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LDH
2011-02 V7.0 Espaol LDH Pgina 1 de 2 N/P: 0040-20-32484(7.0)
LDH Kit de lactato deshidrogenasa (mtodo de la IFCC)
Informacin para pedidos N de cat. Tamao de envase LDH0102 R1 4 35 ml + R2 2 18 ml LDH0103 R1 6 40 ml + R2 2 32 ml LDH0104 R1 4 45 mL + R2 4 12mL LDH0105 R1 2 250 ml + R2 1 125 ml
Finalidad de uso El reactivo LDH est indicado para la determinacin cuantitativa de la actividad de lactato deshidrogenasa en suero o plasma humano en sistemas fotomtricos.
Resumen 1, 2
La lactato deshidrogenasa (EC 1.1.1.27, LDH) es un tetrmero compuesto de dos subunidades diferentes. Tiene cinco isoenzimas. La LDH se distribuye ampliamente en los tejidos, concretamente en el hgado, msculos, riones y corazn. Un aumento de actividad de LDH puede indicar diferentes estados patolgicos, como infarto de miocardio, hepatopatas, enfermedades sanguneas o diferentes tipos de cncer. Debido a la falta de especificidad orgnica de LDH, es necesario realizar mediciones simultneas de sus isoenzimas u otras enzimas, como ALP, ALT y AST, si fuera necesario para obtener un diagnstico diferencial.
Mtodo 3
Ensayo UV conforme a la Federacin Internacional de Qumica Clnica y Medicina de Laboratorio (IFCC).
Principio de la reaccin
L-lactato + NAD + piruvato + NADH + H +
La lactato deshidrogenasa cataliza la conversin de L-lactato en piruvato en presencia de lactato deshidrogenasa (LDH). En el proceso, se desoxida -nicotinamida adenina dinucleotida (NAD) en NADH. Este cambio en la absorbancia es directamente proporcional a la actividad de LDH en la muestra.
Reactivo Componentes y concentraciones R1 Tampn TRIS 50 mmol/l L-lactato 5 mmol/l R2 NAD + 7,0 mmol/l
Advertencias y precauciones 1. Exclusivo para uso diagnstico in vitro. 2. Tome las precauciones necesarias para la utilizacin de reactivos de laboratorio. 3. El desecho de todos los materiales se debe realizar conforme a las directrices locales. 4. Los usuarios profesionales que lo soliciten disponen de hojas de datos de seguridad de los materiales.
Preparacin del reactivo R1 y R2 estn listos para su utilizacin.
Almacenamiento y estabilidad Se mantiene estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, si se almacena sin abrir entre 2 C y 8 C , protegido de la luz. Una vez abierto, el reactivo se mantiene estable durante 30 das si permanece refrigerado en el analizador o un frigorfico. Evite la contaminacin de los reactivos. No congele los reactivos.
Absorbancia del blanco de reactivo La absorbancia del blanco del reactivo a 340 nm debe ser < 0,6 A.
Materiales necesarios pero no incluidos 1. El calibrador y los controles que se indican a continuacin. 2. Solucin de 9 g/l de NaCl. 3. Equipo de laboratorio general.
Recogida y preparacin de muestras 1. Puede utilizar suero, plasma heparina o plasma EDTA como muestra. No se recomienda el uso de sangre entera, hemlisis u orina. Utilice preferentemente suero o plasma recin extrado. 2. Utilice los tubos o contenedores de extraccin apropiados y siga las instrucciones del fabricante, evite el efecto de los materiales de los tubos o contenedores de extraccin. 3. Centrifugue las muestras que contienen precipitados antes de realizar el ensayo. 4. Estabilidad: 4 das entre 2 y 8 C 7 das entre 15 y 25 C 6 semanas entre (-15) y (-25) C
Procedimiento del ensayo Blanco Muestra Reactivo 1 2.400 l 2.400 l Agua dest. 100 l Muestra 100 l Mezclar, incubar durante 2 a 3 minutos, a continuacin, aadir: Reactivo 2 600 l 600 l Mezclar en profundidad, leer la absorbancia despus de 1 minuto y controlar el tiempo. Leer la absorbancia de nuevo despus de 3 minutos. A/mn = [muestra A/mn]- [blanco A/mn] En este documento se incluyen hojas de aplicacin para los analizadores de la serie BS. Consulte el manual de funcionamiento correspondiente para obtener las instrucciones de ensayo de cada analizador.
Calibracin 1. Se recomienda utilizar un calibrador humano mltiple de Mindray para realizar la calibracin. La trazabilidad del calibrador mltiple se puede consultar en las instrucciones del mismo de la empresa Mindray. 2. Frecuencia de calibracin: Despus de un cambio de lote de reactivos. Conforme a los procedimientos de control de calidad.
Control de calidad Se deben analizar al menos dos niveles de material de control con cada lote de muestras. Estos controles se deben realizar con cada nueva calibracin, cada nuevo cartucho de reactivo y despus de los procedimientos de mantenimiento o solucin de problemas especficos, como se detalla en el manual del sistema correspondiente. Se recomienda utilizar el de control de ensayo humano de Mindray para comprobar el rendimiento del procedimiento de medicin. Cada laboratorio debe establecer su propio esquema de control de calidad interno, as como los procedimientos de acciones correctivas, si los controles no se mantienen dentro de las tolerancias aceptables.
Clculo El analizador calcula la actividad de cada muestra automticamente con un factor de calibracin vlido especificado del proceso de calibracin. LDH
2011-02 V7.0 Espaol LDH Pgina 2 de 2 N/P: 0040-20-32484(7.0) Factor de conversin de unidades tradicionales (U/l) en unidades SI (kat/l): 1 U/l = 16,67 10 -3 kat/l 1 kat/l = 60 U/l
Intervalos de referencia Cada laboratorio debe establecer sus propios intervalos de referencia en funcin de la poblacin de pacientes. Los intervalos de referencia medidos a 37 C que se enumeran a continuacin estn tomados del material de referencia 3 . Tipo de muestra Unidades convencionales Unidades SI Varn < 248 U/l < 4,13 kat/l Mujer < 247 U/l < 4,12 kat/l
Caractersticas de rendimiento A continuacin, se ofrecen datos de rendimiento representativos obtenidos del sistema de Mindray. Los resultados pueden variar si se utiliza un instrumento diferente, otro laboratorio o procedimiento manual.
Interferencias y especificidad Se ha comprobado la interferencia de las siguientes sustancias mediante esta metodologa. Criterio: Recuperacin dentro del 10% del valor inicial. Sustancia Nivel de prueba Efecto observado
500 mg/dl NSI * NSI: Sin interferencia significativa (dentro de 10%)
Intervalo de linealidad El sistema de Mindray (analizadores de la serie BS de Mindray y reactivo LDH de Mindray) proporciona los siguientes intervalo de linealidad: Tipo de muestra Unidades convencionales Unidades SI Suero y plasma de 4 a 1.000 U/l de 0,07 a 16,67 kat/l Si el valor de la muestra supera 1.000 U/l, se debe diluir la muestra con una solucin de 9 g/l de NaCl (p. ej., 1 + 9) y repetir el ensayo con esta dilucin, y el resultado se debe multiplicar por 10.
Sensibilidad y lmite de deteccin La actividad de LDH ms baja que se puede medir, distinta de cero, es 4 U/l (0,07 kat/l) con una fiabilidad del 99,7%.
Precisin El rendimiento de la precisin obtenido mediante la recomendacin EP5-A aprobada por el NCCLS para el control del suero en ensayos se muestra en la siguiente tabla 4 . U: U/l Tipo de precisin Control II Control III Media DE CV% Media DE CV% En secuencia 140,71 1,85 1,32 221,72 2,23 1,00 Entre secuencias 1,28 0,91 2,04 0,92 Entre das 3,10 2,20 4,50 2,03 Total 3,83 2,72 5,40 2,45
Comparacin de mtodos En una comparacin entre el sistema de Mindray (analizadores de la serie BS de Mindray y reactivo LDH de Mindray) (y) y el sistema Hitachi/Roche (LDH de Hitachi /Roche, IFCC) (x) con 40 muestras se obtuvo la siguiente correlacin (U/l): y=0.9798x+2.8676, R 2 = 0.9985. Los detalles de los experimentos de comparacin se encuentran a disposicin de quien as lo solicite.
Referencias 1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1 a ed. Frankfurt:TH-Books Verlagsgesellschaft, 1998. 2. Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology En:Burtis CA, Ashwood ER, editores. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3 a ed. Filadelfia: W.B Saunders Company; 1999:617-721. 3. Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, et al. IFCC primary reference procedure for the measurement of catalytic activity concentrations of enzymes at 37C. Parte 3. Reference Procedure for the Measurement of Catalytic Concentration of Lactate Dehydrogenase. Clin Chem Lab Med 2002; 40(6):643648. 4. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline, NCCLS publication EP5-A 1999, Vol.19, N 2
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TÉCNICAS MICOLÓGICAS PARA EL DIAGNÓSTICO MICOLÓGICO DE LAS MICOSIS SUPERFICIAL Y CUTÁNEA QUE AFECTAN AL HOMBRE, EMPLEANDO PROCEDIMIENTOS MICROBIOLÓGICOS ESTANDARIZADOS CORRESPONDIENTES PARA CADA CASO E INTERPRETANDO ADECUADAMENTE LOS RESULTADOS OBTENIDOS.