Secrecion Extoracion PDF

MANUAL TOMA DE MUESTRA BACTERIOLOGICA
SCR LABORATORIO CLINICO

ARICA, DICIEMBRE 2011

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SERVICIO DE SALUD
ARICA Y PARINACOTA
HOSPITAL EN REGIONAL
DR. JUAN NOE CREVANI
CR APOYO DIAGNOSTICO

SGC HJNC AD LAB D N 001
Fecha Ultima Revisin: Diciembre 2011
Prxima Revisin: Diciembre 2013
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TOMA MUESTRA
BACTERIOLOGICA

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I N D I C E

Pgina

Introduccin
3
Procedimiento toma muestra
4
Informacin general
6
Transporte muestra
7
Instructivo toma muestra
8
Muestra orina: Urocultivo
9
Muestra Hemocultivos
11
Muestra deposicin: Coprocultivo
13
Secrecin rectal
14
Muestra Tracto Respiratorio Superior
15
Muestra Tracto Respiratorio Inferior
17
Muestra Tracto Genital Femenino
20
Secrecin Uretral
22
Muestra Directa Flujo Vaginal y Uretral
23
Muestra Herida y Ulceras
24
Muestra Lquidos Cavidades Cerradas 26
Muestra Secrecin tica
27
Muestra Secrecin Ocular
28
Toma muestras Virales
29
Muestra Anaerobias
29
Anexos
31
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INTRODUCCION

Dada la importancia vital y clave que juega el Laboratorio Clnico en el diagnstico
de la medicina moderna y enmarcado en la gestin de calidad que adopte dicha UNIDAD,
EL Jefe de Laboratorio abajo firmante y el equipo de Tecnlogos Mdicos de la seccin
Bacteriologa, se complacen en proporcionar la presente actualizacin del Manual de
Toma Muestras Bacteriolgicas.

Dentro de la Calidad de un resultado bacteriolgico, es muy importante considerar
la etapa pre-analtica de l, por lo tanto este Manual tiene como objetivo principal
minimizar al mximo el error en la toma de la muestra, ya que es imposible conseguir
un buen resultado desde una muestra deficiente

TM. LIC. RICARDO ZEPEDA BARRIOS
JEFE LABORATORIO CLINICO

ARICA, DICIEMBRE 2011

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PROCEDIMIENTO TOMA MUESTRA

1. OBJETIVO: Obtener muestras de buena calidad con el propsito de contribuir en la
eficiencia diagnstica para apoyar y orientar al mdico clnico en el tratamiento del
paciente.

2. CAMPO DE APLICACIN:A todas las muestras para diagnstico bacteriolgico.

3. FUNDAMENTO: No aplica.

4. REFERENCIA: Nch 2547 of 2003 Requisitos particulares para la calidad y
competencia de Laboratorios Clnicos (etapa Pre-analtica. Cap. 5.4).

5. TERMINOLOGIA:
Estudio Microbiolgico: Comprende examen directo, cultivo y en aquellos
agentes etiolgicos que se justifica el antibiograma
Cultivo: Es el crecimiento in Vitro de bacterias en medios de cultivos lquidos y
slidos, lo que permite el aislamiento del agente etiolgico y su identificacin
posterior
Cary Blair: Medio de transporte para deposicin (tubo tapa roja)
Stuart: Medio de transporte para estudio de bacterias aerobias en todo tipo de
muestras (tubo tapa azul)
Thayer Martin: Medio de cultivo selectivo para Neisserias patgenas
UFC : unidad formadora de colonias.

6. DESARROLLO: El Centro de Responsabilidad (CR) de Laboratorio Clnico entregar
a todos los CR Clnicos, de Especialidades, Servicio de Atencin Primaria (Sermus) y
Gendarmera:
Medios de transporte Stuart
Medios de transporte Cary Blair
Medios de transporte para anaerobios Portagerm
Tubos cnicos individuales tapa rosca estriles
Frascos estriles de 60 ml.
Frascos de hemocultivos adultos, peditricos y neonatales.

Todas las muestras que lleguen al Servicio de Laboratorio Clnico deben ser tomadas
segn Instructivos del Manual de toma muestra.
Las muestras deben venir debidamente rotulada y su orden de solicitud de
examen con todos los datos que el Servicio de Laboratorio solicite: nombre
completo, servicio. Edad, fecha de nacimiento, carn de identidad, diagnstico,
tipo de muestra, fecha de obtencin de la muestra
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Las muestras deben entregarse en recepcin de 8.00 hrs. AM a 9,30 hrs. AM

7. REGISTROS:
Formulario solicitud de examen
Registro de persona responsable de la toma de muestra e indicaciones al
paciente

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INFORMACION GENERAL

UBICACIN DEL LABORATORIO Hospital Regional de Arica Dr. Juan No Crevani
Seccin Bacteriologa
18 Septiembre 1000
Primer piso Telfonos 204618 (19)
584618 (19)

HORARIO DE RECEPCION DE MUESTRAS Y ENTREGA DE RESULTADOS

1.- Servicios Clnicos

Lunes a Viernes 8:00 a 16:00 hrs.
Sbado, Domingo 9:00 a 12:00 hrs
y Festivo

Fuera de estos horarios, las muestras que no sean tomadas en medios de transporte se
recibirn en el Laboratorio de Urgencia y las muestras que sean tomadas en medio de
transporte quedarn en el Servicio que lo solicita y se traer al da siguiente al Servicio
Laboratorio Clnico (lunes a domingo)

2.-CONSULTORIOS DE ESPECIALIDADES, SERMUS, INSTITUCIONES

Lunes a Jueves 8:00 a 10:00 hrs.
13:30 a 14:30 hrs. Servicio UNACESS.

PLAZO ENTREGA DE RESULTADO EXAMENES

Urocultivos 24 horas si es negativo y 48 a 72 horas si es positivo
Cultivos en general: 48 a 72 horas
Hemocultivos: Informacin positivo: en el momento que aparezca la
positividad.
Informacin final a los 5 das de incubacin
Coprocultivos: 48 a 72 horas
Anaerobios: 7 das

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TRANSPORTE DE MUESTRAS

OBJETIVO: Proteger la muestra, a la persona que la transporta, a la que la recibe y al
medio ambiente

MATERIALES:
Contenedor plstico
Refrigerantes

DESARROLLO:

Tomada la muestra debe ser enviada de inmediato, ya que 1 a 2 horas de retraso en la
siembra favorece la prdida de viabilidad de los patgenos ms fastidiosos.
Las muestras de orinas debe mantenerse REFRIGERADA a 4C hasta su traslado, si su
traslado no es posible de inmediato.
Las muestras con medio de transporte deben permanecer a temperatura ambiente. Hasta
su traslado al laboratorio. Plazo mximo 24 horas.

Las muestras bacteriolgicas deben venir en contenedor plstico o metlico que
sea de tamao apropiado para colocar los tubos de las muestras especialmente si
stas son lquidas.
Esta gradilla o contenedor se colocar dentro de una caja plstica de tapa
hermtica. Llevar al Laboratorio con su respectiva orden.
Las muestras de orinas aspticas, se transportarn en contenedor plstico con
refrigerantes

Muestras de orinas tomadas en la Seccin Toma de muestra del CAE:(slo nios(as)
menores de 10 aos)

Condiciones del lugar
Debe contar con bao, insumos para higienizacin de manos, ducha telfono para
lavado genital en nios, camilla peditrica.
La Tcnico Paramdico encargada de la toma de muestra de orinas a menores de
10 aos, debe colocar la muestra en un contenedor plstico que tenga
refrigerantes.
Tomar las muestras a todos los menores citados en el da.
Debe efectuarse higienizacin de manos entre cada paciente
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Cuando estn tomadas todas las muestras, debe llamar a la Tcnico Paramdico
de la Seccin Bacteriologa para trasladar las muestras al Servicio de Laboratorio
Clnico con su orden respectiva.

INSTRUCTIVO TOMA MUESTRA BACTERIOLOGICAS

OBJETIVO:

Obtener una muestra no contaminada, para aislar agentes etiolgicos de una probable
infeccin, a fin de apoyar al mdico clnico en la confirmacin diagnstica y orientar el uso
racional de antimicrobiano cuando se decide indicar terapia

RESPONSABILIDADES:

Responsable de la indicacin: Mdico tratante, de turno o residente.
Matronas pueden solicitar urocultivos, cultivo endocervical y cultivos de flujo vaginal.
Baciloscopas pueden ser solicitadas por cualquier miembro del equipo de salud

Responsable de ejecutar el procedimiento de la toma muestra: Enfermera,
Matrona, Tcnico paramdico de los CR, de CAE y Extra sistema, segn la presente
normativa

Responsabilidad del encargado Tecnlogo Mdico de la Seccin Bacteriologa:
revisar calidad de la muestra, y efectuar todo el proceso para llegar a diagnstico
bacteriolgico y efectuar las modificaciones a este manual cuando corresponda.

Responsable del monitoreo y evaluacin Tecnlogo Mdico encargado de
Calidades responsable de efectuar monitoreo de los indicadores. Oficina de Calidad
es responsable de supervisar el cumplimiento del monitoreo.

PROTECCIN DEL PERSONAL

El personal que transporta muestras microbiolgicas debe manipularlas siempre con
guantes de procedimiento y transportarlas en envase hermtico, segn lo indicado en
puntos anteriores
Debe evitar el contacto de las muestras con el medio ambiente mientras realiza el
traslado.
Los envases se esterilizan y se desechan en laboratorio.

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MUESTRA DE ORINA: UROCULTIVOS

Responsable de tomar la muestra: Enfermera, Matrona. En CAE, TPM

Tipo de tcnica: limpia

MATERIALES:
Trulas de algodn para aseo y jabn.
Toalla de papel.
Guantes de procedimiento.
Bolsa de polietileno para desecho.
Envase plstico estril con tapa rosca.
Una chata.
Frascos estriles
Recolector peditrico de orina.

DESARROLLO:
Explicar lo que se le va a hacer al paciente.
Acostar al paciente decbito dorsal y piernas flectadas y separadas.
Lavarse las manos.
Colocarse los guantes de procedimiento.
Realizar aseo perineal prolijo, separando los labios con tcnica de arrastre desde
arriba hacia abajo en los pacientes mujeres y retrayendo el prepucio hacia atrs en
los hombres. Se usa una trula cada vez.
Repetir esta tcnica las veces que sea necesario. Elimine las trulas en las bolsas
de polietileno.
Enjuague con agua corriente.
Hacer orinar al paciente en la chata, eliminar el primer chorro y en la mitad de la
miccin recibir la orina en el envase plstico estril, mnimo 10 ml.
Cerrar el envase evitando contacto con los dedos, genitales externos o ropas.
Rotular la muestra con nombre completo, servicio, tipo muestra y su orden
correspondiente.
Lavarse las manos
Enviar al laboratorio.

Con el objeto de no alterar el recuento bacteriano la muestra debe ser sembrada
dentro de las primeras dos horas de tomada. Por lo tanto si no es enviada de
inmediato al Laboratorio, sta debe mantenerse refrigerada a 4 C y ser trasladada a esta
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temperatura (con cadena de fro). En estas condiciones puede mantenerse hasta 24
horas.

Toma de muestra orina a lactantes:
Realice aseo prolijo como se describi anteriormente
Seque con trulas estriles la zona pubiana.
Coloque recolector de orina peditrico.
Si el paciente en media hora NO ha orinado, cambiar el recolector.
Recolecte la orina, sellar, rotular con nombre completo, servicio, tipo muestra, hora
de la toma de muestra y orden correspondiente.
Enve al laboratorio.

Catter urinario permanente:
En lo posible el catter debe estar recientemente instalado previo a la toma de muestra,
ya que estos se colonizan a las 48 horas siendo los microorganismos aislados no
necesariamente el agente causal de la infeccin. Se debe registrar en la orden de examen
que la muestra fue tomada a travs del catter.
Desinfecte el sitio de puncin en tercio proximal del catter urinario permanente,
puncionar en un ngulo de 30, aspirar muestra con Tcnica Asptica
Vaciar3 a 5 ml en un tubo o frasco estril y transportarla en la misma forma que la
muestra miccional.
No se debe obtener la muestra de la bolsa recolectora ni cultivar los catteres
urinarios.

Muestra por puncin suprapbica:
Este procedimiento lo realiza el mdico pediatra, procedimiento con tcnica asptica. Es
el mtodo de referencia en el diagnstico de infeccin urinaria, dado que evita la
contaminacin con flora uretral .Es un mtodo invasor, por lo que se utiliza slo en casos
en que las tcnicas de rutina han fracasado.
Desinfectar la piel en el sitio de puncin, aspirar con Tcnica Asptica entre 3 a 5 ml de
orina y ponerlos en frasco estril.

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MUESTRA PARA HEMOCULTIVOS

RECOMENDACIONES GENERALES:

El momento de la toma de muestra depender del cuadro clnico que se quiera confirmar.
Se recomienda tomar las muestras antes de iniciar el tratamiento antibitico.
La tcnica debe ser practicada por personal entrenado, previo lavado clnico de manos y
antisepsia de la piel con alcohol 70%.

FACTORES CRTICOS EN EL RENDIMIENTO:

1. Volumen de sangre
2. Mtodo de desinfeccin de la piel
3. Nmero de muestras
4. Momento de la toma de la muestra

MOMENTO DE LA TOMA DE MUESTRA:

En bacteremias permanentes En cualquier momento
Bacteremia intermitente o sepsis de
origen extravascular
*Antes o durante los escalofros.
* Rama ascendente de la curva febril
Si el paciente est con antibitico
Tomar la muestra lo ms alejada de
la ltima dosis de tratamiento
antibitico.
Bacteremias asociadas al uso de catteres: tomar muestra en vena perifrica
Si se toma a travs del catter o se enva a cultivo la punta del catter, siempre
deben ir pareadas con otra muestra de vena perifrica, por la colonizacin de
los catteres presente a las 48 h de instalado.

MATERIALES:

Frascos de hemocultivo de 30 ml.= adultos.
20 ml = peditrico y neonatal.
Antispticos.
Trulas de algodn.
Jeringas.
Agujas estriles.
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Jabn antisptico.
Alcohol 70%.
Ligadura de goma.

Volumen de la muestra:
Adultos : 5 a 10 ml de sangre (30ml de caldo).
Peditrico y neonatal: 1 a 3 ml de sangre (20ml de caldo).

Cantidad de muestras a tomar:
2 muestras de sangre tomadas en intervalos de 1/2 hora .de diferentes sitio
anatmico
En endocarditis infecciosa tomar 6 muestras de sangre de diferentes sitios de
puncin
Con relacin a los intervalos no existe consenso, sin embargo se recomienda 30
minutos entre cada extraccin y en lo posible extraer de diferentes sitios
anatmicos.
Se recomienda mantener una proporcin sangre/caldo de cultivo de 1/10, que
permite neutralizar las propiedades bactericidas de la sangre y de los agentes
antimicrobianos que puedan estar presentes en la muestra.

DESARROLLO:

PREPARACIN DE LA PIEL:

Tcnico Paramdico: Lavado clnico de manos. Uso de guantes de procedimiento

El Tcnico paramdico prepara la piel del paciente
Lava el rea de puncin elegida con agua y jabn
Enjuaga con agua estril y seca con apsito estril.
Frota la zona en forma concntrica comenzando por el centro, con alcohol al 70%
durante 30 seg. Repetir la operacin con Clorhexidina y dejar actuar hasta que se
seque
Desinfecta la tapa del frasco de hemocultivo con alcohol

Enfermera Clnica: Higienizacin de manos con clorhexidina alcohlica. Si no cuenta con
ella: lavado con jabn antisptico
Ponerse guantes estriles.
Seleccionar la vena perifrica de ms fcil acceso al paciente.
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Punciona la vena
Aspira el volumen indicado.
Retira la jeringa y presiona con trula estril y coloca un sello estril.
Retira con pinza la aguja de la jeringa y coloca una aguja nueva.
Inocula directamente a travs de la tapa de goma del frasco de hemocultivo.
Mezcla con movimientos rotatorios suaves el frasco de hemocultivo.
Rotula con nombre completo, servicio, hora, tipo muestra y orden correspondiente
en la etiqueta del frasco. Cuidar de no tapar el cdigo de barra.
Enva al laboratorio en forma inmediata. Estos exmenes se reciben en forma
continua en el laboratorio.
NO REFRIGERAR.

MUESTRA DE DEPOSICION: COPROCULTIVO

Tcnica limpia

MATERIALES:
Tubo estril con medio de transporte Carry Blair.

DESARROLLO:
Explique lo que se le va a hacer al paciente.
Acueste al paciente en posicin SIMS.
Lvese las manos.
Colquese los guantes de procedimiento.
Abra los glteos del paciente e introduzca la trula estril en el canal anal unos 3
cm.
Rote la trula suavemente. Repita con una segunda trula.
Cuando la deposicin es lquida, debe obtenerse mediante sonda rectal,
empleando una sonda nelatn fina con jeringa. Tomar de 1 a 5 ml. de deposicin.
Introduzca cuidadosamente la muestra en Cary Blair
Retrese los guantes y lvese las manos
Rotule la muestra con el nombre completo, servicio, tipo de muestra.
Enve al laboratorio con la orden correspondiente.

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SECRECION RECTAL

Tcnica limpia

MATERIALES:
Guantes procedimiento
Trula estril
Tubo con medio de cultivo Stuart

DESARROLLO:
Explique lo que se le va a hacer al paciente.
Acueste al paciente en posicin SIMS.
Lvese las manos.
Colquese los guantes de procedimiento.
Abra los glteos del paciente e introduzca la trula estril en el canal anal unos 3
cm.
Rote la trula dejndola unos segundos para mejor absorcin de los
microorganismos
Retire la trula, girndola por las paredes del canal anal.
Introduzca cuidadosamente la muestra Cary Blair
Retrese los guantes y lvese las manos
Rotule la muestra con el nombre completo, servicio, hora, tipo de muestra y su
orden.
Enve al laboratorio.

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MUESTRA TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR

MATERIALES:
Tubo estril con medio de transporte con trula individual incluida en el envase
estril
Toalla de papel
Baja lengua
Fuente de luz artificial

DESARROLLO

SECRECION FARINGEA Y AMIGDALAS
Tcnica limpia

Lvese las manos.
Explique al paciente lo que se le va hacer.
Coloque toalla de papel en los hombros del paciente.
Lvese las manos pngase guantes de procedimiento, mascarilla y proteccin
ocular.
Pdale al paciente que abra la boca para visualizar faringe. Si fuese necesario
utilice luz artificial.
Presione la lengua con el baja lengua, evitando estimular el reflejo de nauseas del
paciente.
Abra el envase del medio de transporte y retirar la trula.
Frote la trula por la amgdalas, pilares anteriores y pared posterior de la faringe
tocando cualquier exudado visible (movimiento circular envolvente)
Evite tocar la lengua, vula o las paredes interna de la boca.
Introduzca la trula cuidadosamente en el tubo con transporte Stuart (tapa azul)
Deseche baja lengua.
Retrese los guantes y lvese las manos.
Retire toalla de papel del paciente.
Retrese y deseche la mascarilla, retire la proteccin ocular y deseche o enve a
limpieza segn corresponda.
Rotule la muestra con el nombre completo del paciente, servicio, tipo de muestra
y orden solicitud examen.
Enve la muestra al Laboratorio Central.
Lvese las manos una vez finalizada la toma de la muestra.
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Para investigar Corynebacteriundifterieae, tomar dos muestras con trula
estril, utilizando baja lengua ,pasando la trula por el borde de la pseudo
membrana

SECRECION NASAL:
Tcnica limpia

Lvese las manos.
Coloque toalla de papel en los hombros del paciente.
Lvese las manos y pngase guantes de procedimiento
Incline levemente la cabeza del paciente hacia atrs
Levante la punta de la nariz.
Introduzca la trula humedecida con suero fisiolgico a la fosa nasal
Rote la trula estril humedecida con solucin salina
Introduzca cuidadosamente la trula en el tubo con medio de transporte Stuart
(tapa azul)
Retirarse guantes y lavarse las manos
Retire la toalla de papel del paciente
Rotule la muestra con el nombre completo del paciente, servicio, tipo de
Muestra y orden solicitud de examen
Enve la muestra al Laboratorio Central
Lvese las manos una vez finalizada la toma de muestra
La secrecin nasal no es representativa de una infeccin sinusal, para ello debe
tomarse muestra de los senos paranasales
Senos paranasales: La muestra debe ser obtenida por mdico especialista. Se
punciona en forma asptica con jeringa a nivel de la cavidad paranasal
Enviar muestra al Laboratorio en la misma jeringa, ya que es importante el estudio
anaerobio.

SECRECION NASOFARINGEA
El estudio portacin nasofaringe, slo se justifica en casos de
1. Brotes epidemiolgicos de IIH cuando se sospecha que el reservorio del
agente causal del brote se encuentra en esta localizacin.
2. Estudio viral

DESARROLLO
Deprima la lengua con baja lengua
Con trula estril humedecida con solucin salina, tomar la muestra por detrs de
la vula, en la porcin nasal de la faringe
Introduzca cuidadosamente la muestra en el tubo con medio de transporte Stuart
(tapa azul)
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Deseche baja lengua. Retire toalla de papel del paciente
Rotule la muestra con el nombre completo del paciente, servicio, tipo de muestra
y orden solicitud de examen
Enve muestra al Laboratorio Central
Lvese las manos una vez finalizada la toma de la muestra

MUESTRA TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR

MATERIALES:

Equipo de aseo para cavidad bucal
Toalla de papel
Mascarilla
Tubo estril sin medio de transporte
Frasco estril boca ancha y tapa rosca (frasco de urocultivo)
Equipo estril de puncin

DESARROLLO:

EXPECTORACIN

La muestra de expectoracin debe ser tomada antes de iniciar tratamiento de
antibiticos
Se debe tomar en ayunas o en horas alejadas de las comidas
La toma de muestra debe ser supervisada por profesional responsable. La muestra
salival no sirve.
Es recomendable facilitar la expectoracin con kinesioterapia y drenaje postural.
Una muestra adecuada se caracteriza por contener un mnimo de clulas
epiteliales ( < de 10 x campo) y un nmero significativo de
polimorfonucleares ( > de 25 x campo)
La muestra podr ser tomada entre los 8.00 y 16 horas y debe enviarse de
inmediato. Plazo mximo 1 hora.
En el Laboratorio debe verificarse la buena calidad de la muestra mediante la
observacin al fresco de la porcin ms purulenta. Se considerar apropiado si
estn presentes ms de 25 PMN por campo

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El profesional o Tcnico Paramdico encargado de la toma de muestra:

Explica al paciente lo que se le va hacer
Se lava las manos y se pone mascarilla y guantes de procedimiento
Sienta al paciente
Retira prtesis dentaria si hubiese
Le pide al paciente que se lave los dientes, lengua y paladar
Que realiza colutorios con agua, para limpiar bien la cavidad oral
Le pide al paciente que tosa y elimine una muestra de expectoracin en el envase
estril conservando la asepsia
Rotula la muestra con nombre completo, servicio, hora , tipo de muestra y su
orden.
Enva al Laboratorio
Se lava las manos una vez finalizada la toma de muestra

SECRECION BRONQUIAL
El profesional encargado de la toma de muestra es la Enfermera clnica
responsable del paciente.
La muestra debe ser recibida en el tubo que viene en el equipo de aspiracin
bronquial(tapa blanca)
Rotula la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su orden
Enva al Laboratorio

ASPIRADO ENDOTRAQUEAL
Es una tcnica de muy baja especificidad ( 0 30 %) y de alta sensibilidad ( 60- 90%), por
lo cual , los resultados negativos en pacientes que no han recibido antimicrobianos
previos, permiten descartar la posibilidad de NAVM

El encargado de la toma de muestra es la enfermera
La muestra debe ser recibida en el tubo que viene en el equipo de aspiracin (tapa
blanca)
Se rotula la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su orden.
Se enva al Laboratorio

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ASPIRADO ENDOTRAQUEAL CUANTITATIVO (A.E.T.): se indica esta tcnica a
todo paciente con sospecha de Neumona asociada a ventilacin mecnica (conexin
mayor a 48 hrs y presencia de criterios clnicos radiolgicos) y en el cual no se hayan
efectuado cambios de tratamiento antimicrobiano en las ltimas 72 hrs.

TCNICA
Se utiliza un catter de aspiracin introducido por el tubo endotraqueal y se conecta el
otro extremo del catter a un colector o trampa estril apropiada .El procedimiento
debe ser realizado con tcnica asptica y por un profesional entrenado. El catter
debe ser introducido hasta encontrar resistencia. No se debe diluir la muestra con el
fin de facilitar su recoleccin .Si las secreciones son espesas se debe aspirar en forma
intermitente.

INTERPRETACIN
La aplicacin de un recuento > a 106 ufc./ml , permite una sensibilidad razonable y
una especificidad significativa. Valores iguales o superiores a este recuento se
asocian a NAVM en aproximadamente el 80% de los casos.

MUESTRAS INVASIVAS
Son las ms especficas en el diagnstico etiolgico de las NEUMONIAS
NOSOCOMIALES. Tienen la desventaja de requerir mdico especialista para la
realizacin del procedimiento.

LAVADO BRONCOALVEOLAR (LBA) POR BRONCOSCOPA: mtodo que permite
obtener un lavado del compartimiento alveolar. Se debe instilar entre 100-200 ml de
solucin salina. La sensibilidad en promedio es de 69% y la especificidad 88 %. El
nivel de corte considerado positivo es de 10
4
ufc/ml .Realizar el procedimiento a travs
de broncoscopa y con tcnica asptica, recuperar entre 15 a 50 ml del lavado en un
tubo o frasco estril. Transportarlas de inmediato al laboratorio para su estudio.

BIOPSIA PULMONAR: El estudio histopatolgico del pulmn es considerado el patrn
de referencia para el diagnstico de NAVM .Por su dificultad tcnica no es
considerada para el diagnstico de NAVM en el inmunocompetente. Se enva un
trocito de tejido en tubo estril o en medio de transporte con caldo especfico,
solicitado previamente al laboratorio, obtenido mediante procedimiento quirrgico.
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Trasladar la muestra de inmediato .No refrigerar, ni colocar en lquidos preservantes o
fijadores.
Las muestras para estudio de Tuberculosis y otras micobacterias, deben enviarse al
Instituto Nacional del Trax y las virales (refrigeradas), al ISP.

PUNCIN PLEURAL
Son de resolucin mdica
La enfermera y Tcnico Paramdico deben: Preparar en forma fsica y
psquica al paciente
Tener colaboracin activa en la toma de muestra junto al Mdico
Obtener 5-10 ml de muestra por toracocentsis en tubo estril medio de
transporte (tubo cnico tapa rosca), tubo del equipo de aspiracin en frasco
de urocultivo
Debe enviar la muestra en tubo estril sin medio de transporte.
Deben rotular la muestra con nombre completo, servicio ,hora, tipo de muestra
y su orden

MUESTRAS SECRECIN TRACTO GENITAL FEMENINO

MATERIALES:
Guantes de procedimiento
Espculo estril
Tubo con medio de transporte Stuart
Sabanilla desechable
Mascarilla
Trulas estriles individuales
Pinzas basseman
Receptculos para desechos
Frascos de penicilina con suero fisiolgico
Jeringas
Sondas estriles

DESARROLLO:

Explique lo que se le va hacer al paciente.
Rena el material.
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Acueste a la paciente en mesa ginecolgica con sabanilla desechable
Haga aseo genital
El operador debe colocarse pechera desechable, lavarse las manos y colocarse
guantes
Introduzca especulo sin lubricar en la vagina de la paciente

LOQUIOS: Visualice cuello uterino, lmpielo con trula estriles.
Introduzca la trula estril por el cuello del tero hasta llegar a la cavidad
uterina sin tocar pared vaginal. Hacer girar la trula.
Retire la trula e introdzcala en el tubo con medio de transporte Stuart.

SECRECION VAGINAL: Tome la muestra con trula estril de la mucosa vaginal si se
desea investigar Listeria.
Para buscar hongos, tricomonas y Gadnerella, introduzca una sonda a travs de la
vagina, conectada a una jeringa que contenga 2 ml suero fisiolgico. Haga lavado
vaginal, aspire y coloque el producto del lavado en tubo estril

SECRECION CERVIX: Ubique cerviz, limpie secrecin vaginal y mucus con gasa
esteril. Tome muestra de exudado endocervical, haciendo girar la trula. Introduzca la
trula en tubo con medio de cultivo Stuart. Para Chlamydia (Inmunofluorescencia
Directa) ver Anexo 2.

SECRECION VULVAR: Tome muestra de la lesin con trulas estriles. Si hubiese
ndulo, irrigar con 0,5 ml. suero fisiolgico y aspire con jeringa estril .Introduzca
muestra en tubo estril
Retire especulo. Pdale al paciente que se baje de la mesa ginecolgica y se vista.
Retire sabanilla desechable
Rotule la muestra con nombre completo, servicio ,tipo de muestra y su orden
Enve muestra al Laboratorio

FONDO DE SACO DE DOUGLAS: Aspire por puncin del fondo de saco vaginal
previa desinfeccin. Enve en la misma jeringa taponada como para estudio de
anaerobios.

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Versin 1


CULTIVO ANAEROBIO: Si existe la sospecha de infeccin anaerobia, slo se realiza
el estudio en las siguientes muestras: placenta obtenida por cesrea, endometrio
obtenido por ciruga o por aspiracin cervical con catter protegido, aspirado por
puncin de fondo de saco de Douglas, tejidos anexiales y aspirado de glndula de
Bartolino

LIQUIDO AMNIOTIVO Tcnica que debe ser realizada por Mdico gineco-obtetra:
Por amniocentesis
Aspiracin trans cutnea.
Una vez tomada la muestra se introduce en un tubo estril. Levar al Laboratorio
con orden correspondiente y debidamente rotulada.

ABSCESOS OVARICOS Y TROMPAS DE FALOPIO: Tcnica debe ser realizada por
Mdico gineco-obtetra .Una vez tomada la muestra se debe introducir en un tubo
estril. Lleve al Laboratorio con orden correspondiente y debidamente rotulada.

MUESTRA DE SECRECIN URETRAL

MATERIALES:
Vidrio porta-objeto
Placa con medio de cultivo Tayer Martin
Frascos de penicilina con suero fisiolgico
Trula estril.

DESARROLLO:
Explicar lo que se le va hacer al paciente
Lavarse las manos
Colocarse guantes de procedimiento
Visualizar glande Previo aseo genital, exprimir uretra y recibir la secrecin en
trula estril, colocar en medio de transporte Stuart. La muestra debe tomarse a
primera hora de la maana o despus de una hora de orinar.
Si la secrecin es abundante, tomar la muestra con la trula estril
Si la secrecin es escasa, introducir una trula de arginato en la uretra unos dos
centmetros.
Al retirar la trula, girarla en ambos sentidos.
Si no hay secrecin se puede tomar orina de primer chorro
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TOMA MUESTRA
BACTERIOLOGICA

Versin 1


Introducir cuidadosamente la muestra en medio de transporte Stuart
Rotular la muestra con nombre completo, servicio, hora, tipo de muestra y su
orden
Enviar la muestra al Laboratorio
Retirarse los guantes
Lavarse las manos una vez finalizada la toma de muestra
Para Inmunofluorescencia Directa para Chlamydia ver Anexo 2
En Secrecin prosttica: Se procede de igual forma que en el caso de muestra
para secrecin uretral, previo masaje prosttico
Las muestras obtenidas por masaje prosttico son responsabilidad del mdico
urlogo.
Los pacientes de ETS, la matrona debe tomar la muestra segn corresponda y
sembrar la muestra directamente en una placa con medio de cultivo TM. En forma
de Z y poner la (las) placa en un contenedor metlico con vela.
Enviar al Laboratorio

MUESTRA DIRECTA DE FLUJO VAGINAL Y URETRAL

OBJETIVO:
Mantener viabilidad de tricomonas principalmente para obtener un resultado confiable.

MATERIALES:
Trulas estriles
Frascos con suero fisiolgico
Espculo
Mesa ginecolgica

DESARROLLO:
El responsable de la toma muestra es la matrona
Explicar al paciente lo que se le va hacer
Acostar a la paciente en posicin ginecolgica
Introducir espculo sin lubricar
Tomar muestra con trula estril del fondo de vagina
La trula con muestra, emulsionarla en el frasco de suero fisiolgico.
Eliminar la trula
Rotular la muestra con nombre completo, servicio, hora, tipo de muestra y su
orden
Enviar la muestra inmediatamente al Laboratorio
Sacarse los guantes y lavarse las manos una vez finalizada la toma de muestra
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TOMA MUESTRA
BACTERIOLOGICA

Versin 1


MUESTRA DE HERIDAS Y ULCERAS

El diagnstico de infeccin es clnico y se basa en la presencia de signos y sntomas en el
sitio de la lesin. El cultivo se solicita solo
1. En la duda del diagnstico de infeccin
2. Si se requiere confirmar etiologa con fines epidemiolgico, especialmente en
pacientes hospitalizados, para definir precauciones o medidas de aislamiento
3. Si el clnico decide que el estado del paciente amerita un tratamiento
antibitico sistmico

MATERIALES
Suero fisiolgico, Ringer o agua destilada
Tubos con medio de transporte Stuart
Frascos con medio de transporte Portagerm para bacterias anaerbicas

DESARROLLO:
Existen dos tipos de cultivos de heridas, dependiendo del microorganismo a aislar:
Cultivo aerobio
Cultivo anaerobio

TOMA DE MUESTRAS

Cultivo aerobio superficial:
Se limpia cuidadosamente la herida por arrastre mecnico con suero fisiolgico
Ringer o agua destilada
Tome la muestra con trula estril, frotando el centro y los bordes internos en
zigzag (tocar 10 puntos de referencia a la superficie)
Rote la trula al avanzar en zigzag.
Introduzca cuidadosamente la muestra al tubo de medio de transporte Stuart
Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y orden
correspondiente.
Enve al Laboratorio.

Cultivo aerobio profundo:
Limpie cuidadosamente la superficie daada con suero fisiolgico estril
Tome muestra con trula estril, de la parte mas profunda de la herida
Introduzca cuidadosamente la muestra en un tubo de medio de transporte Stuart
correspondiente.

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Versin 1


Cultivo anaerobio:
Limpie cuidadosamente la superficie daada con suero fisiolgico estril.
Aspire alrededor de 0,5 ml de secrecin de la zona ms profunda de la herida, con
jeringa estril.
Retire jeringa, eliminando las burbujas de aire.
Introduzca cuidadosamente la muestra en el frasco portagerm.
Cambie la aguja de la jeringa, pinchando la goma que cubre el frasco con medio
de cultivo.
correspondiente.
Si no es posible aspirar muestra, introducir la trula de cultivo en lo ms profundo
de la herida y colocarla en un tubo de thioglicolato solicitado al Laboratorio en el
momento de su uso.
De mayor rendimiento es tomar un trocito de tejido (6mm) con pinza estril en
forma asptica y dejarlo caer en tubo de thioglicolato.
Enve muestra al Laboratorio.

Abscesos cerrados:
Limpie sitio de puncin con antisptico
Aspire secrecin con jeringa , en lo posible 10 ml.
Vaci a tubo con medio de transporte Stuart para cultivo aerobio y portagerm para
cultivo anaerobio

Comentario: El pH cido del pus destruye rpidamente los microorganismos, por lo que
las muestras purulentas deben ser enviadas de inmediato al laboratorio para su siembra.

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Versin 1


MUESTRA DE LIQUIDOS DE CAVIDADES CERRADAS

Liquido cefalorraqudeo, liquido pleural, liquido asctico, liquido sinovial y liquido
pericardio

MATERIALES:
Equipo de puncin.
Alcohol 70%.
Algodn.
Jeringa y aguja estril.
Tubos estriles tapa rosca.

DESARROLLO.
Estas muestras deben ser tomada por Mdico por puncin con tcnica asptica
Las muestras deben introducirse en tubos cnicos estriles
Los lquidos pleural, asctico, sinovial, Pericardio y peritoneal: deben introducirse
en tubo cnico estril y la otra mitad en frasco de hemocultivo
Rotule con nombre completo, servicio, hora, tipo muestra y orden correspondiente

LCR : Es importante la edad del paciente dado que la etiologa de la meningitis
depende del grupo etario
Con tcnica asptica, se obtiene la muestra por puncin lumbar
Se recolecta el LCR en dos tubos estriles tapa rosca
Si se ha tomado un solo tubo con muestra, el laboratorio de microbiologa debe
procesarlo primero
Una vez obtenida la muestra sta debe ser enviada al laboratorio en
forma rpida para su procesamiento

LCR de drenaje ventriculares: En sospecha de Ventriculitis (DVE) aspire, en
formaasptica2 a 3 ml y enviar en la misma jeringa o en tubo estril de inmediato al
laboratorio. No refrigerar.

Absceso y biopsia cerebral: Estas muestras se deben obtener por aspiracin y se
deben enviar en la misma jeringa o en tubo estril, en horas de funcionamiento del
laboratorio.
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Versin 1


MUESTRA DE SECRECIN TICA

MATERIALES:
Tubo con medio de transporte Stuart (tubo tapa azul)
Ampolla de agua destilada o suero fisiolgico.

OTITIS MEDIA: La muestra ptima es el aspirado timpnico por puncin.
No se recomienda obtener la muestra con trula, ya que la flora del conducto auditivo
externo contamina la muestra y oculta el patgeno causal. Slo puede usarse este
sistema cuando existe perforacin timpnica y fluye pus en forma espontnea

OTITIS EXTERNA:
Lvese las manos el operador.
Tome el lbulo de la oreja del paciente, tirndola suavemente hacia fuera, dejando
a la vista el conducto auditivo externo y lvelo con suero fisiolgico
Humedezca la trula con agua destilada o suero fisiolgico estril
Introduzca la trula humedecida, por el conducto auditivo externo llegando hasta
la cercana del tmpano
Dirija la trula en sentido oblicuo, de atrs hacia delante y de abajo hacia arriba
Introduzca cuidadosamente la muestra al tubo de transporte Stuart(tapa azul)
Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su 0rden.
Enve al Laboratorio

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Versin 1


MUESTRA SECRECIN OCULAR

MATERIALES
Ampolla de agua destilada estril o suero fisiolgico estril

DESARROLLO

La muestra debe ser tomada antes de la aplicacin de ungento tpico.
Debe ser tomada por Profesional y ayudante para inmovilizar la cabeza del paciente
(nio)
Lvese las manos el operador
Explique al paciente o al familiar del paciente lo que se le va hacer
Afirme la cabeza del paciente
Limpie superficie externa del ojo comprometido con suero estril
Con los dedos pulgar e ndice, abrir prpados del paciente
Frote con trula humedecida con suero fisiolgico el borde interno de la conjuntiva
y el extremo interno del prpado superior
Rote la trula suavemente para que toda la superficie del algodn de la trula
quede con secrecin purulenta.
Introduzca cuidadosamente la muestra al tubo de medio de transporte Stuart (tapa
azul).
Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su orden
Lvese las manos una vez finalizada la toma de muestra.

ULCERAS CORNEALES: La muestra ptima es el raspado corneal y no la secrecin
superficial. Debe ser tomada y sembrada por oftalmlogo, en la clnica o sala de
atencin del paciente.
Limpie superficie externa del ojo comprometido con suero estril, frotar con trula
humedecida el borde interno de la conjuntiva y colocarla en el tubo con medio de
transporte Stuar

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BACTERIOLOGICA

Versin 1


TOMA DE MUESTRA VIRALES. (I F I)

1. Adenovirus.
2. Virus respiratorio sinsicial.
3. Virus parainfluenza.
4. Virus influenza A y B.

Este procedimiento est normado por el ISP, donde deben enviarse las muestras IFI (+) y
por el Servicio de Salud de Antofagasta, donde se envan las muestras IFI (-), segn
documento adjunto (Anexo 1).

MUESTRA PARA ANAEROBIO

MATERIALES:
Equipo de toma muestra estril
Jeringas estriles
Tubo cnico estril
Frasco con medio de transporte para anaerobio Portagerm.
Guantes estriles

DESARROLLO:

Muestras que no se deben cultivar en anaerobiosis
Secreciones tracto respiratorio superior
Deposicin, excepto para el Cl. Difficile
Secrecin tracto genital
Secreciones de la piel

Muestras que deben sembrarse en anaerobiosis
Material aspirado: pus de absceso, puncin transtraqueal, suprapbica
Tejidos: biopsias, muestras quirrgicas y autopsias
Lquidos de cavidades cerradas

Las tcnicas ms usadas para la recoleccin de material clnico son: Aspiracin,
Punciones, Biopsias o incisin quirrgica
La muestra debe ser realizado por Mdicos si fuese quirrgico
Una vez que elija la tcnica, debe tomar la muestra con tcnica asptica
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BACTERIOLOGICA

Versin 1


Elimine aire si hubiese en la jeringa
Introduzca la muestra en tubo de transporte Portagerm ( ver IT)
Lleve al Laboratorio con orden correspondiente y debidamente rotulada

DISTRIBUCIN.

Direccin
SDAC y sus CR Clnicos dependientes
SDAA y sus respectivos CR dependientes
Seccin Bacteriologa del Laboratorio Clnico
Asesora Jurdica
Of. Calidad y Seguridad del paciente.

MODIFICACIONES

Prrafo que se modifica Pgina Fecha

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Versin 1


ANEXOS
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Versin 1


ANEXO 1

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Versin 1


ANEXO 2

TOMA DE MUESTRA PARA INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA
(ID) PARA CHLAMYDIA

SECRECION CERVIX

MATERIALES:

Espculo estril
Sabanilla desechable
Mascarilla
Pinzas basseman
Receptculos para desechos
Jeringas
Gasa estril
Kit toma de muestra para Chlamydias

DESARROLLO:

El responsable de la toma de muestra es la matrona.

Dado que C. trachomatis infecta especficamente a la clulas columnares y la
infeccin es intracelular, las muestras deben ser obtenidas raspando el sitio
apropiado para obtener tantas clulas como sea posible, luego de haber retirado
cuidadosamente las secreciones mucupurulentas que cubren la mucosa.
Lavarse las manos
Utilizar espculo sin lubricante.
Ubique el cervix. Limpie la mucosidad presente en el ectocrvix y orificio cervical
con gasa estril.
Introducir una trula de algodn o alginato en el canal endocervical, la distancia
suficiente como para que no se observe la punta de algodn.
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TOMA MUESTRA
BACTERIOLOGICA

Versin 1


Rotar la trula por unos segundos y luego retirar cuidando de no contaminar con
secrecin vaginal.
Una vez tomada la muestra hacer rodar la trula, aplicando una ligera presin,
dentro del rea del pocillo de 6 mm presente en el portaobjeto que viene en el kit
de toma de muestra. Dejar secar la muestra al aire a temperatura ambiente (15
30C) y luego fijar con acetona fresca durante 10 minutos. Secar al aire.
Rotular el contenedor del porta-objeto con nombre completo, servicio y tipo de
muestra y enviar de inmediato al Laboratorio junto a su orden correspondiente

SECRECION URETRAL

MATERIALES:
Kit toma de muestra para Chlamydia

DESARROLLO:

Lavarse las manos
Introducir una trula de arginato en la uretra unos dos centmetros.
Al retirar la trula , girarla en ambos sentidos.
Una vez tomada la muestra hacer rodar la trula, aplicando una ligera presin,
dentro del rea del pocillo de 6 mm presente en el portaobjeto que viene en el kit
de toma de muestra. Dejar secar la muestra al aire a temperatura ambiente (15
30C) y luego fijar con acetona fresca durante 10 minutos. Secar al aire.
Rotular el contenedor del porta-objeto con nombre completo, servicio y tipo de
muestra y enviar de inmediato al Laboratorio junto a su orden correspondiente
Retirarse los guantes
Lavarse las manos una vez finalizada la toma de muestra.

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