TECNICAS Citologicas
TECNICAS Citologicas
TECNICAS Citologicas
UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE BIOANÁLISIS
REGIÓN VERACRUZ
CATEDRÁTICA:
FECHA:
Práctica No. 1
* FUNDAMENTO:
El microscopio como su nombre lo indica, es un instrumento
óptico que amplifica la imagen de un objeto pequeño, las imágenes
microscópicas pueden aumentar de 100 a 2000 veces el tamaño
original. No obstante, la función más importante del instrumento no es
solo ver los objetos pequeños sino interpretar lo que se ve, debido a
esto, el empleo del microscopio exige más que en ningún otro caso, un
gran conocimiento del instrumento y su adecuado manejo para lograr
imágenes amplificadas con la menor cantidad posible de defectos
ópticos y el logro de contraste adecuado.
El microscopio es el instrumento que más se usa en los
laboratorios que estudian imágenes pequeñas. Actualmente existen
dos tipos de microscopios: el óptico y el electrónico. En el microscopio
óptico el aumento del objeto se consigue usando un sistema de lentes
que manipula el paso de los rayos de luz entre el objeto y los ojos. El
microscopio electrónico utiliza un rayo de electrones controlado por un
campo magnético. A nivel del laboratorio, en donde el Químico Clínico
desempeña su principal función, el microscopio es un instrumento
fundamental de trabajo, por lo anterior, se considera necesario que en
la formación del Químico Clínico se ponga principal interés en su
enseñanza.
El microscopio compuesto es un instrumento óptico que se emplea
para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no
visibles a simple vista. El microscopio óptico común está conformado
por tres sistemas:
a. El sistema mecánico está constituido por una serie de piezas en
las que van instaladas las lentes que permiten el movimiento
para el enfoque.
b. El sistema óptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de
tal manera que produce el aumento de las imágenes que se
observan a través de ellas
c. El sistema de iluminación comprende las partes del microscopio
que reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria
para efectuar la observación a través del microscopio.
La parte mecánica del Microscopio
* MATERIAL:
Microscopio Compuesto de campo claro.
* METODOLOGÍA:
MICROSCOPIO COMPUESTO
* OBSERVACIONES Y RESULTADOS:
Práctica No. 2
* FUNDAMENTO:
demostrado que el uso del PAP no sólo es útil en la detección del cáncer en la
citología ginecológica sino en otros tipos de patologías.
* MATERIAL:
• Mesa de exploraciones.
• Espejo vaginal estéril y sin lubricantes.
• Guantes estériles.
• Citobrush, espátula de Ayre o hisopo sin algodón.
• Citospray o alcohol de 96º.
• Laminillas portaobjetos.
• Lápiz diamante.
* METODOLOGÍA:
* OBSERVACIONES:
* ESQUEMAS
Frotis de Papanicolaou
El examen de Papanicolaou es un
procedimiento simple y relativamente
económico que puede detectar con facilidad
condiciones cancerosas o precancerosas.
Práctica No. 4
* FUNDAMENTO:
El estrato basal está formado por una sola capa de células de tipo cilíndrico
dispuestas en empalizada sobre la membrana basal. Las células germinativas
(aquellas cuya función es producir células de la especie) son redondas u
ovaladas, con núcleo grande, ovalado y central, que ocupa gran parte de la
célula. El proceso de regeneración del epitelio se efectúa a partir de esta
capa celular, el resto de los estratos representan etapas del proceso de
maduración y diferenciación celular para, finalmente, descamarse en la
superficie.
El estrato parabasal está compuesto de varias capas de células
redondeadas o poliédricas, de núcleo central, citoplasma grueso, con
puentes intercelulares (estrato espinoso profundo).
El estrato intermedio también presenta puentes intercelulares (estrato
espinoso superficial) y está formado, por numerosas capas de células
aplanadas, con citoplasma rico en glucógeno, núcleos relativamente
pequeños, centrales y vesiculosos.
El estrato superficial consta de varias capas de células aplanadas grandes,
de forma poligonal, de citoplasma delgado y claro, sin puentes intercelulares
y con núcleo picnótico central. El epitelio escamoso tiene la capacidad de
exfoliar diversos tipos celulares según el grado de maduración alcanzado.
Habitualmente las células que se exfolian provienen de los estratos
superiores, a menos que existan úlceras o que la muestra se tome con
excesiva energía. Los tipos celulares del epitelio escamoso que se
reconocen en el extendido citológico son los siguientes:
Células superficiales:
Las células exfoliadas del estrato superficial miden 40 a 60 micrones de
diámetro. Son aplanadas, delgadas, de contorno generalmente poligonal. La
mayoría de ellas tienen citoplasma eosinófilo, pero puede ser cianófilo. El
núcleo es central, circular y pequeño, mide menos de 6 micrones de
diámetro. Es picnótico, denso, homogéneo y no se reconoce en él estructura
cromatínica.
Células intermedias:
Las células exfoliadas del estrato intermedio son del mismo tamaño o
ligeramente menores que las superficiales. Tienen forma redondeada o
poligonal, algunas con el borde plegado, el citoplasma es algo más grueso
que el de las células superficiales, generalmente basófilo, pudiendo ser
eosinófilo. El núcleo es central, redondo y mide alrededor de 8 micrones; la
cromatina nuclear tiene disposición reticular.
Existen algunas variedades de células intermedias. Las células intermedias
superficiales son más grandes y poligonales que las células intermedias
profundas, que tienen un contorno más ovalado. Las células naviculares
presentan dos extremos aguzados que le confieren la forma de un bote; por
su contenido de glucógeno, su citoplasma puede aparecer vacío y el núcleo
desplazado hacia un borde.
Células parabasales:
En el frotis normal de una mujer en edad fértil no constituyen más del 5% de
las células exfoliadas del epitelio pavimentoso. Miden 15 a 25 micrones, son
generalmente redondeadas, con citoplasma grueso cianófilo. El núcleo es
central, redondo o elíptico, con un diámetro mayor que el de las células
intermedias; la cromatina se dispone en forma de finos gránulos. Las células
básales prácticamente no aparecen en los frotis.
* MATERIAL:
* Microscopio
* Aceite de inmersión
* Laminillas fijadas y teñidas por la técnica de Papanicolaou.
* METODOLOGÍA:
* OBSERVACIONES:
RESULTADOS:
Se observó la morfología cervicovaginal normal, lo cual es muy importante
para poder diferenciar entre las células normales y las células malignas. El
conocimiento detallado de la morfología celular normal nos ayuda para que
un momento dado podamos establecer la diferencia entre una célula normal
y una célula maligna, de acuerdo a las características morfológicas de las
células.
Práctica No. 6
* FUNDAMENTO:
* Fuman
* Presentan infecciones por VPH.
* Tienen más de un(a) compañero(a) sexual
* Tienen relaciones sexuales por primera vez a una edad muy
temprana
* Tienen deficiencias de vitaminas y mala nutrición
* MATERIAL:
* Microscopio
* Aceite de inmersión
* Laminillas fijadas y teñidas por la técnica de Papanicolaou.
* METODOLOGÍA:
* OBSERVACIONES:
RESULTADOS:
Displasia leve:
Flora bacteriana cocoide (+ +).
Reacción inflamatoria (+ +).
Eritrocitos (+ +).
Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de Displasia Leve,
asociada a infección por VPH y Gardnerella vaginalis.
Papanicolaou Negativo Clase III.
NIC I.
LIE Bajo grado.
Displasia moderada:
Flora bacteriana cocoide (+ +).
Reacción inflamatoria (+ + +).
Lectura hormonal no fue posible.
Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de displasia moderada.
Papanicolaou Negativo Clase III.
NIC II.
Practica No. 7
* FUNDAMENTO:
*Alteraciones de la célula:
Las células cancerosas exfoliadas presentan variaciones en el tamaño
(anisocitosis) y en la forma (polimorfismo), la que en ocasiones puede ser
muy anormal, como en las células en forma de fibra o de raqueta. El
citoplasma puede ser cianófilo (signo de menor diferenciación), pudiendo
presentar características de diferenciación anómala (queratinización intensa
o gran acumulación de mucus en una gran vacuola que desplaza al núcleo
hacia la periferia). Pueden presentar numerosas mitosis; siendo el hallazgo
más importante, pero poco frecuente, las mitosis atípicas.
* MATERIAL:
* Microscopio
* Aceite de inmersión
* Laminillas fijadas y teñidas por la técnica de Papanicolaou.
* METODOLOGÍA:
* OBSERVACIONES:
* RESULTADOS:
Cáncer In situ:
Flora bacteriana cocoide (+ +).
Reacción inflamatoria (+ + +).
Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de hipercromasia,
pérdida de la relación núcleo-citoplasma, que integran el diagnóstico de
Cáncer Epidermoide In situ asociado a infección por VPH.
Papanicolaou Positivo Clase IV.
LIE Alto grado.
NIC III.
Cáncer invasor:
Flora bacteriana mixta (+ +).
Reacción inflamatoria (+ +).
Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de hipercromasia,
pleomorfismo, pérdida de la relación núcleo-citoplasma, células fibroideas y
células en raqueta, que integran el diagnóstico de Cáncer Epidermoide
invasor.
Papanicolaou Positivo Clase V.
Práctica No. 5
* FUNDAMENTO:
* MATERIAL:
* Microscopio
* Aceite de inmersión
* Laminillas fijadas y teñidas por la técnica de Papanicolaou.
* METODOLOGÍA:
* OBSERVACIONES:
VPH HERPES
* RESULTADOS:
VPH
Flora bacteriana mixta +++
Rx. Inflamatoria ++
Lectura hormonal no posible
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por VPH
Papanicolaou negativo. Clase II. LIE bajo grado.
HERPES
Flora bacteriana mixta ++
Rx. Inflamatoria +++
Lectura hormonal no posible
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por infección viral (herpes)
Papanicolaou negativo. Clase II
Gardnerella vaginalis
Flora bacteriana mixta ++
Rx. Inflamatoria ++
Índice de Frost 0/70/30= 68 de valor estrogénico
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por infección viral (herpes)
Leptothrix actynomices
Flora bacteriana mixta ++
Rx. Inflamatoria ++
Índice de Frost 0/100/0= 55 de valor estrogénico
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por Leptothrix actynomices
Papanicolaou negativo. Clase II
Cándida albicans
Flora bacteriana bacilar ++
Rx. Inflamatoria +
Índice de Frost 0/80/20= 64 de valor estrogénico
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por Cándida albicans
Papanicolaou negativo. Clase II
Trichomonas vaginalis
Flora bacteriana cocoide +++
Rx. Inflamatoria ++
Índice de Frost 0/40/60= 82 de valor estrogénico
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por T. vaginalis
Papanicolaou negativo. Clase II
Práctica No. 3
TINCIÓN DE PAPANICOLAOU
* FUNDAMENTO:
Manejo del material obtenido: El material, una vez fijado, puede ser
transportado a cualquier distancia en estuches que prevean su destrucción.
Las laminillas deben identificarse con nombre, fecha o número en un
extremo utilizando lápiz diamante. Se puede utilizar plomo si las láminas
tienen extremo mate.
* MATERIAL:
* Portaobjetos
* Aplicadores y espatulas
* Cubreobjetos
* Microscopio
* REACTIVOS:
* METODOLOGÍA:
* OBSERVACIONES:
* RESULTADOS:
Se obtiene una lámina perfectamente teñida por Papanicolaou, lista para ser
leída al microscopio.
Clase I: negativa
Clase II: atipias
Clase III: sospechoso
PRACTICA No. 10
CANCER BRONQUIAL
El cáncer bronquial constituye el 30% de todas las neoplasias del ser
humano. La mortalidad por cáncer bronquial ha aumentado en las últimas
décadas y en Chile se estima en 18 hombres y 5 mujeres por 100.000
habitantes. Afecta con mayor frecuencia a hombres de edad promedio 60
años. La frecuencia ha aumentado especialmente en mujeres y en estrecha
relación con el hábito de fumar. La sobrevida a un año del diagnóstico es de
20% y a los 5 años de 5%. Para los casos con tumor extirpable
quirúrgicamente puede aumentar a 35% a los 5 años.
ETIOLOGIA
hay que considerar factores ocupacionales, hereditarios, contaminación
ambiental y hábitos personales. Los trabajadores de industrias
convencionales y nucleares en que se utilizan sustancias químicas para la
manufactura de materiales, instrumentos, maquinarias, etc tienen mayor
incidencia de cáncer bronquial. En estas condiciones los trabajadores están
expuestos a radiaciones y sustancias tales como uranio, níquel, hierro
metálico, sales de cromo, óxidos de hierro, asbesto, arsénico, berilio, gas de
mostaza, etc. En el aire contaminado de las grandes ciudades se encuentran
además de los irritantes comunes, sustancias carcinógenas tales como 3,4-
benzopireno, 1,12-benzoperileno, óxido arsenioso, trazas de elementos
radiactivos, gases de aceite de petróleo, ozono, polvo de asbesto, trazas de
níquel, cromo, compuestos de arsénico, óxido de nitrógeno, formaldehído,
hidrocarburos aromáticos y alifáticos. Sin embargo, estos factores
LESIONES PRECURSORAS
Se consideran lesiones precursoras (precancerosas) de la mucosa bronquial :
hiperplasia de células basales y de células caliciformes, metaplasia
epidermoide, displasia y carcinoma in situ.
En la hiperplasia el epitelio esté engrosado (más de 50 µm), debido a un
aumento en el número de células basales, de células caliciformes o de
ambas. En la metaplasia epidermoide el epitelio respiratorio normal está
reemplazado por uno plano estratificado maduro. Se distinguen tres grados
de displasia: leve, moderado y avanzado, según la intensidad de las atipias y
la extensión de la distorsión arquitectural del epitelio. Las alteraciones
estructurales son estratificación, espesor irregular, reemplazo total o parcial
de las células normales por las atípicas y discontinuidades de la membrana
basal. En el carcinoma in situ las alteraciones citológicas e histológicas
mencionadas alcanzan su máxima expresión. Todo el espesor del epitelio
está reemplazado por células atípicas, habitualmente es un foco pequeño,
con irregularidades y discontinuidades evidentes de la membrana basal. En
la mucosa adyacente al carcinoma in situ hay frecuentemente signos de
displasia y metaplasia.
En casos de carcinoma bronquial manifiesto, en las zonas vecinas se
encuentran la hiperplasia y la metaplasia casi en el 90% de los casos,
displasia en alrededor del 40% y carcinoma in situ en 20-30%. El tiempo de
transformación calculado citológicamente para la fase displasia moderada-
carcinoma invasor es de 3,2 años.
PRACTICA 9
CANCER MAMARIO
El cáncer de mama, que por lo general se presenta en mujeres, es una
enfermedad en la que células malignas (cancerosas) crecen dentro del tejido
mamario.
- Estadio 0:
Es la forma más temprana que puede tener un cáncer de mama. Existen dos
- Estadio III:
Se divide en IIIA y IIIB.
IIIA
- El tumor mide menos de 5 cms. y existen metástasis en los ganglios de la
axila que provocan que se adhieran unos con otros, o a estructuras vecinas.
- El tumor mide más de 5 cms. y existen metástasis en los ganglios de la
axila.
IIIB
- El tumor ha invadido la piel o la pared del tórax (músculos o costillas).
- Existen metástasis en los ganglios que se encuentran detrás del esternón.
- Estadio IV:
El cáncer se ha extendido lejos de la mama y la axila, comprometiendo otros
órganos, frecuentemente los huesos, pulmones, hígado o cerebro.
Invasivo:
El cáncer se ha diseminado más allá de los conductos y ha llegado al tejido
circundante y más tarde a los ganglios linfáticos contiguos.
Metastásico:
Este cáncer se ha diseminado a otras regiones del organismo, como ganglios
linfáticos distantes, huesos, pulmones, hígado o cerebro.