MECANISMOS DE VARIABILIDAD

GENTICA
Las mutaciones son cambios estables y heredables en el
genotipo (secuencia de ADN), que producen cambios en el
fenotipo y pueden ocurrir de manera espontanea o inducida
por sustancias qumicas o radiacin.
CAMBIOS PEQUEOS: Mutaciones puntuales
CAMBIOS GRANDES: Inserciones, delecciones, inversiones,
duplicaciones y translocaciones.
MUTACIONES
MUTACIONES PUNTUALES ESPONTANEAS: Resultan de errores
en la replicacin del ADN o de la accin de elementos mviles
como los transposones.
Errores en la replicacin: cuando la base nitrogenada de un
blanco de replicacin toma su forma tautomerica.

Tautomerismo es la relacin entre dos isomeros estructurales
que estn en equilibrio qumico y cambian fcilmente entre s;
las bases estn en la forma ceto y cambian a imino o enol.
MUTACIONES
MUTACIONES PUNTUALES ESPONTANEAS:
MUTACIONES
MUTACIONES PUNTUALES ESPONTANEAS:
MUTACIONES
MUTACIONES PUNTUALES ESPONTANEAS:
Errores en la replicacin:
-Adiccin o deleccin de nucletidos. Generalmente donde
hay nucletidos repetidos.
-Lesiones en el ADN: Sitios apurinicos o apirimidinicos,
oxidacin de bases como 8-oxi-7,8-dihydrodeoxyguanine, la
cual se aparea con A en vez de C.
Ejemplo, H. pylori:
Cambio de a Adenina por Guanina en la posicin 2143 y
2142 del gen DNAr23S (?)
Cambio de Adenina por Citosina en la posicin 4142 del
gen DNAr23S (?)
MUTACIONES
Purinas: A y G
Pirimidinas: T, U y C
Tranversin
Transicin
MUTACIONES PUNTUALES INDUCIDAS:
Agentes qumicos : Bases anlogas, agentes modificantes del
ADN y agentes intercalantes.
MUTACIONES
5Bromouracilo (ceto) anlogo de la
timina
MUTACIONES PUNTUALES INDUCIDAS:
Agentes qumicos : Bases anlogas, agentes modificantes del
ADN y agentes intercalantes.
MUTACIONES
AGENTE ALQUILANTE
MUTACIONES PUNTUALES INDUCIDAS:
Agentes qumicos : Bases anlogas, agentes modificantes del
ADN y agentes intercalantes.


cido nitroso:
Desaminacin oxidativa de A y C
C dioxiUridina empareja con A
A HipoXantina empareja con C


MUTACIONES
AGENTES DESAMINANTES
MUTACIONES PUNTUALES INDUCIDAS:
Agentes qumicos : Bases anlogas, agentes modificantes del
ADN y agentes intercalantes.
MUTACIONES
MUTACIONES PUNTUALES INDUCIDAS:
Agentes fsicos : Radiacciones .
MUTACIONES
EFECTOS MUTACIONES PUNTUALES EN GENES QUE CODIFICAN
PROTENAS
MUTACIN SILENCIOSA: cuando el codn alterado continua
codificando para el mismo aminocido y por lo tanto se
sintetiza la misma protena.
Ejemplo: codn de tirosina UAC muta a UAU* tambin de
tirosina

MUTACIN CON SENTIDO ERRNEO: cuando el codn alterado
codifica para un aminocido diferente que puede alterar las
propiedades de la protena, o incluso convertirla en no
funcional.
Ejemplo: codn de serina AGU muta a AGA* codn de
asparagina.

MUTACIONES

MUTACIN SIN SENTIDO: cuando la sustitucin del
nucletido produce un codn de terminacin o de parada.
El producto es una protena incompleta que probablemente
no es funcional.
Ejemplo: codones UAG, UAA y UGA

MUTACIONES
MUTACIN CAMBIO DEL
MARCO DE LECTURA.
Cuando por la insercin o
deleccin de un nucletido,
se cambia el marco de
lectura, llevando a un
producto completamente
diferente.



Las mutaciones puntuales pueden ser reversibles:

Revertiente de un mismo sitio: cuando la mutacin
que restaura la actividad ocurre en el mismo sitio
donde ocurri la mutacin original.

Revertiente de un segundo sitio: cuando la mutacin
que restaura la actividad ocurren en un sitio diferente
de donde ocurri la mutacin original.


MUTACIONES
REPARACIN
REPARACIN POR EXCISIN:
DE NUCLEOTIDOS
DE BASE
REPARACIN
REPARACIN POR EXCISIN:
DE NUCLEOTIDOS
DE BASE
REPARACIN
REPARACIN DIRECTA:
REPARACIN
REPARACIN DE MAL APAREAMIENTO:
ELEMENTOS TRANSPONIBLES (TRANSPOSABLES):
Fragmentos de DNA que pueden moverse de un lugar a
otro del cromosoma, no replicones.

TRANSPOSICIN suceso raro (Frecuencia: 10
-5
a 10
-7
por generacin) los genes son relativamente
estables.

CONSECUENCIAS: Inversiones de segmentos genticos,
deleciones Plasticidad gentica Mecanismos
evolutivos.

ELEMENTOS MOVILES
1.- Secuencias de insercin (IS): Segmentos de ADN que pueden
moverse de una posicin cromosmica a otra del mismo
cromosoma o a otro cromosoma diferente.
Tienen entre 700 y 1500 pb y se han encontrado en los dominios
Bacteria y Arquea. Tambin son frecuentes en bacterifagos y
plsmidos.



ELEMENTOS MOVILES
1.- Secuencias de insercin (IS):
Contienen solo genes que codifican la transposasa y en los
extremos tienen secuencias cortas repetidas e invertidas = IR, de
10 a 40 pb.





ELEMENTOS MOVILES
1.- Secuencias de insercin (IS):
ELEMENTOS MOVILES
1.- Secuencias de insercin (IS):
Cuando los IS se insertan en medio de los genes, pueden
interrumpir la secuencia codificante e inactivar la expresin del
gen.


v
v
ELEMENTOS MOVILES
2.- Transposones (Tn): Segmentos de ADN que pueden moverse
de una posicin cromosmica a otra del mismo cromosoma o a
otro cromosoma diferente, porque llevan el gen de la
transposasa; y se diferencian de las IS porque portan genes
adicionales por ejemplo resistencia a algn antibitico. Tambin
se han descrito Tn conjugativos que pueden transferirse de una
bacteria a otra.


ELEMENTOS MOVILES
2.- Transposones (Tn):

Caractersticas comunes entre IS y Tn:
Gen de la transposasa
Pequeas repeticiones terminales invertidas (IR): 40pb
hasta > 1000pb que permiten la recombinacin
especfica de sitio.

ELEMENTOS MOVILES
2.- Transposones (Tn):



ELEMENTOS MOVILES
2.- Transposones (Tn):



ELEMENTOS MOVILES
2.- Transposones (Tn): Mecanismo de transposicin
NO REPLICATIVO

ELEMENTOS MOVILES
2.- Transposones (Tn): Mecanismo de transposicin
REPLICATIVO



ELEMENTOS MOVILES

PLSMIDOS: Elementos genticos extracromosmicos
pequeos, la mayora son circulares dsDNAccc y
superenrrollados (Excepto: Borrelia y algunos actinomicetos que
son lineales).
Tamao: 1-2Kpb hasta 500Kpb e incluso megaplsmidos de
1600Kpb (Rhizobium).

ELEMENTOS GENTICOS NO CROMOSOMALES
Nmero de copias por clula:
Grandes: 1 o 2 copias (Control
estricto de replicacin); los
pequeos de 10 hasta 100
copias (Control relajado de
replicacin).

PLSMIDOS:
No son indispensables para la viabilidad
No determinan productos esenciales para el crecimiento
Ventajas selectivas: resistencia a antibiticos y metales
pesados, factores de virulencia.
Plsmidos sin rasgo fenotpico Crpticos

Pueden o no ser transferibles:
Conjugativos: autotransferibles Conjugacin
No conjugativos
Movilizables: por accin de un plsmido conjugativo
coexistente.
Curacin: espontnea o inducida



ELEMENTOS GENTICOS NO CROMOSOMALES
PLSMIDOS
Replicacin de los plsmidos: Theta
uni o bidireccional (Gram -) y circulo
rodante (Gram+). Replicacin
autnoma.

ELEMENTOS GENTICOS NO CROMOSOMALES
PLSMIDOS
Incompatibilidad (Inc): Una sola bacteria puede contener
diferentes tipos de plsmidos (Ejemplo ms de 10). La capacidad
de dos plsmidos de replicarse en la misma clula est
controlada por genes plasmdicos Inc que controlan la
replicacin del DNA. Cuando un plsmido se transfiere a una
bacteria que ya tiene otro, el 2 plsmido puede perderse
Incompatibilidad o relacionados entre s.

ELEMENTOS GENTICOS NO CROMOSOMALES
PLSMIDOS
Episoma plasmido que es capaz de existir integrado o no al
cromosoma, cuando esta integrado la replicacin est bajo
control del cromosoma




ELEMENTOS GENTICOS NO CROMOSOMALES
o Elementos genticos contenidos en dos genomas
separados se juntan en una unidad.
o Intercambio fsico de material gentico entre elementos
genticos.
o Recombinacin general u homloga: intercambio
gentico entre secuencias homlogas de dos orgenes
diferentes (aunque puede ocurrir en el mismo
cromosoma).




RECOMBINACIN
TIPOS DE PLSMIDOS Y SU IMPORTANCIA BIOLGICA
Plmidos determinantes de patogenicidad: estos plsmidos
aumentan la virulencia de las bacterias.
Factores Col: Bacteriocinas, colicinas, marscesinas, piocinas,
pesticinas. protenas letales para otras bacterias del mismo
gnero o especies relacionadas.
Plsmidos degradantes: contienen genes que codifican
enzimas que catabolizan sustancias muy diversas (tolueno,
alcanfor, salicilatos, etc.). Ejemplo: Pseudomonas putida,
pseudomonas multivarans.
Otros plsmidos estafilocccicos poseen genes que
confieren resistencia a los antimicrobianos, a iones metlicos
pesados (Hg
+
), produccin de enterotoxinas (SAg) y
hemolisinas.




ELEMENTOS GENTICOS NO CROMOSOMALES
PLSMIDOS ARTICIFIALES
VECTORES DE CLONACIN.
Propiedades:
Pequeo tamao, fcil de aislar y
manipular
DNA circular
Replicn
Genes adicionales introducidos in
vitro
Mltiples copias
Presencia de marcadores de
seleccin
Ejemplo: pBR322 replica en E. coli
ELEMENTOS GENTICOS NO CROMOSOMALES
CONJUGACIN BACTERIANA
CONJUGACIN BACTERIANA
Ejemplo Plsmido F: Codifica protenas para el ensamblaje
del pili sexual.

CONJUGACIN BACTERIANA
Ejemplo Plsmido F.
El Factor Sexual o Factor F: Las clulas
F
-
pueden adquirirlo por conjugacin =
F
+
, por lo tanto, F
+
x F
-
= F
+
.

CONJUGACIN BACTERIANA
Ejemplo Plsmido F.
El Factor Sexual o Factor F: integrado al cromosoma y
generar clulas Hfr.
CONJUGACIN BACTERIANA
Ejemplo Plsmido F.
El Factor Sexual o Factor F: Las cepas Hrf no siempre son
estables y a veces el factor F se disocia del cromosoma y
dan cepas F
+
, pero ocasionalmente la disociacin es
anmala y trae consigo un fragmento del cromosoma y
genera el factor F. F x F
-
se denomina sexduccin.

CONJUGACIN BACTERIANA
TRANSFORMACIN BACTERIANA
TRANSFORMACIN BACTERIANA
TRANSFORMACIN BACTERIANA
Dentro de la clula una protena
especfica protege el ADN de las
nucleasas, hasta que alcanza el
cromosoma, donde es sustituida por la
protena RecA y el ADN se integra por
un proceso de recombinacin.

Replicacin del DNA heterodplex
(una molcula de DNA parental y una
de DNA recombinante).

Las bacterias tambin se pueden
transformar con ADN extrado de un
virus bacteriano en vez de originarse de
otra bacteria, mediante el proceso
denominado transduccin.

TRANSDUCCIN BACTERIANA
Transferencia de genes realizada por un bacterifago.
TRANSDUCCIN BACTERIANA
Transduccion generalizada se puede transferir
cualquier marcador del donador. La transduccin
generalizada se produce slo como consecuencia de
infecciones lticas. El ADN de la bacteria donadora es
introducido en la partcula transductora suele ir sin
acompaamiento de ADN del propio fago. Por ello, a
esta peculiar partcula consistente en cpside del fago
que encierra slo ADN de la bacteria se la denomina
pseudovirin.

TRANSDUCCIN BACTERIANA
Transferencia de genes realizada por un bacterifago.
TRANSDUCCIN BACTERIANA
Transduccin especializada slo se transfieren marcadores
cromosmicos cercanos al sitio de integracin del ADN
del fago (profago) en la clula lisognica; se produce
nicamente como consecuencia de la induccin de la
clula lisognica por escisin del profago y consiguiente
entrada a fase ltica, productora de nuevas partculas de
fago; el ADN genmico de la bacteria transportado por la
partcula transductora va unido a ADN del fago; la clula
transductante se suele convertir en lisognica para el fago
correspondiente.
TRANSDUCCIN BACTERIANA
Transferencia de genes realizada por un bacterifago.