Hematología Forense 325

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HEMATOLOGA FORENSE

Por Alejandra Contreras La Hematologa (hema=sangre, logo=estudio), es el estudio de la sangre. La hematologa forense comprende dos ramas: Hematologa Reconstructora. Hematologa Identificadora. Hematologa Reconstructora. A travs del estudio meticuloso de las imgenes sanguneas se podr obtener una informacin precisa de la forma en que se han producido los hechos. Se podr determinar posicin de la vctima y del agresor, los movimientos realizados en el sitio de suceso, caractersticas del traumatismo y violencia empleada, intensidad del traumatismo, arma empleada, movimientos ejecutados con ella. En recintos cerrados se inspeccionar cuidadosamente las entradas, salidas, techos, muebles, sospechosos, cadveres. En recintos abiertos se puede encontrar manchas de sangre en arbustos, piedras, pastos, hojas, en la tierra, etc. - Clasificacin de Manchas Sanguneas.La clasificacin de manchas sanguneas se basa en su mecanismo de produccin. 1. Manchas de sangre por contacto: El contacto puede ser simple, por ej.: las manchas de sangre de las ropas que estn en contacto directo con la herida. El contacto puede ser por limpiamiento, ej.: al proceder a la limpieza de manos, armas, etc., las manchas aparecen en los objetos utilizados para ello (papeles, paos, gneros, etc.) 2. Las manchas de sangre por arrastre:

Se producen cuando la vctima se arrastra o es arrastrada. 3. Manchas de sangre por escurrimiento: Cuando el desplazamiento se hace sobre un soporte inclinado se forma el escurrimiento; cuando el soporte es horizontal o presenta depresiones la sangre forma charcos. El soporte puede estar constituido por el cuerpo, suelo o piso, murallas, ropas, etc. 4. Manchas de sangre por proyeccin: Se producen cuando la sangre es proyectada en forma violenta sobre el soporte. Si la mancha de sangre proyectada al soporte se presenta en forma de imgenes aisladas y de disposicin irregular, constituyen las salpicaduras, distinguindose en ellas salpicaduras gruesas y finas. En general, las salpicaduras gruesas corresponden a la contusin repetida sobre una superficie sangrante. Las salpicaduras finas se observan generalmente en la mano del suicida que se dispara sobre la sien. La rociadura se produce cuando la fuente productora se desplaza linealmente frente al soporte, ej.: herida arterial y movilizacin de segmentos corporales o armas ensangrentadas. 5. Manchas de sangre por goteo de altura: Se produce al caer la gota sangunea desde la fuente productora hasta el soporte, impulsada por la fuerza de gravedad. La imagen producida tomar caracteres especiales de acuerdo a la altura, al desplazamiento y detenciones del herido y a la inclinacin del soporte. A medida que la fuente productora se va alejando del soporte, la forma de la gota sufre variaciones progresivas en su contorno; de muy poca altura el contorno es regular; a medida que se aleja, el contorno se va haciendo irregular, luego presenta salientes en forma de rayos y, posteriormente, se aprecia rodeada de gotas secundarias. El desplazamiento del herido produce un contorno especial que se acenta con la velocidad: la gota aparece de forma ovalada y con digitaciones (pata de oso) que se acentan transformndose en proyeccin. Estas digitaciones o proyecciones indican la direccin del desplazamiento (la punta ms fina y alargada de la gota muestra el lugar hacia donde se dirige el herido). En el caso de soporte vertical, por lo general la gota ser de contorno con radiaciones regulares, pudindose observar un escurrimiento vertical desde la gota. 6. Manchas de sangre por Impregnacin: Se produce cuando la mancha de sangre traspasa la textura del soporte. Por ejemplo, En casos de violacin. 7. Manchas de sangre por Limpiamiento: Se produce cuando hay tentativa de limpiado o se observa el enjuagado de un soporte. - Forma y Posicin de las Manchas. El dimetro de una mancha de sangre slo tiene valor en la estimacin de la distancia de cada cuando ste es inferior a 1,5 metros. Ms all de este valor, la variacin en el dimetro es demasiado reducida como para ser confiable. El aspecto de los bordes de la macha slo es verdadero cuando se tienen en cuenta las caractersticas de la superficie sobre la que ha cado la sangre. Son vlidas las correlaciones entre manchas desconocidas y patrones, slo si se usan idnticas superficies de impacto. Cuando ms burda y spera es la superficie, mayor es la posibilidad de que la gota se rompa.

Cuando las gotas caen perpendicularmente sobre una superficie lisa y horizontal a una distancia menor de 50 cm. su forma es circular con los bordes lisos. Cuando la altura esta comprendida entre los 50 y 100 cm. los bordes ya se presentan en forma festoneada; a una altura entre 100 y 150 cm. los mismos son ms aguzados, producindose proyecciones radiales (o gotas satlites) a una mayor altura. Cuando las gotas caen verticalmente sobre un plano liso y oblicuo, las manchas se alargan, tanto ms cuanto ms agudo sea el ngulo de cada. Su forma, en cambio, no depende de la altura ni del volumen de la gota. La relacin longitud/anchura de la gota permite calcular con aproximacin suficiente cual ha sido el ngulo de cada. 8. Color de las Manchas de Sangre. Una mancha seca, pero relativamente fresca, es de un color rojo intenso y de aspecto brillante. El brillo desaparece bajo la accin de la luz solar, calor y diferentes condiciones atmosfricas hacindolas de aspecto polvoriento, deslustradas, resquebrajadas y ms plidas. Sobre tejidos, el brillo es a menudo menos visible. Estudio del Soporte.Soporte: Es toda superficie donde se encuentran las manchas de sangre (cuerpo, ropas, suelo, murallas, vidrios, etc.). Las manchas de sangre por contacto tendrn particularidades especiales atendiendo a la permeabilidad e impermeabilidad del soporte.

Hematologa Identificadora.Es la rama de la hematologa forense que se ocupa de identificar sangre. Los procedimientos empleados estn destinados a investigar si es sangre, a qu especie pertenece y en lo posible su individualidad. a) Pruebas de Orientacin.-

Tienen valor como ensayos de orientacin, pero no aseguran la presencia de sangre. Se realizan no solamente cuando hay suficiente cantidad de muestra, para no dificultar la realizacin de las pruebas de certeza, especificidad y tipificacin de grupo. Los ensayos preliminares son pruebas rpidas y basadas en la actividad de la peroxidasa que posee el grupo hemo de la hemoglobina de la sangre y que, en presencia de agua oxigenada y de ciertos reactivos orgnicos dan lugar a la aparicin de coloraciones o luminiscencia que orientan sobre la posible existencia de sangre en las muestras analizadas. Si el resultado de los ensayos preliminares es negativo, la mancha no contiene sangre en cantidades detectables como para permitir su posterior anlisis. Si el resultado es positivo, se requiere continuar con los ensayos para confirmar su presencia. Dentro de los ensayos preliminares, los ms conocidos son: Investigacin de la catalasa de Vandervelde o hemasa de Senter.- Conocida tambin con el nombre de reaccin de Schoenbein, se basa en el principio en que el agua oxigenada es descompuesta fcilmente por un fermento que se encuentra en la materia colorante de la sangre. El oxgeno puesto en libertad remonta a la superficie en forma de pequeas burbujas formando una espuma blanquecina. Este fermento se llama catalasa o hemasa. Reaccin de Thevenon-Roland.- Color violeta, da esta reaccin si es positiva. Su reactivo se compone de una solucin alcohlica acuosa de piramidn a las que se agregan unas gotas de cido actico, lo que facilita la reaccin (alcohol .50 gramos; piramidn 2.50 gramos) Reaccin de Adler.- Reactivo: Solucin saturada de bencidina en alcohol de 96 o en cido actico. Se utiliza agua destilada y unas gotas de agua oxigenada. Se altera pronto, siendo preferible prepararla en el momento de su uso. La coloracin violeta es al instante, puesta en contacto con la sangre. Las reacciones preliminares pueden dar falsos positivos; es decir, resultados positivos producidos por sustancias diferentes de la sangre, como por ejemplo: Sales de cobre y nquel Interfieren slo en soluciones concentradas. Una coloracin dbil aparece antes del agregado de agua oxigenada y se intensifica lentamente despus del mismo. La reaccin es todava incompleta a los 15-20 minutos. -Pruebas de la Certeza Son ensayos especficos que certifican la existencia de sangre en la mancha investigada. Mtodos Cristalogrficos.Consisten en la preparacin y observacin microscpica de cristales obtenidos por accin de ciertos reactivos sobre la hemoglobina de la sangre. Entre los ms conocidos tenemos: 1. La prueba de Teichmann.- Consiste en la cristalizacin caracterstica del Clorhidrato de hematina (hemina), bajo la forma de cristales rombodricos de color caf, utilizando cido actico glacial con vestigio de cloruro de sodio. Esta prueba da buenos resultados an con manchas antiguas y con muy pequea cantidad de sangre.

2. La prueba de Takayama.- Es especfica y esta basada en la obtencin de los cristales de piridina-hemocromgeno como consecuencia de la accin del reactivo sobre la hemoglobina de la sangre, presente en la muestra. El reactivo consiste en una mezcla de piridina, solucin saturada de glucosa y solucin de hidrxido de sodio. Los cristales obtenidos son de color rosado Mtodos Microespectroscpicos.Consiste en observar el espectro de absorcin de la oxihemoglobina, con un microscopio provisto de un ocular microespectroscpico, en lugar del ocular corriente. Cuando la muestra de sangre es fresca, el mtodo no ofrece problemas siempre que se disponga de la cantidad suficiente; pero si la mancha es antigua, la hemoglobina se habr transformado parcialmente en metahemoglobina, hematina y hemocromgeno. Cada una de estas sustancias da un espectro de absorcin caracterstico, dificultando la observacin. Actualmente este mtodo ha sido desplazado por los mtodos cristalogrficos. c) Pruebas de Especificidad.Una vez realizadas las pruebas confirmatorias de sangre, debe efectuarse la investigacin del origen humano o de otra especie al cual pertenece la muestra. Hay factores que pueden afectar la posibilidad de asegurar el origen de la sangre. Entre los ms importantes son: antigedad de la mancha, accin del sol, humedad, putrefaccin desarrollo de hongos, altas temperaturas, lavado y la naturaleza de la superficie en la que se encuentra la sangre. Existen dos formas de realizarlas: 1. Fsicas o microscpicas.- La presencia de glbulos rojos en una muestra ha sido de valor ya que el tamao y la morfologa de los mismos difieren entre ciertas especies. Los glbulos rojos del hombre, como los de caso todos los mamferos, son circulares y sin ncleo, a excepcin de los del camello y otros relacionados, como los de la llama, que son ovales, pero tambin sin ncleo. Las aves, reptiles y peces, poseen glbulos rojos nucleados y de mayor tamao que el de los humanos. Mediante estos datos es posible constatar que la sangre en cuestin no puede pertenecer a determinadas especies, quedando las mismas excluidas. 2. Biolgicas o Inmunolgicas.- Consiste en una reaccin antgeno-anticuerpo, y como la misma se visualiza con la obtencin de un precipitado, se conoce con el nombre de ensayo de las precipitinas. Desde el principio de esta centuria, se sabe que es posible distinguir la sangre de diferentes animales por medio de sueros precipitantes. Tipificacin de Manchas de Sangre.Tipificar una mancha de sangre, es encontrar su tipo o grupo dentro de la mayor cantidad posible de sistemas y es fundamental para llegar a la individualizacin. En sangre fresca, la presencia o ausencia de un antgeno, se determina por la aglutinacin o no de los glbulos rojos puestos en contacto con un antisuero especfico.

En manchas de sangre seca los glbulos rojos estn generalmente destruidos y, por lo tanto, las tcnicas de aplicacin directa no son aplicables; sin embargo los antgenos no se desnaturalizan inmediatamente y retienen la capacidad de combinarse con anticuerpos especficos (mtodos indirectos). Es muy probable que queden en la escena del delito manchas de sangre; si se comprueban que las mismas no pertenecen a la vctima, su estudio es muy importante para localizar al criminal. Por otra parte, si en ropas u objetos pertenecientes a un sospechoso, se encuentran manchas de sangre diferente a la suya y coincidente con la de la vctima, sera una prueba ms de culpabilidad. No podrn sacarse conclusiones valederas si hay semejanza entre los grupos sanguneos de sospechoso y vctima, ya que alegar el primero que la sangre es suya. Los sistemas o grupos sanguneos ms aprovechables son los siguientes: Sistema ABO: En el cual se manifiestan cuatro grupos sanguneos: "A", "B", "AB", y "O". Sistema MN: En este grupo se consideran tres combinaciones posibles: "MN", "M" y "N". Sistema Rh: Los antgenos presentes en este sistema son: D, C, E, c, e, que constituyen el factor Rh (que segn la combinacin de sus tres alelos, ser positivo o negativo). 1. Factores que Pueden Afectar los Resultados Entre los factores que pueden influir en obtener un resultado incorrecto, tenemos: la antigedad de la mancha, la naturaleza del sustrato sobre el cual se encuentra, las condiciones a la que estuvo expuesta, cantidad de muestra, etc. La antigedad de la mancha es de fundamental importancia en lo que respecta a la investigacin de anticuerpos. Estos son muy poco estables, por lo que su estudio en el laboratorio debe ser lo ms rpido posible. No se deben manipular las muestras con las manos sin guantes, ya que los antgenos del Sistema ABO se encuentra, adems, en las secreciones: sudor, semen, saliva, lgrimas, etc. en la mayora de los individuos. Estos son los llamados "secretores". Solo un 20% aproximadamente no manifiestan esta propiedad, que son los individuos "no secretores". Otro factor importante es la contaminacin bacteriana de la muestra. Desafortunadamente no todos los sistemas conocidos de agrupamiento de sangre son tiles en su aplicacin forense. Algunos son inestables o se deterioran luego de varios das o semanas. Adems, factores tales como el calor, luz solar directa, humedad y embalado inadecuado de la evidencia, disminuyen de una u otra forma la posibilidad de llegar a un resultado efectivo. 2. Parte o Regin de donde Procede La Sangre.Se trata de estudiar los caracteres regionales de la sangre humana. En primer lugar se estudiar si la forma y la posicin de las manchas estn o no en contraposicin con la explosin dada. El examen microscpico suministra a veces los escasos datos que se posee para establecer el diagnstico regional de la sangre. As por ejemplo, la mancha sangunea sea menstrual si se encuentra clulas epiteliales uterinas o de la mucosa vaginal. Ser "epistaxis" si va acompaada de clulas epiteliales de pestaas vibrtiles (fosas nasales). Ser "melena" cuando la sangre va acompaada de materia fecal. En la "hemoptisis" la sangre va en forma de salpicaduras muy finas, producidas por la tos. Y es "hematemesis" cuando la sangre es de origen gstrico (en ocasiones acompaadas de alimentos).

Determinar si las manchas que se encontraron son de sangre. La apariencia de la sangre puede variar segn: . Temper tur . Luz. Hume .

Los anlisis qumicos y microscpicos son necesarios para identificar la sangre positivamente. Forma de los Rastros Sanguneos.1. Sangre en herida por arma blanca Caractersticas Especficas: r t t e Ter er r . me t .

te - pu

Empapada en Ropas. Empapada en cabello. Seca. Hmeda. e u .

2. Sangre en herida por arma de fuego Caractersticas: Seca-Hmeda-Gel. Contaminada. Restos metlicos. Presencia plvora. Otros restos orgnicos. Existencia fibras

3. Sangre como Evidencia Presente en el Sitio del Suceso, vctima o victimario puede presentarse en distintas formas siendo las ms usuales: Charco. Salpicadura. Chorro. Huellas por escurrimientos. Huellas por deslizamiento. Huellas ensangrentada. Manchas por absorcin. Manchas referidas a maniobras de limpieza. Proyeccin y apualamiento

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