Hidrólisis de Las Grasas Por La Lipasa Pancreatica

UNIVERSIDAD SAN IGNACIO DE LOYOLA
FACULTAD DE INGENIERA
PRCTICA N 7
HIDRLISIS DE LAS GRASAS POR LA LIPASA PANCREATICA
Bloque: FC-PREAGR04A1M
Profesor: LOAYZA GUTIERREZ, LILLYAN TERESA
ALUMNOS:
CUSTODIO OSCCO, HAMMER DAVID

LEIVA CASTRO , BRIGGITH
PIMENTEL CORDOVA, UZIEL ABIDAN
SOLLIER BUJAICO, RENGERK
TELLO ZEGARRA, ROSSY
TINTAYA CORTEZ, KAREN YOSSELINE
LIMA PER
2015-01
PRACTICA N 7
HIDRLISIS DE LAS GRASAS POR LA LIPASA PANCREATICA
I.
INTRODUCCIN
La lipasa pancretica es una enzima que acta sobre los triglicridos, los lpidos ms
importantes de la dieta, hidrolizndolos a diglicridos, monoglicridos y cidos grasos.
Su actividad se mide titulando con una base (NaOH 0.1N) los cidos grasos liberados. En
consecuencia, a mayor acidez, mayor gasto en titulacin y mayor actividad enzimtica. La accin
de la enzima se ve potenciada por las sales biliares, que transforman las grasas en pequeas
micelas.
El jugo pancretico contiene adems diversas enzimas para la digestin de lpidos, llamadas
lipasas. Entre las principales lipasas pancreticas destacan la triacilglicerol hidrolasa, el
colesterol ster hidrolasa y fosfolipasa A2.
II. OBJETIVOS:
a) Evaluar la actividad de la lipasa pancretica por titulacin.
b) Evidenciar el efecto de las sales biliares.
III. MATERIALES:
Materiales:
de
Sales biliares al 1%
pancreatina (extracto de
6 matraces de 50 ml de
Solucin
al
2%
enzimas pancreticas)
capacidad.
Tampn fosfato 0.2M de
5 pipetas de 5 ml.
pH 8
NaOH 0.1 N
fenolftalena
Bao Mara a 37C
Aceite
vegetal
neutralizado
IV. PROCEDIMIENTO
Disponer tres tubos de ensayo de la siguiente manera:
5 ml de sales
biliares
2 ml de aceite
neutro
TUBO 1
1
2 ml de tampn
fosfato 0.2M de
pH8
2 ml de aceite
neutro
TUBO 2
1
TUBO 3
2 ml de agua
destilada
Sales biliares
2 ml de tampn
fosfato 0.2M de
pH8
2 ml de agua
destilada
2 ml de agua
destilada
Agitar fuertemente. Observar y tomar nota del aspecto de cada uno. Incubar en bao mara a
37C por 5 minutos
Tomando nota exacta del tiempo y con 5 minutos de intervalo, aadir a cada tubo 5 ml de
solucin de pancreatina, colocndolos inmediatamente en el bao mara para continuar la
incubacin por 45 minutos.
Titular cada tubo con NaOH 0.1N (usar 2 gotas de fenolftalena como indicador).
V. RESULTADOS
Tubo 1
1.3 mL
Tubo 2
0.85 mL
Tubo 1
Tubo 3
0.6 mL
Tubo 2
NxV= #Eq.
0.1xV= #Eq.
0.1x (1.3-0.6) = #Eq.
0.045 = #mEq.
0.07 mEq 45 min
X .1 min
.5 mL
Y .1 mL
NxV= #Eq.
0.1xV= #Eq.
0.1x (0.85-0.6) = #Eq.
0.025 = #mEq.
0.025 mEq 45 min
X ..1 min
.5 mL
Y .1 mL
VI. CUESTIONARIO
1.
Qu producto de la accin de lipasa es el responsable del

viraje de color de la fenolftalena?
El viraje de color de la fenolftalena a un color rosado se debe
a que la solucin ha alcanzado un pH entre 8.8 -9.0
aproximadamente. Este cambio de pH se da por la titulacin
con soda. Sin embargo, indirectamente, seran los cidos
grasos liberados por la accin de la lipasa los causantes de
hacer virar el color, dado que la titulacin se realiza
especficamente para hallar la cantidad de nmeros
equivalentes, sean cidos o bsicos, presentes en la
solucin., En la hidrlisis de los triacilglicridos, principales
componentes de los lpidos de la dieta, durante la digestin
en el lumen intestinal, gracias a la actuacin de la lipasa,
enzima que se sintetiza en el pncreas y que cada vez que
llega alimento al intestino se vierte como constituyente del
jugo pancretico. La reaccin que tiene lugar se denomina
saponificacin y es contraria a la esterificacin que tiene
lugar cuando los triacilglicridos se forman a partir de

glicerina y cidos grasos. Una vez que acta la lipasa y se
produce la hidrlisis (saponificacin), la glicerina y los cidos
grasos quedan libres como tales y liberan H+, produciendo
un descenso del pH cuya magnitud depende de que el medio
este tamponado o no. el indicador cambia de color como
consecuencia del paso de pH de cido a base.
2.
Si quisiera determinar el Km de la lipasa pancretica, cmo

tendra que modificar esta prctica? Fundamente su
respuesta.
La Km nos da una idea la afinidad que tiene el enzima por su
sustrato, cuanto mayor es Km menor es la afinidad
(predominan las formas E y S libres), cuanto menor es Km
mayor es la afinidad (predomina la forma ES),
La velocidad se podra calcular mediante la produccin de

cidos grasos (AG), y se sabe que el Km es la concentracin
del sustrato a la cual se obtiene la mitad de la velocidad
mxima. Ya que tambin se podra hallar la concentracin del
sustrato.
CONCLUSIONES
En esta prctica se observa la digestin en el

intestino delgado, teniendo como actores a las sales
biliares y a la pancreatina que atacan al aceite.
Nos damos cuenta de la importancia que representan

las sales biliares en el alto rendimiento de la
pancreatina en la catlisis de los alimentos que
consumimos, ya que por s solas pueden degradar
dicho alimento pero no de una forma eficiente.
En el intestino se agregan las lipasas, que es el jugo

intestinal, y se absorben los nutrientes.
Entre otros indicadores, consideramos que la

fenolftalena es el mejor indicador.
A diferencia de la pancreatina la lipasa lingual y las

estomacales no dependen de las sales biliares.
VI. BIBLIOGRAFA
http://docsetools.com/articulos-utiles/article_106580.html
.

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Tampn fosfato 0.2M de

Bao Mara a 37C

Qu producto de la accin de lipasa es el responsable del

lugar cuando los triacilglicridos se forman a partir de

Si quisiera determinar el Km de la lipasa pancretica, cmo

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