CONCLUSIONES

PONTIFICIA UNVERSIDAD CATÓLICA DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
ESCUELA DE CIENCIAS BIOLOGICAS
Laboratorio de biología
Practica # 4
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
INTEGRANTES: Juan Jiménez
David Navarrete
Franco Poma
Introducción:
En los seres vivos las reacciones químicas ocurren gracias a la presencia de

enzimas, puesto que son estas quienes regulan la velocidad de dichas reacciones.
Las enzimas tienen la capacidad de afectar a la velocidad con la cual se produce una
reacción química por medio de la energía de activación.
El sustrato al ser formado puede reducir la energía de activación de las reacciones,
cuando este se descompone forma el producto y así el catalizador queda libre para
reaccionar con otra molécula de sustrato.
Las enzimas también se caracterizan por ser altamente especificas esto quiere decir
que catalizan una sola reacción química, factores como la temperatura y el PH pueden
afectar su actividad.
Objetivos:
 Tener la capacidad de reconocer una enzima específica.

 Conocer y darnos cuenta lo especificas que son las enzimas.
 Poder conocer y diferenciar la actividad enzimática que poseen las bacterias
con la actividad enzimática que poseen los animales.
METODO
EJERCICIO No 1
FORMACIÓN Y DETECCIÓN DE BENZOQUINONA
 Se rotuló 3 tubos de ensayo de la siguiente forma: 1a, 2b, 3c.

 Se marcaron líneas en cada tubo de ensayo a 1cm y 2cm desde la base.
 Se llenó cada tubo de la siguiente forma:
Tubo 1a: 1cm de catecol oxidasa
1cm de solución de catecol.
Tubo 1b: 1cm de catecol oxidasa
1cm de agua destilada
Tubo 1c: 1cm de agua destilada
1cm de solución de catecol al 1%
 Se mezcló el contenido de los tubos, y se procedió a anotar el color de cada
tubo en el tiempo “0” en la tabla 1
 Se colocó los tubos en baño maría a 40°C
 Se tomó lectura de el color de los tubos a los 5, 10, 15 minutos y además se
anotó la intensidad de los colores de cada tubo en una escala del 1 al 5,
tomando como referencia que el color a los 15 minutos representa la intensidad
5 y el color al tiempo 0 segundos representa la intensidad 0
 Estos tubos se guardaron para utilizarlos en el ejercicio2.
EJERCICIO No 2
ESPECIFICIDAD ENZIMÁTICA
 Se rotuló 3 tubos de ensayo: 2a, 2b, 2c igual se marcó líneas a 1cm y 2cm
desde la base del tubo.
 Se llenó cada tubo de la siguiente forma.
Tubo 1a: 1cm de catecol oxidasa

1cm de solución de catecol al 1%.
Tubo 1b: 1cm de catecol oxidasa
1cm de hidroquinona al 1%
Tubo 1c: 1cm de catecol oxidasa
1cm de agua destilada
 Se mezcló el contenido de los tubos y se registró la intensidad del color de
cada tubo en tiempo 0 de acuerdo con los estándares del primer ejercicio.
 Se colocó los tubos en baño maría a 40°C y se registró la intensidad de su
color a los 5 y 10 minutos.
EJERCICIO No 3
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA EN BACTERIAS
 Se tomó un cultivo de E. coli y uno de B. subtilis en agar almidón.

 Con el gotero se colocó lugol sobre los cultivos de ambas bacterias.
 Se observó lo que sucedía y se registró cual de las dos bacterias posee la
enzima amilasa para metabolizar el almidón.
EJERCICIO No 4
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA EN ANIMALES.
 Se marcó dos tubos de ensayo A y B.

 A los dos tubos se los marcó con 3 líneas a 1cm, 2cm y 3cm desde la base.
 Al tubo A se lo rotuló CH (catalasa de hígado) y al tubo B CC (catalasa de
corazón).
 Se colocó peróxido de hidrógeno al 1% en los dos tubos hasta la línea de 1cm
 Se colocó catalasa de hígado y catalasa de corazón respectivamente en los
tubos hasta la marca de 2cm, y se observó la producción de burbujas.
 Para detener la reacción se colocó ácido sulfúrico (H2SO4) luego de 5 minutos.
RESULTADOS.
EJERCICIO No1
TABLA No 1
FORMACIÓN Y DETECCIÓN DE BENZOQUINONA
TIEMPO Tubo 1a Tubo 1b Tubo 1c

0 naranja blanquecino Incoloro
5 rojo/naranja blanquecino Incoloro
10 rojo claro blanquecino Incoloro
15 rojo intenso blanquecino incoloro
TABLA No 2
ESCALA DE INTENSIDAD DE COLOR
INTENSIDAD Tubo No Color del producto

0 1b,1c 0
5 1a 5
EJERCICIO No2
TABLA No 3
ESPECIFICIDAD DE LA ENZIMA CATECOL-OXIDASA
Intensidad de color relativa en la escala 0-5
TIEMPO Tubo 2a Tubo 2b Tubo 2c

0 3 1,00 0,5
5 4 1,25 0,5
10 4 1,50 0,5
EJERCICIO No 3
CULTIVO DE E. COLI EN AGAR ALMIDÓN CON LUGOL
CULTIVO DE B. SUBTILIS EN AGAR ALMIDÓN CON LUGOL.
Se observó que la bacteria B. subtilis posee la enzima amilasa para metabolizar el

almidón y la E. coli carece de esta enzima.
EJERCICIO No 4
CATALASA DE HIGADO con peróxido de H 1% CATALASA DE

CORAZÓN con peróxido de H 1%
Se observó que la reacción de la catalasa de hígado con peróxido de hidrógeno al 1%

produjo una mayor cantidad de burbujas que la reacción de catalasa de corazón con
peróxido de hidrógeno al 1%.
CONCLUSIONES.-
Se pudo observar la acción de las enzimas sobre las diferentes reacciones que
realizamos, y su acción tan específica. Además de su aceleración de las reacciones
mediante el calor.
De igual manera se pudo observar cómo reaccionan los cultivos de escherichia coli y
B.subtilis ante almidón y cual cultivo posee las enzimas necesarias.
Las enzimas son muy específicas, no todos los organismos pueden metabolizar los
mismos nutrientes.
DISCUSION.-
Las enzimas trabajan solo con ciertas reacciones específicamente, las enzimas son
altamente específicas debido a su estructura molecular. Y todo esto se demostró en
esta práctica.
De igual manera la acción de las enzimas de las bacterias al metabolizar el almidón.
Aunque no se pudo observar claramente cómo trabajan las enzimas se puede uno dar
cuenta de que están presentes y que son muy importantes para el metabolismo de los
seres vivos.
CUESTIONARIO.-
1.-Defina:
Sustrato: átomos o moléculas que son los reactivos de una reacción química
catalizada por enzimas.
Complejo enzima: es el que forman una enzima y la molécula sobre la que esta
actúa, realizando la enzima un cambio molecular en su sustrato. Ejemplo enzima:
hexocinasa sustrato: glucosa. Enzima: lactato deshidrogenasa sustrato: acido láctico.
Sitio activo: región de la superficie de una enzima donde se une con el sustrato y
tiene lugar la reacción
Energía de activación: es la energía necesaria para obligar a las capas electrónicas

de los reactivos a juntarse antes de la formación de los productos (debe añadirse para
que las moléculas reaccionen entre sí)
2.- ¿Qué tipo de gas se desprende en la reacción del punto 7?’

Debido a la acción de la enzima catalasa, el agua oxigenada o peróxido de hidrógeno
agregado se transformará en agua y oxígeno. El desprendimiento de oxígeno se pone
de manifiesto como un intenso burbujeo.
3.- ¿Cuál de los órganos presenta más catalasa?

En el hígado, ya que presenta la función desintoxicante y necesita la catalasa para su
descomposición del peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua. El peróxido de
hidrógeno es un residuo del metabolismo celular y su función es protector contra
microorganismos patógenos, principalmente anaerobios.
4.- ¿Cómo se relaciona la cantidad de catalasa producida con la función

principal de cada uno de los órganos?
Tiene mayor función al romper las moléculas de peróxido, necesita una mayor
cantidad de catalasa para no consumir mucha energía rompiendo éstas moléculas.
5.- Existen otras enzimas presentes en las preparaciones. ¿Por qué esta
presencia no afecta a los resultados?
Si, están presentes pero no afectan ya que las enzimas son especificas y catalizan
solamente una reacción química.
6.- ¿Cuál es la temperatura óptima para la actividad de la catecolasa?

A una temperatura de 0 - 65º C, porque el peróxido de hidrógeno inactiva la Catalasa,
ésta a su vez cataliza rompiendo la molécula (H2O2), por lo que se puede decir que la
actividad inicial es más rápida a temperaturas altas, y la capacidad total es más
grande al reducir las temperaturas.

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FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES

ESCUELA DE CIENCIAS BIOLOGICAS

INTEGRANTES: Juan Jiménez

En los seres vivos las reacciones químicas ocurren gracias a la presencia de

 Tener la capacidad de reconocer una enzima específica.

FORMACIÓN Y DETECCIÓN DE BENZOQUINONA

 Se rotuló 3 tubos de ensayo de la siguiente forma: 1a, 2b, 3c.

Tubo 1a: 1cm de catecol oxidasa

ACTIVIDAD ENZIMÁTICA EN BACTERIAS

 Se tomó un cultivo de E. coli y uno de B. subtilis en agar almidón.

ACTIVIDAD ENZIMÁTICA EN ANIMALES.

 Se marcó dos tubos de ensayo A y B.

FORMACIÓN Y DETECCIÓN DE BENZOQUINONA

TIEMPO Tubo 1a Tubo 1b Tubo 1c

INTENSIDAD Tubo No Color del producto

ESPECIFICIDAD DE LA ENZIMA CATECOL-OXIDASA

Intensidad de color relativa en la escala 0-5

TIEMPO Tubo 2a Tubo 2b Tubo 2c

CULTIVO DE E. COLI EN AGAR ALMIDÓN CON LUGOL

CULTIVO DE B. SUBTILIS EN AGAR ALMIDÓN CON LUGOL.

Se observó que la bacteria B. subtilis posee la enzima amilasa para metabolizar el

CATALASA DE HIGADO con peróxido de H 1% CATALASA DE

Se observó que la reacción de la catalasa de hígado con peróxido de hidrógeno al 1%

De igual manera la acción de las enzimas de las bacterias al metabolizar el almidón.

Energía de activación: es la energía necesaria para obligar a las capas electrónicas

2.- ¿Qué tipo de gas se desprende en la reacción del punto 7?’

3.- ¿Cuál de los órganos presenta más catalasa?

4.- ¿Cómo se relaciona la cantidad de catalasa producida con la función

6.- ¿Cuál es la temperatura óptima para la actividad de la catecolasa?

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