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    Pract Urea

    Cargado por

    Lesli Lisbeth Molina Soto
    Este documento describe un método para determinar la concentración de urea en suero y orina. La urea se descompone en amonio y dióxido de carbono por la enzima ureasa, y el amonio reacciona con otros reactivos para formar un complejo de color verde cuya absorbancia indica la cantidad de urea. El método permite calcular la concentración de urea en suero y orina y la excreción de urea en 24 horas para evaluar la función renal.

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    Pract Urea

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    Lesli Lisbeth Molina Soto
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    Este documento describe un método para determinar la concentración de urea en suero y orina. La urea se descompone en amonio y dióxido de carbono por la enzima ureasa, y el amonio reacciona con otros reactivos para formar un complejo de color verde cuya absorbancia indica la cantidad de urea. El método permite calcular la concentración de urea en suero y orina y la excreción de urea en 24 horas para evaluar la función renal.

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    Este documento describe un método para determinar la concentración de urea en suero y orina. La urea se descompone en amonio y dióxido de carbono por la enzima ureasa, y el amonio reacciona con otros reactivos para formar un complejo de color verde cuya absorbancia indica la cantidad de urea. El método permite calcular la concentración de urea en suero y orina y la excreción de urea en 24 horas para evaluar la función renal.

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    Este documento describe un método para determinar la concentración de urea en suero y orina. La urea se descompone en amonio y dióxido de carbono por la enzima ureasa, y el amonio reacciona con otros reactivos para formar un complejo de color verde cuya absorbancia indica la cantidad de urea. El método permite calcular la concentración de urea en suero y orina y la excreción de urea en 24 horas para evaluar la función renal.

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    UNMSM

    FM-AEP MH.
    PRACTICA DE BIOQUIMICA
    DETERMINACION DE UREA

    INTRODUCCIN

    La urea se sintetiza en el hgado como un producto de la desaminacin de los
    aminocidos. Su eliminacin en la orina representa la principal va de excrecin del
    nitrgeno. Se encuentran concentraciones elevadas de urea en plasma como
    consecuencia de una dieta hiperproteica, aumento del catabolismo proteico, despus de
    una hemorragia gastrointestinal, ligera deshidratacin, shock e insuficiencia cardaca o
    tratamiento con glucocorticoides (uremia prerrenal)

    La uremia postrenal est causada por condiciones que obstruyen el flujo urinario:
    nefrolitiasis, tumor o hipertrofia prosttica. La utilidad de la urea como indicador de la
    funcin renal est limitada por la variabilidad de su concentracin plasmtica como
    consecuencia de factores no renales.
    El diagnstico clnico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un nico
    ensayo, sino que debe integrar los datos clnicos y de laboratorio.

    FUNDAMENTO DEL MTODO

    La urea presente en la muestra, es desdoblada a amonio por accin de la enzima ureasa,
    segn la proposicin de Faucet y Scott.

    (NH2)2CO + 2 H2O UREASA 2 NH3 + CO2 + H2O

    El amonio producido reacciona con salicilato e hipoclorito en ambiente alcalino,
    formndose un complejo de color verde. La intensidad del color producido es
    directamente proporcional a la cantidad de urea presente en la muestra, y su absorbancia
    se lee a 600 nm.

    REACTIVOS
    Reactivo Ureasa: Enzima de origen fungal, estabilizada y tamponada. ESTE REACTIVCO
    SER PROVISTO POR EL PROFESOR DE PRACTICA.

    MUESTRAS

    Suero, plasma u orina recogidos mediante procedimientos estndar.
    Orina recolectada en 24 horas (llevar al laboratorio la totalidad del volumen recolectado).

    Medir el volumen de orina de 24 horas.
    Diluir el suero 1/20 con agua destilada antes del ensayo.
    Diluir la orina 1/400 con agua destilada antes del ensayo.

    PROCEDIMIENTO






    1. Pipetear en tubos de ensayo pequeos:

    TUBO/REACTIVO BL ST MP suero MP orina
    Estndar .. mg/dL
    Suero diluido
    Orina diluida
    Reactivo SALICILATO
    Reactivo UREASA

    ----
    ---
    1 mL
    25uL
    0.2mL
    ---
    ---
    1 mL
    25uL
    ----
    0.2mL
    ---
    1 mL
    25uL
    ----
    ----
    0.2mL
    1mL
    25uL

    3. agregar el reactivo HIPOCLORITO

    TUBO/REACTIVO BL ST MP suero MP orina
    HIPOCLORITO mL 1,0 1,0 1,0 1,0

    4. Agitar bien e incubar los tubos durante 5 minutos a temperatura ambiente (16-25C)
    5. Aadir luego medir al espectrofotmetro a 600 nm. El color es estable durante al menos
    30 min.
    7. Proceda a calcular la concentracin de urea en suero y orina.
    8. A partir de la concentracin de la orina calcule la excrecin de urea en 24 horas.
    9. Compare los resultados entre las dietas hiperprotica, normoprotica e hipoprotica.

    VALORES DE REFERENCIA
    Suero y plasma: 20-40 mg/dL urea.
    En el periodo neonatal las concentraciones son inferiores mientras que en personas
    mayores de 60 aos se encuentran valores superiores a los adultos. Las concentraciones
    tambin tienden a ser ligeramente superiores en hombres que en mujeres.
    Orina, EXCRESION en 24 horas: 20 a 40 g/24-h urea.

    CUESTIONARIO:
    1. Qu es el BUN, y como se calcula?
    2. Lectura SINDROME UREMICO HEMOLITICO: Revisin por Clara Beatrz Crdoba y
    col en
    http://www.alimentosargentinos.gov.ar/programa_calidad/calidad/info/suh_ANMAT.pdf
    desarrolle 4 a 5 mapas conceptuales.





    Prof. MIGUEL SANDOVAL VEGAS.
    Encargado del curso Bioqumica
    EAP Medicina Humana. FM-UNMSM

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