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2011-02 V7.0 Espaol LDH Pgina 1 de 2 N/P: 0040-20-32484(7.0)


LDH
Kit de lactato deshidrogenasa (mtodo de la IFCC)

Informacin para pedidos
N de cat. Tamao de envase
LDH0102 R1 4 35 ml + R2 2 18 ml
LDH0103 R1 6 40 ml + R2 2 32 ml
LDH0104 R1 4 45 mL + R2 4 12mL
LDH0105 R1 2 250 ml + R2 1 125 ml

Finalidad de uso
El reactivo LDH est indicado para la determinacin cuantitativa de la actividad
de lactato deshidrogenasa en suero o plasma humano en sistemas fotomtricos.

Resumen
1, 2

La lactato deshidrogenasa (EC 1.1.1.27, LDH) es un tetrmero compuesto de
dos subunidades diferentes. Tiene cinco isoenzimas. La LDH se distribuye
ampliamente en los tejidos, concretamente en el hgado, msculos, riones y
corazn. Un aumento de actividad de LDH puede indicar diferentes estados
patolgicos, como infarto de miocardio, hepatopatas, enfermedades
sanguneas o diferentes tipos de cncer. Debido a la falta de especificidad
orgnica de LDH, es necesario realizar mediciones simultneas de sus
isoenzimas u otras enzimas, como ALP, ALT y AST, si fuera necesario para
obtener un diagnstico diferencial.

Mtodo
3

Ensayo UV conforme a la Federacin Internacional de Qumica Clnica y Medicina
de Laboratorio (IFCC).

Principio de la reaccin

L-lactato + NAD
+
piruvato + NADH + H
+


La lactato deshidrogenasa cataliza la conversin de L-lactato en piruvato en
presencia de lactato deshidrogenasa (LDH). En el proceso, se desoxida
-nicotinamida adenina dinucleotida (NAD) en NADH. Este cambio en la
absorbancia es directamente proporcional a la actividad de LDH en la muestra.

Reactivo
Componentes y concentraciones
R1
Tampn TRIS 50 mmol/l
L-lactato 5 mmol/l
R2 NAD
+
7,0 mmol/l

Advertencias y precauciones
1. Exclusivo para uso diagnstico in vitro.
2. Tome las precauciones necesarias para la utilizacin de reactivos de
laboratorio.
3. El desecho de todos los materiales se debe realizar conforme a las
directrices locales.
4. Los usuarios profesionales que lo soliciten disponen de hojas de datos de
seguridad de los materiales.

Preparacin del reactivo
R1 y R2 estn listos para su utilizacin.

Almacenamiento y estabilidad
Se mantiene estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, si se
almacena sin abrir entre 2 C y 8 C , protegido de la luz.
Una vez abierto, el reactivo se mantiene estable durante 30 das si permanece
refrigerado en el analizador o un frigorfico.
Evite la contaminacin de los reactivos.
No congele los reactivos.

Absorbancia del blanco de reactivo
La absorbancia del blanco del reactivo a 340 nm debe ser < 0,6 A.

Materiales necesarios pero no incluidos
1. El calibrador y los controles que se indican a continuacin.
2. Solucin de 9 g/l de NaCl.
3. Equipo de laboratorio general.

Recogida y preparacin de muestras
1. Puede utilizar suero, plasma heparina o plasma EDTA como muestra. No
se recomienda el uso de sangre entera, hemlisis u orina. Utilice
preferentemente suero o plasma recin extrado.
2. Utilice los tubos o contenedores de extraccin apropiados y siga las
instrucciones del fabricante, evite el efecto de los materiales de los tubos
o contenedores de extraccin.
3. Centrifugue las muestras que contienen precipitados antes de realizar el
ensayo.
4. Estabilidad:
4 das entre 2 y 8 C
7 das entre 15 y 25 C
6 semanas entre (-15) y (-25) C

Procedimiento del ensayo
Blanco Muestra
Reactivo 1 2.400 l 2.400 l
Agua dest. 100 l
Muestra 100 l
Mezclar, incubar durante 2 a 3 minutos, a continuacin, aadir:
Reactivo 2 600 l 600 l
Mezclar en profundidad, leer la absorbancia despus de 1 minuto y controlar el
tiempo. Leer la absorbancia de nuevo despus de 3 minutos.
A/mn = [muestra A/mn]- [blanco A/mn]
En este documento se incluyen hojas de aplicacin para los analizadores de la
serie BS. Consulte el manual de funcionamiento correspondiente para obtener las
instrucciones de ensayo de cada analizador.

Calibracin
1. Se recomienda utilizar un calibrador humano mltiple de Mindray para
realizar la calibracin. La trazabilidad del calibrador mltiple se puede
consultar en las instrucciones del mismo de la empresa Mindray.
2. Frecuencia de calibracin:
Despus de un cambio de lote de reactivos.
Conforme a los procedimientos de control de calidad.

Control de calidad
Se deben analizar al menos dos niveles de material de control con cada lote de
muestras. Estos controles se deben realizar con cada nueva calibracin, cada
nuevo cartucho de reactivo y despus de los procedimientos de mantenimiento
o solucin de problemas especficos, como se detalla en el manual del sistema
correspondiente.
Se recomienda utilizar el de control de ensayo humano de Mindray para
comprobar el rendimiento del procedimiento de medicin.
Cada laboratorio debe establecer su propio esquema de control de calidad
interno, as como los procedimientos de acciones correctivas, si los controles no
se mantienen dentro de las tolerancias aceptables.

Clculo
El analizador calcula la actividad de cada muestra automticamente con un factor
de calibracin vlido especificado del proceso de calibracin.
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Factor de conversin de unidades tradicionales (U/l) en unidades SI (kat/l):
1 U/l = 16,67 10
-3
kat/l
1 kat/l = 60 U/l

Intervalos de referencia
Cada laboratorio debe establecer sus propios intervalos de referencia en funcin
de la poblacin de pacientes. Los intervalos de referencia medidos a 37 C que se
enumeran a continuacin estn tomados del material de referencia
3
.
Tipo de muestra Unidades convencionales Unidades SI
Varn
< 248 U/l
< 4,13 kat/l
Mujer < 247 U/l < 4,12 kat/l

Caractersticas de rendimiento
A continuacin, se ofrecen datos de rendimiento representativos obtenidos del
sistema de Mindray. Los resultados pueden variar si se utiliza un instrumento
diferente, otro laboratorio o procedimiento manual.

Interferencias y especificidad
Se ha comprobado la interferencia de las siguientes sustancias mediante esta
metodologa. Criterio: Recuperacin dentro del 10% del valor inicial.
Sustancia Nivel de prueba Efecto observado

cido ascrbico 30 mg/dl NSI
*
Bilirrubina 40 mg/dl NSI

Lipemia

500 mg/dl NSI
* NSI: Sin interferencia significativa (dentro de 10%)

Intervalo de linealidad
El sistema de Mindray (analizadores de la serie BS de Mindray y reactivo LDH de
Mindray) proporciona los siguientes intervalo de linealidad:
Tipo de muestra Unidades convencionales Unidades SI
Suero y plasma de 4 a 1.000 U/l
de 0,07 a 16,67
kat/l
Si el valor de la muestra supera 1.000 U/l, se debe diluir la muestra con una
solucin de 9 g/l de NaCl (p. ej., 1 + 9) y repetir el ensayo con esta dilucin, y el
resultado se debe multiplicar por 10.

Sensibilidad y lmite de deteccin
La actividad de LDH ms baja que se puede medir, distinta de cero, es 4 U/l (0,07
kat/l) con una fiabilidad del 99,7%.

Precisin
El rendimiento de la precisin obtenido mediante la recomendacin EP5-A
aprobada por el NCCLS para el control del suero en ensayos se muestra en la
siguiente tabla
4
. U: U/l
Tipo de
precisin
Control II Control III
Media DE CV% Media DE CV%
En secuencia
140,71
1,85 1,32
221,72
2,23 1,00
Entre
secuencias
1,28 0,91 2,04 0,92
Entre das 3,10 2,20 4,50 2,03
Total 3,83 2,72 5,40 2,45

Comparacin de mtodos
En una comparacin entre el sistema de Mindray (analizadores de la serie BS de
Mindray y reactivo LDH de Mindray) (y) y el sistema Hitachi/Roche (LDH de
Hitachi /Roche, IFCC) (x) con 40 muestras se obtuvo la siguiente correlacin
(U/l): y=0.9798x+2.8676, R
2
= 0.9985. Los detalles de los experimentos de
comparacin se encuentran a disposicin de quien as lo solicite.

Referencias
1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1
a
ed. Frankfurt:TH-Books
Verlagsgesellschaft, 1998.
2. Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology En:Burtis CA, Ashwood ER,
editores. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3
a
ed. Filadelfia: W.B
Saunders Company; 1999:617-721.
3. Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, et al. IFCC primary reference
procedure for the measurement of catalytic activity concentrations of
enzymes at 37C. Parte 3. Reference Procedure for the Measurement of
Catalytic Concentration of Lactate Dehydrogenase. Clin Chem Lab Med
2002; 40(6):643648.
4. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Evaluation of
Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline,
NCCLS publication EP5-A 1999, Vol.19, N 2

2011 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Reservados todos los
derechos

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