Cuantificacion de Colesterol

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Universidad Autnoma de

Ciudad Jurez
Instituto de Ciencias
Biomdicas
Programa de Medico
Cirujano
Laboratorio de Bioqumica General

Practica #9:
Cuantificacin de Colesterol
Guillermo A. Rascn Castrejn
Matricula: 126054
Grupo: 3:00pm-5:00pm
30 de abril de 2014

Introduccin:
Qumicamente el colesterol es un compuesto cclico con estructura bsica de
perhidrofenantreno con un total de 27 carbones, un radical OH en el carbono 3 y
un doble enlace entre los carbonos 5 y 6.
El colesterol existe en dos formas: como colesterol libre en muy pequeas
cantidades y como colesterol esterificado mediante la unin de un cido graso no
saturado de cadena media al carbono 3. Este tipo de colesterol es el ms
frecuente tanto en sangre como en tejidos
El colesterol es el principal esterol del organismo humano. Los esteroles son un
tipo de grasas naturales presentes en el organismo. El colesterol se encuentra en
nuestro cuerpo formando parte de membranas celulares, lipoprotenas, cidos
biliares y hormonas esteroideas.
El principal trastorno que provoca el colesterol en el organismo cuando se
encuentra en exceso lo constituye la produccin de depsitos de grasas en
arterias vitales, causando aterosclerosis, accidente cerebrovascular y enfermedad
vascular perifrica. El colesterol es tambin un importante constituyente de los
clculos biliares
La medicin de solamente el colesterol total tiene valor limitado. Sin embargo
cuando se mide en conjunto con las diferentes lipoprotenas sobre todo el
colesterol LDL y el colesterol HDL ofrece un panorama ms amplio sobre la
probabilidad de produccin de ateroma y por lo tanto de riesgo de enfermedades
de las arterias coronarias.
Los niveles normales en sangre de colesterol varan con la poblacin y suelen
aumentar con la edad. Por eso, aunque en grasas sanguneas se puede hablar de
niveles normales es mejor utilizar los niveles recomendables ya que estos s nos
indican riesgo de aterosclerosis.

Colesterol total en sangre (mg/dl)


Niveles segn riesgo
Nivel deseable

< 200

Lmite alto

200-239

Alto

240

Objetivo:
Determinar la concentracin de colesterol srico y analizar las implicaciones
clnicas de niveles anormales de colesterol.

Materiales y reactivos:
- 1 gradilla
- 5 Tubos de ensaye
- Pipetas
- Pro pipetas
- Micro pipeta
- Agua destilada
- Colesterol
- Suero
-5 celdillas
-3 muestras de sangre
-Centrifugadora
-Espectrofotmetro

Metodologa:

Se comenz por obtener tres muestras de sangre diferentes en tres personas, al


obtenerlas se colocaron en la mquina de centrifugacin para lograr obtener el
suero que se necesit, se midi 2.5ml del reactivo de colesterol y se deposit en el
tubo #1 etiquetada como blanco, tubo #2 etiquetada como estndar, tubo #3
etiquetada como Muestra problema 1, tubo #4 etiquetada como muestra problema
2, y tubo # 5 etiquetada como muestra problema 3, enseguida se midi
2.5microlitros de agua para depositarlo en el tubo #1, 2.5 micro litros de solucin
estndar en el tubo #2, 2.5 micro litros de suero en el tubo # 3 , 2.5 micro litros de
suero en el tubo #4, y por ultimo 2.5 micro litros de suero en el tubo #5. Al terminar
se pasaron a incubar a temperatura de 37C por 5 minutos, seguido se depositaron
en 5 cedillas distintas, y proseguir para leerlas en el espectrofotmetro a
505nanometros. Al obtener los resultados se utiliz la siguiente frmula para medir
el colesterol en cada muestra de colesterol:
Colesterol = (Absorbancias problema) / (Absorbancias estandar) x [ ] Estandar.

Tabla 1.1 Pasos a seguir en la cuantificacin de colesterol:

Reactivo:

Colesterol
Agua
Suero
Estndar

Tubo #1
Blanco
2.5ml
2.5mc
-

Tubo #2
Estndar

Tubo # 3
Tubo #4
Muestra
Muestra
problema 1 problema 2
2.5ml
2.5ml
2.5ml
2.5mc
2.5mc
2.5mc
Incubar a 37C por 5 minutos
Leer a 505nm

Resultados de cuantificacion de colesterol:

Tubo #5
Muestra
problema 3
2.5ml
2.5mc
-

Celdillas antes de meter al espectrofotmetro:


De Izquierda a Derecha. Tubo #1 (Blanco), Tubo #2 (estndar), Tubo #3 ( Muestra P1
Normal), (Muestra P1 Hemolizada) .

Muestras de izquierda a derecha, Muestra Hemolizada, Muestra Normal.

Resultados de cuantificacion de colesterol:

Colesterol = (Absorbancia problema) / (Absorbancia estandar) x [ ]


Estandar.

[ ] Estndar = 157.5 mg/dl

Lecturas espectrofotmetro:
1.- Blanco = 0
2.- Absorbancia Estndar = 347
3.- Absorbancia Muestra problema 1 (hemolizada) = 269
4.- Absorbancia Muestra problema 1 Extra (normal) = 402

Colesterol MP1 (hemolizada) = 269 / 347 = 0.77 x 157.5 = 121.275


mg/dl
Colesterol MP1 Extra (normal) = 402 / 347 = 1.15 x 157.5 = 181.125
mg/dl
Colesterol MP2 = 118.76 mg/dl
Colesterol MP3 = 146.01 mg/dl

Discusin:

En esta prctica logramos obtener los resultados de concentracin de colesterol


en la sangre, investigando encontramos que los niveles deseables de colesterol en
sangre deben estn por debajo de los 200mg/dl en base a esto analizamos en la
muestra problema #1 normal obtuvimos un valor final de 181.125 mg/dl, en la
muestra problema # 2 obtuvimos un valor de 118.76 mg/dl y en la muestra
problema #3 un valor de 146.01 mg/dl, en base a los valores normales ya
establecidos concluimos que los valores obtenidos de colesterol se encuentran
dentro del rango, y no se corre riesgo alguno de alguna enfermedad coronaria,
mientras elaborbamos nuestra practica nos encontramos con un dato curioso, la
muestra problema #1 la elaboramos dos veces, una con el nombre de muestra
normal y la otra con muestra hemolizada a pesar de que la muestra de sangre
fue tomada correctamente lo que ocurri aqu fue que la muestra sali hemolizada
debido a que la persona contaba con bajas plaquetas entonces al momento de
hacer la centrifugacin algunos eritrocitos perdieron su estructura y sali de color
rojizo, en vez de ser color amarillento los valores de esta no fueron afectados sus
valores fueron 121.275 mg/dl, valores dentro del rango. En la importancia
biomdica sobre el colesterol, es muy importante cuidar los mbitos alimenticios, y
llevar una vida saludable, ya que el no llevarlos a cabo aumenta el riesgo de
contraer enfermedades cardiovasculares, dentro del colesterol contamos con
colesterol LDL (Baja densidad) y HDL (alta densidad) el colesterol de baja
densidad es el colesterol el cual llamamos malo debido a que este en altas
cantidades en el torrente sanguneo se acumula y es absorbido por la capa intima
de las arterias pequeas formando una placa de ateroma, patolgicamente a esto
se le llama arteriosclerosis, si los niveles de colesterol LDL no son tratados con
frmacos como estatinas, resinas y fibratos, llega un lmite en el cual la capa
intima de la arteria se rompe y se fragmenta un trozo de placa de ateroma y se
convierte en un embolo, el cual puede llegar a viajar por el torrente sanguneo y
obstruir un cierto punto y causar un infarto al miocardio.

Conclusin:

El objetivo se llev acabo debido a que logramos obtener la experiencia de saber


cuantificar los niveles de colesterol en sangre y las consecuencias de un mal tratamiento
ante este tipo de enfermedades como la hipercolesterolemia.

Bibliografa:

1.- http://www.geosalud.com/Nutricion/colesterol.htm

2.http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/patientinstructions/00
0314.htm
3.http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/esp_imagepages/1919
0.htm

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