Radioinmunoensayo

-
El RIA forma parte de un conjunto de tcnicas inmunoqumicas analticas de

laboratorio que usan la conjugacin de antgenos y anticuerpos para la
cuantificacin de una sustancia determinada, que en este caso puede ser tanto un
antgeno (usualmente una hormona) como un anticuerpo, usando para la medicin
una molcula como marcador (Istopo radioactivo).
La tcnica se basa en la gran especificidad y afinidad que tienen

los anticuerpos por sus antgenos.
La sustancia objeto de anlisis puede ser tanto un anticuerpo
como
un antgeno, que pueden ser aquellos que estn presentes en el
cuerpo naturalmente, que el cuerpo produce pero no estn
tpicamente, o aquellos que naturalmente ni siquiera existen en el
cuerpo.
Los anticuerpos poseen una alta especificidad y afinidad para un
antgeno especfico.
Una gran especificidad del inmuno-complejo unido a la sensibilidad
de los mtodos radiolgicos hacen que esta prueba sea muy
exacta y precisa.
Un hapteno (molcula que por s sola no tiene capacidad de
producir una respuesta inmune pero si tiene especificidad por un
anticuerpo) es combinado con un coadyuvante (molcula con
capacidad de producir anticuerpos) y se produce un antgeno
completo con capacidad de generar complemento.
1 RIA (Radioinmunoa ssay)
Permite la cuantificacin exacta de compuestos biolgicos

presentes en el organismo en concentraciones tan bajas como
nanogramos o picogramos.
-
El desarrollo de los inmunoensayos prcticos comenz en los aos 60

con la aplicacin de radioinmunoensayos (RIA) por Yallow y Berson
- RIA utilizan istopos radioactivos como marca (Figura 2-1), y la
concentracin de radioactividad medida indica la concentracin de
analito presente.
En pocas palabras: el anticuerpo o el antgeno se marcan con
radioactividad, y se usan en un formato no competitivo o competitivo.
- An se usan en la actualidad, particularmente para la

deteccin de
cantidades muy bajas de analitos. Sin embargo, debido a
las
complicaciones inherentes al manipuleo y desecho de los

materiales
radioactivos en el laboratorio clnico, RIA se usa con
menos frecuencia
que otro tipo diferente de inmunoensayo, denominado
inmunoensayo
enzimtico (EIA).
-
Se utiliza para detectar y cuantificar sustancias que se encuentran en

cantidades muy pequeas y mezcladas con muchas otras. Es por tanto
una tcnica muy sensible y muy especfica. Utilizando anticuerpos de
gran afinidad se pueden detectar hasta picogramos de antgeno
El fundamento es muy sencillo:
- Se mezcla una cantidad constante de antgeno marcado

radioactivamente y una cantidad constante de un anticuerpo para
ese antgeno.
- Se produce la reaccin entre antgeno (Ag) y anticuerpo (Ac).
- se separa la fraccin de antgeno que se ha unido de la que
permanece libre (hay varias formas de hacerlo. En la figura inferior
se utiliza un 2 anticuerpo dirigido contra el primero) se determina
la radioactividad.
- Si la muestra contiene adems antgeno fro (no marcado), ste
competir con el marcado para unirse al anticuerpo, y se
observar un descenso en la medida de la radioactividad.
- Este descenso es proporcional a la concentracin de antgeno fro
en la muestra.
En ausencia de antgeno fro

(no radioactivo), todos los
complejos Ag-Ac sern
radioactivos. La
radioactividad medida es
mxima.
En presencia de antgeno fro

(no radioactivo), ste compite
con el antgeno radioactivo
para unirse al anticuerpo. Por
tanto la radioactividad medida
es menor. El descenso es
proporcional a la
concentracin de Ag fro
presente en la muestra.
Se construye una curva de calibrado

(color rojo) que relacione la medida de
radioactividad (cpm) con la concentracin
de antgeno fro en la muestra
Si se realiza el ensayo con una muestra
Referencias.
http://www.alergomed.org/uploads/1/0/0/2/10021998/lectura_prctica__inmunoensayos_1.pdf
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/inmunoquimica.pdf
http://www.ehu.eus/biomoleculas/isotopos/ria.htm
http://mesa54dinmuno.blogspot.mx/2009/05/tecnicasinmunologicas.html

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El RIA forma parte de un conjunto de tcnicas inmunoqumicas analticas de

La tcnica se basa en la gran especificidad y afinidad que tienen

1 RIA (Radioinmunoa ssay)

Permite la cuantificacin exacta de compuestos biolgicos

El desarrollo de los inmunoensayos prcticos comenz en los aos 60

- An se usan en la actualidad, particularmente para la

complicaciones inherentes al manipuleo y desecho de los

Se utiliza para detectar y cuantificar sustancias que se encuentran en

El fundamento es muy sencillo:

- Se mezcla una cantidad constante de antgeno marcado

En ausencia de antgeno fro

En presencia de antgeno fro

Se construye una curva de calibrado

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