender del tipo de reactivo que
contenga. Con ambas variantes se consigue el cierre hermtico del frasco. Esta cristalera puede ser incolora o mbar para la
proteccin de reactivos fotosensibles.
Frascos de fondo plano Se utilizan para la preparacin de determinadas disoluciones, fabricndose de diferentes tamaos, debiendo
ser termorresistentes por si se requiere someterlos a la accin del calor. En el trabajo microbiolgico se utilizan regularmente para la
preparacin del antgeno de cardiolipina, utilizado en las pruebas serolgicas VDRL.
Frascos goteros Existen en el mercado diferentes modelos. Los de vidrio, tradicionalmente empleado son incoloros o mbar. De
acuerdo con su capacidad, pueden contener entre 25 y 100 ml. Estos frascos poseen una tapa de vidrio esmerilado provista de una
ranura perpendicular, que cuando se rota la tapa y se hace coincidir con la ranura en el cuello del frasco, el contenido gotear si se
inclina el frasco adecuadamente. Otros modelos consisten en frascos provistos de un gotero con tapn de caucho, similar a los
empleados en los frascos de medicamentos, en tanto que otro estn diseados para que comiencen a gotear si el frasco es invertido.
Vaso de Koplin Estos vasos se caracterizan por ser cuadrados con paredes rectangulares. Algunos estn diseados para ser
utilizados en posicin vertical y otros de forma horizontal, pero todos tienen, en dos de sus paredes inferiores que quedan frente a
frente, 4 ms salientes de vidrio de 1mm de grosor alineados a todo lo largo con una separacin de 2 mm entre s, lo que posibilita la
insertacin de varias lminas portaobjetos, de manera que quedan separados. Estos vasos estn provistos de tapas de vidrio y se
utilizan para fijar preparaciones sobre lminas portaobjetos y/o colorearlas.
Tubos de ensayo Son pequeos recipientes de vidrio o plstico, fabricados de diferentes tamaos, con capacidad variable. Todos son
cilndricos, aunque la forma de sus extremos vara en funcin de su empleo. Los utilizados comnmente en anlisis cualitativos y
cuantitativos tiene el fondo ligeramente cncavos, en tanto que los tubos para cultivo son similares, pero se diferencian en que estn
provistos en su extremo superior de aristas helicoidales por donde se enrosca una tapa de baquelita, resina sinttica obtenida por
polimerizacin del fenol y el formaldehdo, generalmente con estras longitudinales para facilitar su sujecin cuando se van a
desenroscar, mientras que los tubos de centrfuga se caracterizan por tener el fondo cnico, para acoplarse a los portatubos de la
centrfuga, pudiendo tener impresa una escala de graduacin en ml. Los tubos ordinarios y los empleados para cultivo, mayormente
utilizados en los laboratorios de microbiologa, son los de 12 x 75, 13 x 100, 15 x 125 y 16 x 150 mm, correspondiendo el primer valor
al dimetro y el segundo a la longitud. Se utiliza esencialmente para contener, conservar y procesar muestras biolgicas, cultivar
microorganismos y realizar pruebas de identificacin para el diagnstico de laboratorio, de las especies investigadas.

Vidrio reloj Es un tipo de cristalera circular y cncava de aspecto transparentes, similar a las utilizadas para cubrir las esferas de
algunos relojes despertadores. Se utilizan regularmente para efectuar pesadas de productos slidos con excepcin de aquellos que
sean higroscpicos que absorben la humedad del aire o voltiles.
Placas de "Petry" Estn constituidas por una caja circular de vidrio de 11 ms cm de dimetro con el fondo plano pudiendo o no
estar tabicado con un borde de 1 cm de altura en todo su permetro. La placa se completa con una tapa igualmente de vidrio con un
diseo similar al de la caja, pero, ligeramente superior en dimetro. Cuando las dos partes se ensamblan, la superficie interior de la
tapa queda descansando sobre el borde de la caja. En el trabajo microbiolgico se utiliza comnmente para contener algn medio de
cultivo slido.
Embudos Los embudos presentan la porcin superior cnica y la posterior en forma de un tubo cilndrico y delgado cortado
oblicuamente en su extremo terminal, pudiendo tener una longitud, menor, igual o mayor que la porcin cnica, cuya capacidad oscila
entre 30 ml y 5 litros, teniendo las paredes internas, segn el modelo, estriadas o lisas. Se emplean para traspasar lquidos.
Lminas portaobjetos Las lminas portaobjetos son planas, delgadas y lisas, de aspecto transparente y forma rectangular. Miden 7,5
cm de largo por 2,5 cm de ancho. Se utilizan esencialmente para colocar sobre su superficie pequeas fracciones o volmenes de
muestras, que sern sometidas o no a un proceso de coloracin, con la finalidad de ser observadas a travs del microscopio. Este tipo
de lmina se emplea igualmente como soporte para realizacin de pruebas serolgicas de aglutinacin.
Lminas excavadas Son similares a las lminas portaobjetos ordinarias, con la diferencia de que presentan una excavacin cncava
de algo ms de 1 cm de dimetro en centro de la lmina en forma de pozuelo. Se utilizan para la preparacin de la "gota colgante",
una tcnica mediante la cual se determina microscpicamente si la bacteria en estudio es o no mvil.
Lminas cubre objetos Son laminillas muy delgadas, transparentes e incoloras. La forma vara de cuadradas a rectangular; cuando
son cuadradas miden 22 x 22 mm y cuando son rectangulares 22 x 50 mm. Son empleadas para cubrir las muestras o preparaciones
que han sido colocadas previamente sobre las lminas portaobjetos para ser observadas al microscopio.

CRISTALERA DE MEDICIN
Pipetas Son tubos de vidrio rectos, de longitud y grosor variable que se caracterizan por tener el extremo inferior ligeramente cnico.
Se fabrican diferentes tipos, que han sido diseados para diversos procederes de laboratorio, siendo utilizada bsicamente para medir
y/o transferir volmenes exactos de lquidos. Las ms utilizadas en los laboratorios de microbiologa, son las pipetas graduadas,
principalmente las de 1, 2, 5, y 10 ml. Este tipo de pipeta tiene impreso en la parte superior un nmero que equivale a su capacidad
volumtrica y a todo lo largo una escala graduada en ml, que indica numricamente los espacios en que se divide el volumen total.
Cada espacio a su vez se divide en 10 lneas equidistantes que corresponden a las subdivisiones volumtricas. Por ejemplo: En una
pipeta de 5 ml de capacidad, la escala queda dividida en 5 espacios iguales, cada uno de los cuales equivale a 1 ml. Cada especio a
su vez se subdivide en 10 lneas, equivalente cada una de ellas a 0,1 ml. Las pipetas serolgicas, son similares a las graduadas, pero
su capacidad es de 1 ml o menos, estando dividida en 0,1 y/o 0,01 ml. En el trabajo microbiolgico se utiliza en ocasiones un tipo de
pipeta no graduada, denominada pipeta de Pasteur, que puede ser fabricada en el propio laboratorio con tubos de cristal fusible
mediante su exposicin a la llama del mechero de gas. Este tipo de pipeta suele emplearse cuando no se requiere precisar con
exactitud el volumen a pipetear. Procedimientos para el manejo de las pipetas graduadas:
1. Sostenga la pipeta por su parte superior mediante los dedos pulgar y medio.
2. Haga penetrar la pipeta en el lquido que va a ser aspirado.
3. Introduzca el otro extremo en la boca y aspire suavemente, observando simultneamente la escala graduada, hasta que la
columna de lquido sobrepase ligeramente la marca deseada.
4. Retire la pipeta de la boca y de inmediato tape el orificio con la yema dedo ndice, ejerciendo la presin suficiente para evitar
que el lquido descienda por gravedad.

5. Manteniendo la presin del dedo ndice, proceda a retirar el exceso de lquido de la parte exterior de la pipeta, con un pao,
gasa o servilleta limpia.
6. Introduzca la pipeta en el frasco o tubo donde se extrajo el lquido y haga que la punta contacte con la pared interna. Estando
la pipeta en posicin perpendicular ir aflojando la presin del dedo ndice para propiciar que la columna de lquido descienda
del por gravedad, hasta observar que la curvatura en la superficie del lquido (menisco) contacte justamente sobre la lnea
correspondiente que marca el volumen deseado. En ese momento exacto, proceda nuevamente a ejercer presin con el
dedo ndice para evitar que el lquido contine descendiendo. Al realizar la lectura volumtrica, evitar incurrir en el error de
paralaje, ocasionado por no estar el ojo del observador en el mismo plano horizontal con respecto al menisco, que
ocasionara errores en la lectura.
7. Introduzca la punta de la pipeta en el frasco o tubo receptor, apoyando la punta, en la parte superior de la pared interna y
nunca sobre el fondo, pues al retirar la pipeta parte del lquido trasegado quedarn adherido al exterior de la pipeta, siendo
arrastrado al retirarla, afectando la exactitud del volumen pipeteado.
8. Proceda a aflojar la presin del dedo para distribuir el volumen deseado en cada tubo.
9. Al vaciarse el contenido de la pipeta, en el extremo de la punta quedar un pequeo volumen residual. Si la pipeta utilizada,
tiene una banda esmerilada o coloreada en el extremo superior proceda a soplar para que salga y completar el volumen
previsto. Si la pipeta carece de franja esmerilada o coloreada no se debe soplar ya que estn diseadas para desestimar ese
residuo sin que se afecte el volumen deseado. En el caso de las pipetas serolgicas, se soplarn las que estn marcadas en
la parte superior con la letra "D" (to de livery) no debiendo soplarse las marcadas con la letra "C" (to contain).
Probetas Las probetas son recipientes cilndricos y alargados de vidrio, de dimetro y tamao variable, en correspondencia con su
capacidad volumtrica. Las ms utilizadas en el trabajo microbiolgico estn comprendidas en el rango de 50 a 1,000 ml. Estn
provistas de una base de fondo plano que posibilita que puedan ser colocadas en posicin vertical sobre una superficie nivelada. En el
borde del orificio, que se haya en la parte superior, presentan un pico, , similar al de las cafeteras, para facilitar verter el lquido que
contiene sin que se produzcan derramamientos. Algunas probetas estn provistas de tapa de vidrio esmerilado o plstica. La mayora
tienen rotulado en la parte superior un nmero que indica su capacidad volumtrica, la marca de 200C, que es la temperatura de
trabajo de este tipo de cristalera, y al igual que las pipetas, una escala graduada a todo lo largo que divide y subdivide el volumen
total. Se utilizan especficamente para medir volmenes.
Beaker (Vasos de precipitados) Los Beaker son recipientes transparentes e incoloros que presentan una forma cilndrica teniendo
una longitud de casi el doble de su dimetro. Al igual que las pipetas tienen un pico en el borde la boca que propicia que se pueda
verter el lquido que contiene sin que se produzca derramamiento. Al igual que otras cristaleras de medicin, tienen rotulado, el
nmero que indica su capacidad volumtrica, la temperatura de trabajo (200C) pudiendo tener o no una escala graduada en ml, al
igual que las probetas y las pipetas.
Matraces Las matraces son frascos de vidrio incoloros y transparentes que tienen una porcin superior en forma de un fino tubo
cilndrico y alargado, la inferior piriforme con el fondo plano, lo que permite colocarlos en posicin vertical. Algunos estn provistos de
tapa de vidrio esmerilado. Al igual que otros tipos de cristalera de medicin, tienen grabado el nmero que indica su capacidad
volumtrica, la temperatura de trabajo (200C) y una lnea alrededor del cuello que indica la marca de aforo. Se emplean para preparar
disoluciones donde se requiere exactitud.

MATERIALES DE PORCELANA
Adems de los materiales de vidrio o de tefln, en los laboratorios se utilizan otros, fabricados de porcelana, siendo los ms empleados las cpsulas y los morteros.
Cpsulas Son pozuelos de borde esfrico, fondo redondeado y tamao variable, caracterizndose generalmente por ser de color blanco y tener las paredes delgadas lisas y
muy pulidas, con un doblez en forma de labio por un punto de su borde para facilitar verter su contenido, sin que se produzca derramamiento. Uso: Se utilizan regularmente
como recipientes de disoluciones que van a ser sometidas a una medicin de pH o para colocar medios de cultivo que se pretenden pesar.
Morteros Los morteros son recipientes de porcelana, aunque tambin se fabrican de vidrio. A diferencia de las cpsulas, generalmente, son de mayor tamao y estn
provistos de paredes ms gruesas, pudiendo tener el fondo plano o redondeado. Al igual que las cpsulas presentan un doblez en forma de labio en el borde para verter su
contenido. El mortero se complementa con una pieza cilndrica adicional, del mismo material, con el extremo inferior redondeado, denominado mazo, Similar a un pequeo
bate de pelota. Uso: Para triturar compuestos slidos con ayuda del mazo.

LIMPIEZA Y DESINFECCIN.
La cristalera que vaya a ser utilizada en las investigaciones microbiolgicas de laboratorio, debe ser sometida previamente a un
proceso de limpieza y desinfeccin antes de esterilizarla. Si la cristalera es nueva: Debe pasarse previamente por agua caliente para
eliminar la presencia de vestigios fabriles. Despus se sumerge en una solucin de cido clorhdrico al 1%, dejando actuar el
desinfectante por un espacio de tiempo no menor de 4 horas. Posteriormente se lava con detergente, se enjuaga con agua corriente y
finalmente con agua destilada. Despus de escurrida se deja secar al aire o si se desea secado con mayor rapidez se puede introducir
en una incubadora. Cuando la cristalera haya sido utilizada: Si mantiene material infeccioso, por haber estado en contacto directo con
microorganismos o contiene cultivo de sta, debe ser sometida previamente a un proceso de esterilizacin en autoclave a 1210C,
durante 30 minutos, para evitar que el tcnico o la persona encargada de la limpieza de la cristalera se contamine con
microorganismos patgenos. Despus de la esterilizacin, la cristalera se enjuaga para eliminar los restos groseros del material que
contena y se sumerge durante 10 15 minutos en mezcla sulfocrmica, o ms tiempo si la mezcla ya ha sido utilizada y mermada su
efectividad. La cristalera as tratada, se friega con detergente, se enjuaga con agua corriente y finalmente con agua destilada,
procediendo a su secado en la forma explicada.

PREPARACIN PREVIA DE LA CRISTALERA PARA SU

ESTERILIZACIN
Objetivo: Evitar que se vuelvan a contaminar con posterioridad a su esterilizacin y mantenerlas en esas condiciones hasta su
utilizacin. Procedimiento: Despus de desinfectadas, fregadas y secas:

Tubos de ensayos: Se taponean con algodn y se envuelven con papel de estraza en grupos de 5 a 10 tubos.

Placas de Petry: Despus de ensambladas (tapa y caja) podrn ser colocadas dentro de un cilndrico de metal inoxidable con
tapa, fabricado especficamente para ese uso, o en su defecto, las placas sern empaquetadas con papel de estraza,
individualmente, en parejas o en grupos de no ms de 5 placas.

Las pipetas: Se taponean de tal manera que no dificulte la succin, pero al mismo tiempo impida el paso hacia la boca del
material que est pipeteando.

Posteriormente se enrollan en una franja de papel de estraza. Los erlenmeyer, probetas y otras cristaleras similares: Se taponean con
algodn y se retapan con papel de estraza, el cual se ata fuertemente con un lazo al cuello o porcin anterior de la cristalera.

NORMAS GENERALES DE BIOSEGURIDAD

PRECAUCIONES QUE DEBA ADOPTAR EL PERSONAL DE LABORATORIO

No se permitir comer, beber, fumar y/o almacenar comidas as como cualquier otro tem personal (maquillaje, cigarrillos, etc.) dentro del rea
de trabajo.

Usar bata de manga larga dentro de laboratorio, la cual se pondr al momento de entrar y deber ser quitada inmediatamente antes de
abandonar el laboratorio.

Asegurarse de no presentar cortes, raspones u otras lastimaduras en la piel y en caso de que as sea cubrir la herida de manera conveniente.

Usar guantes de ltex de buena calidad para todo manejo de material biolgico o donde exista, aunque sea de manera potencial, el riesgo de
exposicin a sangre o fluidos corporales. Cambiar los guantes toda vez que hayan sido contaminados, lavarse las manos y ponerse guantes
limpios.

No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas.

No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con los guantes puestos.

Bajo ninguna circunstancia se pipeteara sustancia alguna con la boca, para ello se utilizaran peras plsticas o pipeteadores automticos.

Lavar las manos con jabn y agua inmediatamente despus de realizar el trabajo. Descartar los guantes de ltex en un recipiente con solucin
desinfectante.

No detener manualmente la centrifuga, no destaparla antes de que cese de girar.

No permitir la entrada de personas ajenas al laboratorio y/o que no tengan sus implementos de bioseguridad adecuados.

Emplear en todo momento las medidas de bioseguridad aqu expuestas

Clasificacin de la cristalera
La cristalera se clasifica en dos grandes grupos:
1. Cristalera general:
a) Cristalera de trabajo.
b) Cristalera de almacenamiento.
2. Cristalera de medicin:
a) Cristalera volumtrica.
b) Cristalera no volumtrica.
Ejemplos:
1.

Cristalera general de trabajo: mortero, embudo, Koplin, tubos de ensayo, lminas portaobjetos, placas de
Petri.

2.

Cristalera general de almacenamiento: estn todos los frascos que sirven para almacenar reactivos,
colorantes y diferentes disoluciones; estos pueden ser de color mbar o transparente.

3.

Cristalera de medicin volumtrica: los recipientes de medicin volumtrica son vasijas de formas y tama?os
muy diversos que se utilizan para medir diferentes volmenes de lquido, ejemplos: probetas graduadas,
pipetas, copas graduadas.

4.

Cristalera de medicin no volumtrica: reciben el nombre de recipientes aforados, solo permiten medir la
capacidad de volumen, ejemplo: matraz y erlenmeyer.

MATERIAL DE LABORATORIO

Vasos de precipitado. Pueden ser de dos formas:

altos o bajos. Sin graduar o graduados y nos dan un
volumen aproximado (los vasos al tener mucha anchura
nunca dan volmenes precisos). Se pueden calentar
(pero no directamente a la llama) con ayuda de una
rejilla.

Desecador. Recipiente de vidrio que se utiliza para

evitar que los solutos tomen humedad ambiental. En
(2), donde hay una placa, se coloca el soluto y en (1) un
deshidratante.

Embudo de vidrio. Se emplea para trasvasar lquidos

o disoluciones de un recipiente a otro y tambin para
filtrar, en este caso se coloca un filtro de papel cnico o
plegado.

Cristalizador. Puede ser de forma baja o alta. Es un

recipiente de vidrio donde al aadir una disolucin se
intenta que, en las mejores condiciones, el soluto
cristalice.

Vidrio de reloj. Lmina de vidrio cncavo-convexa

que se emplea para pesar los slidos y como recipiente
para recoger un precipitado slido de cualquier
experiencia que se introducir en un desecador o bien en
una estufa.

Embudos de decantacin. Son de vidrio. Pueden ser

cnicos o cilndricos. Con llave de vidrio o de tefln. Se
utilizan para separar lquidos, inmiscibles, de diferente
densidad.

Tubos de ensayo. Recipiente de vidrio, de volumen

variable, normalmente pequeo. Sirven para hacer
pequeos ensayos en el laboratorio. Se pueden calentar,
con cuidado, directamente a la llama. Se deben colocar
en la gradilla y limpiarlos una vez usados, se colocan
invertidos para que escurran. Si por algn experimento
se quiere mantener el lquido, se utilizan con tapn de
rosca.

Probeta. Recipiente de vidrio para medir volmenes,

su precisin es bastante aceptable, aunque por debajo
de la pipeta. Las hay de capacidades muy diferentes: 10,
25, 50 y 100 ml.

Pipetas. Recipientes de vidrio para medir volmenes,

son de gran precisin. Las hay de capacidades muy
diferentes: 0'1, 1'0, 2'0, 5'0, 10'0... ml (las ms precisas
miden I). En cuanto a la forma de medir el volumen,
podemos distinguir entre: graduadas: sirven para poder
medir cualquier volumen inferior al de su mxima
capacidad; de enrase (slo sirven para medir el volumen
que se indica en la pipeta): a su vez pueden ser simples
o dobles. La capacidad que se indica en una pipeta de
enrase simple comprende desde el enrase marcado en el
estrechamiento superior hasta el extremo inferior. En una
pipeta de enrase doble, la capacidad queda enmarcada
entre las dos seales.
Si el lquido no ofrece peligrosidad, colocando la boca
en la parte superior de la pipeta, se succiona y se hace
subir el lquido un poco por encima del enrase. La pipeta
se cierra con el dedo ndice.
Al vaciar la pipeta se debe hacer lentamente para
evitar que quede lquido pegado a las paredes. La ltima
gota no es necesario recogerla porque ya viene aforada
para que quede sin caer (salvo que se indique lo
contrario en la propia pipeta).

Buretas. Material de vidrio para medir volmenes con

toda precisin. Se emplea, especialmente, para
valoraciones. La llave sirve para regular el lquido de
salida. Manejo: 1) se llena con la ayuda de un embudo.
2) los lquidos han de estar a la temperatura ambiente. 3)
el enrase debe hacerse con la bureta llena (aunque
tambin se puede enrasar a cualquier divisin), tomando
como indicador la parte baja del menisco. 4) la zona que
hay entre la llave y la boca de salida debe quedar
completamente llena de lquido. Pueden ser: a) rectas. b)
con depsito. c) de sobremesa con enrase automtico.

Matraz Aforado. Material de vidrio para medir

volmenes con gran precisin. Existen de capacidades
muy variadas: 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000 mI.
Slo mide el volumen que se indica en el matraz. No se
puede calentar ni echar lquidos calientes. El enrase
debe hacerse con exactitud, procurando que sea la parte
baja del menisco del lquido la que quede a ras de la
seal de aforo. Se emplea en la preparacin de
disoluciones.

Mortero con mano o mazo. Pueden ser de vidrio,

gata o porcelana. Se utilizan para triturar slidos hasta
volverlos polvo, tambin para triturar vegetales, aadir un
disolvente adecuado y posteriormente extraer los
pigmentos, etc.

Gradilla. Material de madera o metal (aluminio), con

taladros en los cuales se introducen los tubos de ensayo.

Erlenmeyer. Matraz de vidrio donde se pueden agitar

disoluciones, calentarlas (usando rejillas), etc. Las
graduaciones sirven para tener un volumen aproximado.
En una valoracin es el recipiente sobre el cual se vaca
la bureta.
Matraz. Instrumento de laboratorio que se utiliza,
sobre todo, para contener y medir lquidos. Es un
recipiente de vidrio de forma esfrica o troncocnica con
un cuello cilndrico.

hay de distintos tamaos

Materiales de laboratorio
Nombre y dibujo
1.- Embudo de vidrio

2.- Vaso precipitado

Funcin

Tipo de material

El embudo es un instrumento empleado para

canalizar lquidos y materiales slidos granulares en
recipientes con bocas estrechas. Es usado principalmente
en cocinas, laboratorios, actividades
de construccin, industria, etc.

Pude ser
de vidrio, plstico.

Un vaso de precipitados o vaso de precipitado es un

recipiente cilndrico de vidrio fino que se utiliza muy
comnmente en el laboratorio, sobre todo, para preparar o
calentar sustancias y traspasar lquidos.

Generalmente de
vidrio pero tambin
hay de plstico y
metal.

3.- Fiola
Es un recipiente de vidrio que se utiliza sobre todo para
contener y medir lquidos.
Material de vidrio.
Se emplean en operaciones de anlisis qumico cuantitativo,
para preparar soluciones de concentraciones definidas.
4.-Frasco de reactivo

Permite: guardar sustancias para almacenarlas los hay

mbar y transparentes los de color mbar se utilizan para
guardar sustancias que son alteradas por la accin de
la luz del sol, los de color transparente se utilizan para

Material de vidrio.

guardar sustancias que no son afectadas por la luz solar

5.- Tubo condensador en forma de hlice

Se usa para condensar los vapores que se desprenden

del matraz de destilacin, por medio de un lquido
refrigerante que circula por ste, usualmente agua.

De vidrio.

Su uso es similar al tubo refrigerante en forma de hlice

solo que este es lineal.

De vidrio.

6.- Tubo condensador lineal

7.-Probeta milimetrada
Es un instrumento volumtrico, que permite medir
volmenes considerables con un ligero grado de inexactitud. De vidrio.
Sirve para contener lquidos.

8.- Pipeta
Es un instrumento volumtrico
de laboratorio que permite medir la alcuota de lquido con
bastante precisin.

De vidrio

Se emplea para separar dos lquidos inmiscibles, o sea,

para la separacin de fases lquidas de distinta densidad.

De vidrio.

Est diseado para calentamiento uniforme, y se produce

con distintos grosores de vidrio para diferentes usos.

De vidrio.

Sirve para calentar sustancias con alcohol o ron.

De vidrio o metal.

Es un instrumento utilizado en laboratorios cientficos para

calentar o esterilizar muestras o reactivos qumicos.

De metal.

9.-Pera de decantacin

10.- Baln de base plana

11.- Mechero de alcohol o ron

12.- Mechero de bunsen

13.-Rejilla de asbesto

Es la encargada de repartir la temperatura de manera

De metal.
uniforme, cuando se calienta con un mechero. Para esto se

usa un trpode de laboratorio, ya que acta como un

sostenedor a la hora de experimentar.
14.-Cucharilla de combustin
Se utiliza para realizar pequeas combustiones de
sustancias, para observar el tipo de flama, reaccin, etc.

De metal.

Esta herramienta sirve para sujetar los tubos de ensayos,

mientras se calientan o se trabajan con ellos.

De madera.

Es un tubo cilndrico pequeo utilizado en la contencin de

muestras lquidas y tambin para calentarla , etc.

De vidrio.

15.-Pinza de madera

16.- Tubo de ensayo

17.- Matraz

18.-Luna de reloj

Recipiente de cristal donde se mezclan las soluciones

qumicas, generalmente de forma esfrica y con un cuello
De vidrio.
recto y estrecho, que se usa para contener lquidos; se usa
en los laboratorios.

Es un instrumento de laboratorio de qumica que se usa

para pesar sustancias solidas o desecar pequeas
cantidades en disolucin.

De porcelana.

Es una fina placa de cristal sobre el cual se disponen

objetos para su examen microscpico.

De vidrio.

19.-Portaobjetos

20.-Crisoles
El crisol de porcelana es un material de laboratorio utilizado
principalmente para calentar, fundir, quemar, y calcinar
De porcelana.
sustancias.

21.-Crisol con pico

Los crisoles se usan en el laboratorio de qumica para
hacer experimentos o reacciones que requieren de mucha
De porcelana.
temperatura, ya que los crisoles se pueden utilizar hasta en
temperaturas de 1000C.

22.-Mortero con piln

Se usa para moler o reducir el tamao de las sustancias.

De porcelana o vidrio.

23.-Gradilla

Es utilizada para sostener y almacenar gran cantidad

de tubos de ensayo, de todos los dimetros y formas.

24.-Pinza

De plstico, madera,
metal.

Las pinzas de laboratorio son un tipo de sujecin ajustable, generalmente de metal, que
forma parte del equipamiento de laboratorio, mediante la cual se pueden sustentar
diferentes objetos de vidrio (embudos de laboratorio, buretas...) o realizar montajes ms
elaborados (aparato de destilacin). Se sujetan mediante una doble nuez a un pie
De metal.
o soporte de laboratorio o, en caso de montajes ms complejos (lnea de Schlenk), a una
armadura o rejilla fija.
Metal, madera.

25.-Escobillas de cerdas
Segn el dimetro se utilizan luego de los experimentos
de fsica, qumica o pruebas de laboratorio para lavar: tubos De metal.
de ensayo, buretas, vasos de precipitado, erlenmeyer, etc...

26.-Tripode

Se utiliza cuando no se tiene el soporte universal para

sostener objetos con firmeza. Es ampliamente utilizado en
varios experimentos. La finalidad que cumple en el
laboratorio es solo una, ya que su principal uso es como
De metal.
herramienta de sostn a fin de evitar el movimiento. Sobre
la plataforma del trpode se coloca una malla metlica para
que la llama no d directamente sobre el vidrio y se difunda
mejor el calor.

27.-Balon con pico

Es un recipiente de vidrio de forma esfrica y cuello largo,
baln con un tubo lateral de desprendimiento. Dentro del
mismo, se coloca el sistema que se desea fraccionar en
fase lquida.

De vidrio.

Permite contener sustancias as tambin para calentar

sustancias sobre un trpode.

De vidrio.

28.-Balon de base circular

Equipos y/o aparatos de laboratorio

El espectrofotmetro

Uno de los instrumentos principales del laboratorio de biologa celular es el espectrofotmetro. Este instrumento tiene la capacidad de
proyectar un haz de luz monocromtica (de un largo de onda particular) a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es
absorbida por dicha muestra. Esto le permite al fisilogo realizar dos funciones:

1.
Nos da informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra. Esto podemos lograrlo midiendo la absorbancia (Abs) a
distintos largos de onda (l) y graficar estos valores en funcin del largo de onda, formando un espectrograma. Como cada sustancia
tiene unas propiedades espectrales nicas, distintas sustancias producen distintos espectrogramas. Esto se debe a que cada
sustancia tiene un arreglo de tomos tridimensional particular que hace que cada sustancia tenga caractersticas nicas. Al ser
expuestos a la luz del especrofotmetro, algunos electrones de los tomos que forman las molculas absorben energa entrando a
un estado alterado. Al recuperar su estado original, la energa absorbida es emitida en forma de fotones. Esa emisin de fotones es
distinta para cada sustancia, generando un patron particular, que vara con el largo de onda usado. Dependiendo del largo de onda,
ser la cantidad de energa absorbida por una sustancia, lo que logra generar un espectro particular al graficar Abs vs l
2.
Nos dice cuanta cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra. La concentracin es proporcional a la
absorbancia, segn la Ley Beer-Lambert: a mayor cantidad de molculas presentes en la muestra, mayor ser la cantidad de energa
absorbida por sus electrones.
Abs = K C L
Abs: absorbancia
K: coeficiente de extincin molar
C: concentracin
L: distancia que viaja la luz a traves de la muestra. (normalmente es de 1 cm)
La cuveta promedio, que guarda la muestra, tiene dimensiones internas de un centmetro (L). La ecuacin describe una lnea recta,
donde el origen es cero. Si L es constante (1.0 cm) y se conoce el valor de K, podemos calcular C en base a Abs:
Abs / K L = C
El espectrofotmetro mide la absorbancia de una muestra en los espectros de luz ultravioleta y visible (200 a 850 nm). El largo de
onda es determinado por un prisma que descompone el rayo de luz de acuerdo al largo de onda escogido. Luego la luz pasa por una
hendidura que determina la intensidad del haz. Este haz atraviesa la muestra y llega a un tubo fotogrfico, donde es medido. La
cantidad de luz que atraviesa la muestra es el porcentaje (%) de tramitancia. Podemos usar esta unidad o cambiarla a absorbancia
usando la siguiente ecuacin.
%T = - Log Abs.
El espectrofotmetro nos puede dar ambos valores a la misma vez, ahorrando la necesidad de hacer los clculos. (Tramitancia=
cantidad de luz que atravieza la mezcla).
Una caracterstica del instrumento es la necesidad de "blanquear" el aparato antes de cada lectura. Esto se hace colocando una
cuveta con una solucin control que tenga todos los componentes de la reaccin menos la sustancia que va a ser medida en el
instrumento y ajustando la lectura a cero absorbancia. El propsito de esto es eliminar el registro de absorbancia (background) que
puedan presentar los dems componentes de la reaccin a ese largo de onda particular. Todas las molculas presentan absorbancia
porque todas interfieren con el paso de la luz. Slo que la absorbancia ser ptima a un largo de onda de luz especfico para cada tipo
de sustancia.
Cubetas

Las cuvetas son unos viales de plstico transparente o cuarzo que dejan pasar la luz. Los mejores para trabajos de investigacin son
las de cuarzo porque su interferencia al paso de la luz es mnimo. Son ms costosas inicialmente pero bien tratadas pueden ser

reusables. Las de plstico vienen con distintas caractersticas. Por lo general son desechables, aunque pueden reusarse. El tipo de
cuveta plstica a usar depende del rango de luz en el que se van a analizar las muestras. Vienen unas para luz visible, que son las
ms econmicas, y otras para el rango de visible a ultravioleta. Estas son ms verstiles.
Ambos tipos de cuvetas deben manejarse con cuidado para evitar rallazos sobre la superficie por donde pasa la luz. Si la cuveta est
rallada, los rayos de luz que incidan en la zona se difractan y no pasan por la muestra, por lo que puede dar lecturas de absorbancia
errneas. Esto es especialmente crtico cuando queremos determinar concentracin en una muestra. Antes de tomar una lectura,
debemos observar que la cuveta no tenga rallazos ni est sucia. Si se ven marcas de polvo u otro tipo de sucio la cuveta debe
limpiarse con papel tis (Kimwipes). Si la cuveta se manipula mucho, debemos sostenerla usando papel tis para evitar pegarle los
aceites que normalmente tenemos en las manos. No debemos usar ningn otro tipo de papel para limpiar las cuvetas, puesto que
pueden soltar fibras que pudieran caer en la muestra o rallar la superficie.
Las cuvetas viene en distintos volmenes, desde 1 ml hasta 4 ml. El volumen a escoger depende de la cantidad de muestra
disponible. Si la muestra disponible es poca o difcil de conseguir, lo mejor es usar una cuveta de menor volumen para perder la menor
cantidad posible de la muestra. Por lo general, la muestra utilizada para hacer la lectura se pierde, sobre todo si es una sustancia bien
sensitiva, como el ADN.
Pipetas y pipeteadores

Usamos las pipetas para medir volmenes de lquidos de forma ms precisa que con una probeta. Y son
ms verstiles, sobre todo al manejar volmenes pequeos.
Las pipetas de bulbo son tiles para medir volmenes que no requieren de mucha presicin. Antes se
usaban pipetas "Pasteur" de cristal a las que se les aditaba un bulbo de goma que se usaba para
succionar el lquido. Ahora vienen en plstico desechable de una sola pieza y se consiguen con o sin
calibracin.
Las pipetas volumtricas vienen en distintos tamaos, desde 1 ml hasta 200 ml, y con distintas formas,
de acuerdo al uso que se les d. Tambin vienen en distintos materiales como borosilicato y plstico,
desechables o reusables, estriles o sin esterilizar. Algunas pueden ser esterilizadas en horno o
autoclave. Para llenarlas se pueden usar bulbos de caucho, bombas manuales o elctricas, o equipos
de llenado. Las bombas elctricas y los equipos de llenado son muy tiles si se est trabajando con
mltiples muestras, pues minimizan la fatiga del tcnico.
Las micropipetas son extremadamente tiles en los laboratorios de biotecnologa. Estas permiten medir con presicin volmenes tan
pequeos como 0.1 l hasta 1 ml. Estas requieren de unos pipeteadores especiales que deben der tratados con mucho cuidado para
evitar que se descalibren. Los pipeteadores vienen de distintos tipos. La mayora pueden servir muestras individuales. Pero vienen los
que pueden servir muestras mltiples, por medio de multicanales: pipetas que sirven 8 o 12 muestras a la vez. Estas son muy tiles al
hacer pruebas de ELISA, donde se practican diluciones seriadas multiples, o para preparar reacciones de varias muestras distintas a
la vez. Se usan en conjunto con platos de fosas mltiples.
Las puntas de micropipetas vienen con distintas caractersticas de acuerdo al uso que se les d. Vienen con punta ancha, estrecha o
aplanada, con o sin filtros contra aerosoles, estriles o sin esterilizar y pueden ser esterilizadas en autoclave.
Aparatos de electroforesis
Estos son unas cmaras que contienen un circuito elctrico expuesto a un lquido electroltico, llamado amortiguador. El aparato se
usa para separar mezclas de molculas grandes de acuerdo a su carga y/o su tamao. La tcnica consiste en inocular la muestra en
un medio semislido, la fase estacionaria, que se somete a un campo elctrico, en una cmara donde en un extremo se encuentra un
filamento que acta como polo positivo, y en el extremo opuesto hay otro filamento formando el polo negativo. Las molculas con
cargas netas positivas se movern hacia el polo negativo y las de carga negativa se irn hacia el polo positivo. Luego de la muestra
ser tratada apropiadamente dependiendo del tipo de electroforesis, las molculas que viajen hacia uno de los polos se separarn por
tamao, viajando ms en la fase estacionaria las molculas ms pequeas. El tipo y concentracin de la fase estacionaria depender
del tipo de molculas que nos interesa correr.
Centrfugas
Son muy tiles para precipitar clulas y molculas. Vienen en distintos tamaos y con distintas capacidades en el manejo de muestras.
Este aparato somete la muestra a fuerzas de aceleracin que obligan a las molculas a concentrarse en el fondo del envase utilizado,

separndolas del medio en que se encuentran. Incluso, bajo ciertos mtodos se puede generar un gradiente de concentraciones
dentro del mismo tubo, separando distintas molculas a distintos niveles o fases dentro del tubo. Con ayuda de jeringas, se puede
perforar la pared del tubo y extraer del mismo slo aquella fase donde se encuentren las molculas de inters.
Entre las centrfugas que usaremos durante el semestre estn la centrfuga refrigerada, que nos va a permitir separar clulas de
los medios de cultivo. El rotor de esta centrifuga puede sostener tubos de 50 ml, pero puede
ser intercambiado por rotores que sostienen botellas de cultivo.
La microcentrfuga es una versin ms pequea de la descrita anteriormente. Es compacta,
se coloca sobre la mesa y procesa muestras de hasta 2 ml. Es muy til para precipitar ADN y
otras sustancias que se trabajan en volmenes pequeos.

Equipo de cromatografa
Haremos varias cromatografias al final del semestre. En una cromatografa buscamos separar
uno o varios tipos de molculas, relativamentre pequeas, de una mezcla de sustancias o para purificar
muestras. Existen varios tipos de cromatografas. La que se utilice depender del tipo de molculas que
buscamos aislar.
La cromatografa de capa fina es ideal para separar muestras pequeas. Presenta dos componentes: una fase estacionaria y una fase
mvil. La fase estacionaria consiste de una placa de vidrio o celulosa impregnada con polvo de silicato (vidrio molido extremadamente
fino). Las muestras se colocan a un centmetro del borde inferior y se coloca en un tanque de revelado que contiene algun tipo de
solvente en el fondo. La placa se coloca de forma que el solvente no toque directamente las muestras. La fase mvil consiste del
solvente. El solvente a usarse depender de las propiedades qumicas de los componentes de la mezcla.
El solvente sube por capilaridad por la superficie impregnada con las muestras. Los componentes de la mezcla comenzarn a migrar,
segn el grado de afinidad que tengan por el solvente y/o la fase estacionaria. Mientras ms afn sea algn componente a la fase
mvil, ms rpido se mover y ms lejos llegar en su migracin sobre la fase estacionaria.
En la cromatografa de columna se pueden separar volmenes ms grandes de muestras. Tambien tiene una fase estacionaria que
consiste de un tubo conteniendo un material que separa la mezcla analizada. Los amortiguadores que se usan para lavar la columna
constituyen la fase mvil.
El empaque de las columnas puede separar molculas por su tamao, por sus interacciones inicas o por interacciones hidrofbicas.
El tipo de empaque a usar depender de las propiedades de la muestra.
Existen otros tipos de cromatografa ms sofisticados, que se usan en laboratorios de investigacin y en procesos de manufactura en
varios tipos de industrias. Nosotros nos limitaremos a los descritos anteriormente.

Microscopio
El microscopio
Es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo ms comn y el
primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento ptico que contiene dos o ms lentes que permiten
obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin. La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando este
instrumento se llama microscopa.
Etiquetas para colocar a los reactivos
La pureza de los reactivos es fundamental para la exactitud que se obtiene en cualquier
anlisis. En el laboratorio se dispone de distintos tipos de reactivos (slidos, lquidos o
disoluciones preparadas) tal y como se comercializan.

Reactivos slidos

Reactivos lquidos

Disoluciones preparadas

En general, las casas comerciales ofrecen un mismo producto con varias calidades. Es importante que cuando seleccionemos un
reactivo su calidad est en concordancia con el uso que se le va a dar.
2.1. Clasificacin
En el laboratorio de anlisis se utilizan reactivos de calidad analtica que se producen comercialmente con un alto grado de pureza. En
las etiquetas de los frascos se relacionan los lmites mximos de impurezas permitidas por las especificaciones para la calidad del
reactivo o los resultados del anlisis para las distintas impurezas. Dentro de los reactivos analticos pueden distinguirse tres calidades
distintas:
Reactivos para anlisis (PA): Son aquellos cuyo contenido en impurezas no rebasa el nmero mnimo de sustancias determinables
por el mtodo que se utilice.
Reactivos pursimos: Son reactivos con un mayor grado de pureza que los reactivos "para anlisis" .
Reactivos especiales: Son reactivos con calidades especficas para algunas tcnicas analticas, como cromatografa lquida (HPLC),
espectrofotometra (UV)
Hay reactivos que tienen caractersticas y usos especficos como los reactivos calidad patrn primario, que se emplean en las tcnicas
volumtricas, o los patrones de referencia.
2.2. Etiquetado de los reactivos
Todo envase de reactivos debe llevar obligatoriamente, de manera legible e indeleble, una etiqueta bien visible que contenga las
distintas indicaciones que se muestran en las siguientes figuras:
Etiqueta para un reactivo slido

Etiqueta para un reactivo lquido

Los pictogramas, las frases R de RIESGO y las frases S de SEGURIDAD aparecen en las etiquetas del producto informando sobre la
peligrosidad del mismo
PICTOGRAMAS DE PELIGROSIDAD

Reglas y normas de laboratorio

I. PARA INGRESAR AL LABORATORIO.

Revise los antecedentes conceptuales y el protocolo de trabajo experimental correspondiente a la sesin previa al inicio de la
misma.

Llegue puntualmente a la sesin. Es sumamente importante aprovechar el tiempo disponible para el trabajo en el laboratorio.
Si llega tarde, reprtese inmediatamente con el Profesor responsable.
Use zapatos cerrados, de piso y con suela antiderrapante. Use pantaln largo o falda mediana de fibra natural. Retrese todos
los accesorios personales que puedan comprender riesgos de accidentes mecnicos, qumicos o por fuego, como son anillos,
pulseras, collares y sombreros. Si usa corbata, sujtela con un pisacorbatas o introducindola a la camisa. Evite peinados con
copetes; si usa copete o cabello largo, recjalo y colquese el protector facial, gorro o escafandra. Evite usar mangas largas y anchas;
en caso de usar manga larga y ancha, cbrala y sujtela completamente con las mangas de la bata. Evite el uso de lentes de contacto;
use anteojos. Mantenga las uas recortadas y limpias.
Use la bata cerrada durante toda la sesin y el protector facial, los monogogles, guantes y respirador en su caso. Colquese
la credencial a modo de gafete. Indique en la credencial su tipo sanguneo e informe de alergias, padecimientos crnicos o uso de
prtesis.
Porte la bitcora de laboratorio. Esta debe contener la informacin sobre los reactivos y los clculos para preparar las
soluciones que sern empleadas en la sesin. Tambin debe contar con los telfonos de emergencia y con una tabla de los primeros
auxilios, as como de las medidas de contingencia qumica ms comunes. Asimismo, incorpore el protocolo del trabajo experimental y
la Lista de Seguridad. Revise las medidas y el equipo de seguridad en el laboratorio.
Recoja con prontitud el material y los equipos para el trabajo correspondiente. Se debe revisar el estado de la mesa de
trabajo, del material y de los equipos recibidos. Reporte cualquier falla o irregularidad al Tcnico responsable del laboratorio. El
material se debe lavar y secar antes de ser usado. Consulte con el Profesor y con el Tcnico responsable y revise la existencia de los
reactivos a utilizar.
Cuente con el material de uso personal que se enlista abajo para cada sesin experimental.
II. PARA PERMANECER EN EL LABORATORIO.
Siga las medidas de seguridad necesarias con los equipos, materiales y reactivos de la sesin para prevenir accidentes. Esto
incluye a los bancos de trabajo; stos deben permanecer colocados bajo las mesas o junto a stas o a las paredes.
Tome slo las cantidades de reactivos necesarios para el trabajo experimental y colquelas en material de vidrio limpio y
seco. Etiquete y rotule todos los recipientes donde coloque reactivos, productos y residuos. Siga las medidas de contingencia y
mitigacin en caso de accidente.
Mantenga slo el material requerido para la sesin sobre la mesa de trabajo. Los frascos de reactivos deben permanecer en
las campanas. Los dems objetos personales o innecesarios deben guardarse o colocarse lejos del rea de trabajo.
No ingiera alimentos ni bebidas en el interior del laboratorio, a menos que lo indique el protocolo.
No fume en el interior del laboratorio. Todas las fuentes de fuego o calor deben estar controladas.
No reciba visitas en el interior del laboratorio. Evite las distracciones. As puede evitar accidentes.
Informe al Profesor responsable cuando le sea necesario salir del laboratorio durante la sesin. Reprtese al reincorporarse.
III. AL CONCLUIR LA SESION.
Disponga de los residuos y de los reactivos no utilizados de la manera indicada por las normas. Consulte la Lista de
Seguridad del Laboratorio. Los reactivos no usados no se devuelven a los frascos. Los frascos de reactivos puros deben regresarse
al almacn.
Lave el material y devulvalo limpio y seco. Retire las etiquetas de los materiales que contenan reactivos, productos o
residuos. Realice la entrega en orden y esperando su turno.
Deje limpio y seco el lugar de trabajo. Coloque los bancos junto a las mesas o invertidos sobre stas.
Antes de salir del laboratorio retrese la bata y dems equipo de seguridad y gurdelo en una bolsa de plstico exclusiva para
este uso. Los filtros del respirador se guardan en un recipiente hermtico. La bata y los guantes deber lavarse al final de cada sesin.
MATERIAL PERSONAL COTIDIANO OBLIGATORIO.

Bata larga (a la rodilla o pantorrilla) de algodn 100% y manga larga, con botones. Se recomienda que sea blanca.
Monogogles incoloros sin ventilacin o con trampas.
Anteojos neutros de seguridad de policarbonato o vidrio endurecido con proteccin lateral.
Protector facial transparente de 20 cm de largo.
Guantes de ltex para manejar cidos dbiles y cetonas.
Guantes de PVC para manejar cidos y bases dbiles.
Guantes de neopreno para manejar cidos y solventes alifticos.
Guantes de nitrilo para manejar solventes y derivados orgnicos.
Guantes trmicos de algodn o asbesto (para materiales calientes y fros).
Respirador con filtros para: a) Vapores orgnicos y gases cidos (cdigo amarillo). b) Vapores orgnicos (cdigo negro). c)
Amoniaco y alcalinos (cdigo verde obscuro). d) Humos (cdigo violeta).
Escobillones de varios tamaos.
Fibra verde.
Detergente bajo en fosfatos.
Encendedor para mechero y/o cerillos.
Franela de algodn limpia.
Cinta para encubrir (masking tape) de 1.27 cm de ancho.
Toallas absorbentes de papel.
Rollo de papel higinico blanco o caja de pauelos desechables blancos.
Rollo de papel aluminio.
Marcador indeleble, preferentemente negro.
Tijeras rectas.
Percolador de 8 cm de dimetro.
Embudo de plstico de 8 cm de dimetro.
Importancia del laboratorio