DETERMINACIN DE PERMANGANATO DE POTASIO (KMnO4) EN ANTISPTICOS PARA ACUARIOS POR ESPECTROFOTOMETRA UV-VIS.

OBJETIVOS: Aplicar los conocimientos adquiridos de espectrofotometra durante el curso prctico de Anlisis Instrumental, mediante el diseo de un protocolo experimental, para poder cuantificar algn analito de inters de manera correcta y adecuada una muestra problema. Conocer el proceso de estandarizacin del KMnO4 y su realizacin, por medio de la valoracin de este con cido Oxlico (C2H2O4), para poder utilizarlo como patrn primario. Cuantificar KMnO4 en antispticos para acuario, por medio de la preparacin de una curva de calibracin. INTRODUCCIN: Un mtodo espectrofotomtrico est basado en la medida directa de la absorcin de radiacin electromagntica por parte de una muestra, cuantificable a travs de la Absorbancia, y la correlacin de esta variable con la concentracin de la especie de inters en dicha muestra. Todo analito molecular tiene la capacidad de absorber ciertas longitudes de onda caractersticas de la radiacin electromagntica. En este proceso, la radiacin es transferida temporalmente a la molcula y, como consecuencia, disminuye la intensidad de la radiacin. Dicha disminucin, debida a la absorcin experimentada por el analito, puede ser cuantificada utilizando diversas magnitudes, siendo la Absorbancia, A, la ms comnmente utilizada en la espectrofotometra de UV-VIS. Dicha Absorbancia se define por la expresin:

donde A es la Absorbancia, P0 la potencia del haz de radiacin incidente y P la potencia de dicho haz tras atravesar la muestra. Ley de Beer De acuerdo con la ley de Beer, la Absorbancia est relacionada linealmente con la concentracin de la especie absorbente, c, y con la longitud de la trayectoria de la radiacin en el medio absorbente o camino ptico, b. Esto es:

donde a es una constante de proporcionalidad llamada absortividad. Cuando la concentracin c se expresa en moles por litro, y b en centmetros, la constante de proporcionalidad se denomina absortividad molar, y se designa por el smbolo e, y, puesto que la Absorbancia es una magnitud adimensional, tendr unidades de L cm-1 mol-1. En este caso, la ley de Beer adquiere la forma:

Un espectro de absorcin es una representacin grfica de la Absorbancia de un analito (o de otra magnitud equivalente) en funcin de la longitud de onda de la radiacin, l, (o de otro parmetro relacionado con la energa de la radiacin utilizada). El mximo de Absorbancia obtenido en el espectro de absorcin de un analito, nos dar la longitud de onda que proporciona la mayor sensibilidad posible, y por tanto ser la que se utilizar en el anlisis espectrofotomtrico de dicho analito. Todas las disoluciones que presentan color, absorben radiacin electromagntica perteneciente al espectro visible, el cual puede dividirse en varias zonas segn se muestra en la tabla siguiente:

En dicha tabla, la columna del "color" indica la porcin del espectro que es absorbida, mientras que la correspondiente al "color complementario" indica la porcin de radiacin electromagntica que no absorbe la muestra y que por tanto es transmitida a travs de ella y puede ser captada por el ojo humano (color de la disolucin). En dicha tabla, la columna del "color" indica la porcin del espectro que es absorbida, mientras que la correspondiente al "color complementario" indica la porcin de radiacin electromagntica que no absorbe la muestra y que por tanto es transmitida a travs de ella y puede ser captada por el ojo humano (color de la disolucin). Para llevar a cabo el anlisis cuantitativo de una especie mediante la espectroscopa de absorcin molecular, es preciso realizar una etapa previa de calibracin. En dicha etapa se mide la Absorbancia de varias muestras de concentracin conocida, las cuales sern utilizadas para, mediante "comparacin", calcular la concentracin de una muestra problema tras medir su Absorbancia.

Para llevar a cabo la etapa de calibracin, se representa la Absorbancia de las muestras de concentracin conocida (llamadas patrones) a la longitud de onda de mxima Absorbancia, frente a la concentracin de dichas muestras. De esta manera se obtiene la Curva de Calibracin. Segn la ley de Beer, el resultado obtenido ser una lnea recta, cuya expresin matemtica puede ser obtenida mediante un tratamiento de ajuste estadstico por mnimos cuadrados. Un patrn primario es un reactivo que cumple las caractersticas que se enumeran a continuacin y permiten por tanto la obtencin de disoluciones de concentracin perfectamente conocida sin ms requisito que el conocimiento de la masa exacta de reactivo empleada. 1.- El reactivo debe tener alta pureza (>99.9%). 2.- Su composicin debe corresponder exactamente a su frmula. 3.- Debe ser estable a temperatura ambiente, sin cambiar su composicin con el secado o con el aumento de temperatura. 4.- No debe absorber agua ni CO2 de la atmsfera. Si es posible, es mejor no utilizar sustancias que contienen agua de cristalizacin porque, a veces (no siempre), este tipo de sustancias se deshidrata parcialmente en el transcurso del tiempo. 5.- El peso molecular debe ser alto, para minimizar as el error en la pesada. Desafortunadamente, el nmero de sustancias que pueden utilizarse como patrones primarios es muy restringido. Por ello normalmente las disoluciones del valorante se preparan en una concentracin aproximada, y su concentracin exacta se determina por estandarizacin frente a un patrn primario. Para ello se pesa una determinada cantidad de patrn primario, se disuelve completamente en el erlenmeyer y se valora con la disolucin de valorante a estandarizar. El KMnO4 es un oxidante fuerte de intenso color violeta. En disoluciones fuertemente cidas de pH 1.0 se reduce a Mn2+ incoloro. MnO4- + 8H+ + 5e- Mn2+ + 4H2O E = 1.507v En disolucin neutra o alcalina el producto de reduccin es el slido MnO2, de color pardo. MnO4- + 4H+ + 3e- MnO2 + 2H2O E = 1.692v En disolucin fuertemente alcalina (NaOH 2M), se produce ion manganato, de color verde. MnO4- + 1e- MnO4-2 E = 0.56v El KMnO4 no es un patrn primario, porque siempre contiene trazas de MnO 2. Adems el agua destilada contiene diversas impurezas orgnicas para reducir algo de MnO4- recin disuelto a MnO2. Para preparar una disolucin stock de 0.02M, se disuelve la cantidad necesaria de KMnO4 en agua destilada, hervir durante una hora para acelerar la reaccin del MnO4- con las posibles impurezas orgnicas, y filtrar la solucin resultante a travs de una placa de vidrio poroso, para eliminar el MnO2 que haya precipitado. El reactivo se guarda en una botella de vidrio mbar. Las disoluciones acuosas de KMnO4 son inestables debido a la reaccin 4MnO4- + 2H2O 4MnO2 + 3O2 + 4OH-

Que es lenta en ausencia de MnO2, calor, luz, cidos y bases. Hay que preparar y estandarizar soluciones recin diluidas a partir de la solucin stock de 0.02M usando agua, que se destil aadiendo algo de KMnO4 y NaOH. El KMnO4 se puede estandarizar valorndolo con Oxalato sdico (Na2C2O4). Disolver en H2SO4 1M oxalato sdico, previamente secado (105 C, 2 horas), y tratar con el volumen necesario de la disolucin de KMnO4, a temperatura ambiente. Despus calentar la disolucin a 55-60 C, y acabar la valoracin aadiendo lentamente KMnO4. Restar el valor del blanco, para tener en cuenta la cantidad necesaria de valorante (normalmente una gota) para teir la solucin de color rosa. 2MnO4- + 5H2C2O4 + 6H+ 2Mn2+ + 10CO2(g) + 8H2O En tratamientos ictiolgicos, el KMnO4 puede retirar parsitos externos y bacterias de los peces y algas en una dosis de 2mg/l. Se debe de tener en cuenta la cantidad de materia orgnica en el agua y el pH, debido a que puede resultar en toxicidad o precipitacin de MnO2 en las agallas de los peces. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL. Preparacin de Soluciones y Sistemas. 1.1 Soluciones. Agua Destilada. Solucin de H2SO4 [1 M]. Se toman con pipeta graduada 5.42ml de reactivo analtico de y se afora a 100ml con agua destilada. Solucin Patrn o Estndar de Permanganato de Potasio KMnO 4. Se pesan con exactitud 158.03 mg o 0.15803 gr de KMnO4 y disolver en 50ml de H2SO4 [1 M] (Solucin A). Se toman 4ml de la Solucin A y se aforan a 50ml de Agua destilada (Solucin B). Solucin Problema. Soluciones antispticas para Acuario Permaseptic. Preparacin de Solucin Patrn o Stock de KMnO4. Hervir durante una hora para acelerar la reaccin del MnO4- con las posibles impurezas orgnicas. Filtrar la solucin resultante a travs de un filtro de fibra de vidrio poroso, para eliminar el MnO2 que haya precipitado. El reactivo se guarda en una botella de vidrio mbar. Estandarizacin de la Solucin Patrn o Stock de KMnO4 con cido oxlico (H2C2O4). Disolver en 4ml de H2SO4 1M cido oxlico (31.67mg), previamente secado (105 C, 2 horas). Tratar con el volumen necesario de la disolucin de KMnO4, a temperatura ambiente (90-95%).

Despus calentar la disolucin a 55-60 C, y acabar la valoracin aadiendo lentamente KMnO4, hasta el punto final de la valoracin (la solucin toma un color rosado plido que dura 1 minuto).

Preparacin de la Curva de Calibracin Sistemas Blanco 1 2 3 4 5 6 7 Problema Sol. de H2SO4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 Sol. Problema. 0 0 0 0 0 0 0 0 v Sol. Patrn de KMnO4. 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 2.0 3.0 0 Aforo con agua destilada. 10 10 10 10 10 10 10 10 10 Tabla 1.- Curva de Calibracin. Todos los volmenes son en ml. El volumen v de la muestra se propone de acuerdo a la intensidad de color mostrado de los estndares preparados, y de la misma muestra. En caso necesario se puede diluir la muestra. Obtencin del espectro de Absorcin. Realizar la calibracin del instrumento de acuerdo a instructivo anexo y siguiendo las indicaciones de las asesoras. Con el sistema 5 que es el ms concentrado en relacin al analito de inters (KMnO4) tomar las lecturas del espectrofotmetro de Absorbancia (Abs) y porcentaje de transmitancia (%T) en el intervalo de 400 a 600 nm con incrementos de 10 en 10 nm. Con los datos obtenidos se procede a graficar el espectro de absorcin del KMnO4. Por ltimo se indica la longitud de onda ptima que seleccionara para cuantificar el KMnO4. Nota: por cada cambio de se debe calibrar nuevamente el equipo. Lectura de la Curva de Calibracin. Seleccione la ptima y calibre el espectrofotmetro como se le indico anteriormente. Una vez calibrado el equipo obtenga las lecturas de todos los sistemas (18) inicie con el sistema ms diluido hasta terminar con el ms concentrado, enjuagando la celda con el sistema siguiente. Para realizar la curva de calibracin se debe de calcular primero la concentracin de KMnO4 en cada sistema y se grafica contra el valor de las absorbancias que les corresponde. Una vez hecho esto, se procede a interpolar en la curva la concentracin en las muestras problema por medio de su Absorbancia.

Resultados.
Longitud de Onda (nm) Absorbancia 400 0.007 410 0.002 420 0.002 430 0.007 440 0.011 450 0.021 460 0.032 470 0.054 480 0.087 490 0.118 500 0.153 510 0.182 520 0.209 530 0.218 540 0.215 550 0.185 560 0.142 570 0.104 580 0.063 590 0.035 600 0.023

Tabla 2.- Espectro de Absorcin. Longitud de Onda ptima: 530 nm

Sistema 1 2 3 4 5 6 7 Problema Concentracin (ppm) 3.2870 6.5750 9.8610 13.1480 16.4351 32.8702 49.3053 ---------Absorbancia 0.034 0.084 0.117 0.174 0.216 0.474 0.696 0.512 %Transmitancia 92.4 82.4 76.4 67.0 60.0 33.6 20.2

Tabla 3.- Datos obtenidos de la Curva de Calibracin.

0.25

0.2

Absorbancia

0.15

0.1

0.05

0 400410420430440450460470480490500510520530540550560570580590600610620630640650 Longittud de Onda (nm)

Figura 1.- Espectro de Absorcin

Figura 2.- Sistemas preparados para la Curva de Calibracin.