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    Recuento Microbiano

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    Pao Morante
    Este documento describe diferentes métodos para contar microbios en una muestra, incluyendo métodos directos como el recuento microscópico en cámara de Neubauer y el recuento en placa, y métodos indirectos como la turbidimetría, nefelometría y el número más probable. Explica cómo funcionan estos métodos para cuantificar el crecimiento microbiano y la biomasa celular en una muestra clínica o de bioproceso.

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    Recuento Microbiano

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    Pao Morante
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    Este documento describe diferentes métodos para contar microbios en una muestra, incluyendo métodos directos como el recuento microscópico en cámara de Neubauer y el recuento en placa, y métodos indirectos como la turbidimetría, nefelometría y el número más probable. Explica cómo funcionan estos métodos para cuantificar el crecimiento microbiano y la biomasa celular en una muestra clínica o de bioproceso.

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    recuento microbiano

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    Este documento describe diferentes métodos para contar microbios en una muestra, incluyendo métodos directos como el recuento microscópico en cámara de Neubauer y el recuento en placa, y métodos indirectos como la turbidimetría, nefelometría y el número más probable. Explica cómo funcionan estos métodos para cuantificar el crecimiento microbiano y la biomasa celular en una muestra clínica o de bioproceso.

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    de 20

    RECUENTO MICROBIANO

    La determinacin del crecimiento microbiano


    y/o biomasa celular dentro de una muestra
    clnica, de un bioproceso u otras, constituye
    una etapa muy importante para la evaluacin de
    su cintica de crecimiento, de all que el
    conocimiento de las diferentes posibilidades de
    cmo ejecutarlas es de sumo inters dentro de
    la formacin en microbiologa

    METODOS DE RECUENTO MICROBIANO

    METODOS
    DIRECTOS

    METODOS
    INDIRECTO
    S

    Cmara de
    Neubauer

    Turbidimetria

    Recuento en
    Placa
    Filtracin
    Numero mas
    probable (NMP)

    Nefelometria

    RECUENTO
    MICROSCPICO
    EN CAMARA DE
    NEUBAUER

    El hemocitmetro o cmara de Neubauer

    Se introduce la suspensin de clulas en el hemocitmetro

    La regin de recuento del hemocitmetro

    Si 10 clulas promedio por cuadrcula


    En las 25 sern 250 clulas
    Si estas 250 en 0.1 mm3 entonces en 1 mm3
    habrn 2500 clulas
    En con secuencia, en 1000 mm3 (= 1 mL) un
    total de 2.5 x 106 clulas/mL
    Desventajas:
    El mtodo no sirve para cultivos
    poco densos, celulas mviles.
    Frecuentemente es necesario teir

    RECUENTO EN PLACA
    Se determina el nmero de
    microorganismos en una muestra en
    relacin a las colonias que forman, las
    UFC (Unidades Formadoras de
    Colonias). Se emplean soluciones
    diluidas o diluciones de una muestra
    concentrada para que cada colonia
    formada provenga de un solo
    microorganismo
    aunque
    algunas
    agrupaciones no pueden ser separadas
    por las diluciones. Se utilizan
    principalmente para la cuantificacin de
    bacterias,
    levaduras
    y
    hongos
    filamentosos. Se reporta como:
    UFC ****/unidad de volumen o peso

    RECUENTO EN PLACA

    Antes de la siembra, el cultivo debe diluirse para obtener 30-300 UFC en

    MTODOS DE SIEMBRA
    Siembra en superficie o en camada

    Siembra por incorporacin o placa vertida

    FILTRACIN
    La membrana de celulosa retiene a los microorganismos
    en su malla con poros de 0.25-0.45mm. Esta membrana
    se transfiere a un medio de cultivo para el desarrollo de
    colonias.

    METODO POR FILTRACION

    Mtodo estadstico basado en series de diluciones y calculo estadstico del


    numero de bacterias presentes en las diluciones mas altas

    Tabla NUMERO MAS


    PROBABLE

    METODOS INDIRECTOS
    TURBIDIMETRIA

    Mediciones del crecimiento microbiano


    Medicin de la densidad o masa celular:
    - por turbidez, mediante un espectrofotmetro.

    Este mtodo requiere la preparacin de un estndard que relacione el


    nmero de clulas con la turbidez.
    Es problemtico para muestras de organismos que forman agregaciones
    o biofilms. Se suele realizar agitacin.

    SISTEMA NEFELOMTRICO DE MAC FARLAND

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