Revista CENIC Ciencias Biolgicas, Vol. 40, No. 2, 2009.

Actividad antimicrobiana de Waltheria indica

y Acacia farnesiana.

Nidia M. Rojas Hernndez, Senovio Avellaneda Saucedo, Armando Cullar Cullar,* Beatriz Romeu
lvarez y Daysi Lugo Moya.
Departamento de Microbiologa y Virologa, Facultad de Biologa, Universidad de la Habana, calle 25 entre calles I y J, El
Vedado, Plaza de la Revolucin, Ciudad de La Habana. Correo electrnico: [email protected]. *Instituto de Farmacia
y Alimentos, Universidad de la Habana, Ciudad de La Habana, Cuba.

Recibido: 30 de abril de 2008. Aceptado: 27 de noviembre de 2008.

Palabras clave: Acacia farnesiana L., Waltheria indica L., actividad antimicrobiana, actividad antibacteriana, medicina tradicional.
Key words: Acacia farnesiana L., Waltheria indica L., antibacterial activity, antimicrobial activity, traditional medicine.

RESUMEN. Entre las plantas medicinales empleadas en Tierra Caliente, estado de Guerrero, Mxico, se encuentran el Ginar
(Waltheria indica L., Esterculiaceae) y el Huizache (Acacia farnesiana L. Willd, Mimosaceae). En ambas, la infusin de la raz
se usa popularmente para las diarreas. Con la finalidad de validar las propiedades que se les atribuyen a estas especies vege-
tales, el presente trabajo tuvo como objetivo evaluar la actividad antimicrobiana in vitro de los extractos acuosos y etanlicos
preparados con las races de ambas plantas. A estos extractos, se les determin el rendimiento de slidos solubles totales y se
les realiz el anlisis fitoqumico general. La actividad antimicrobiana se evalu frente a 25 cultivos bacterianos, dos cepas de
hongos filamentosos y 13 cepas de siete especies de levaduras del gnero Candida. En ambas plantas, los extractos etanlicos
tuvieron mayor actividad que los acuosos. Los extractos etanlicos de estas especies vegetales afectaron el crecimiento de siete
cepas bacterianas, lo cual correspondi al 28 % de los cultivos evaluados. Esta actividad fue bacteriosttica y bactericida para
los dos extractos, a los que se les determinaron las Concentraciones Mnimas Inhibitoria (CMI) y Bactericida (CMB) frente a los
cultivos sensibles. Solo se detect actividad antifngica por el extracto de W. indica sobre la cepa de C. utilis. La accin sobre
bacterias enteropatgenas in vitro valida el uso de estas plantas en medicina tradicional y reafirma la necesidad de estudios
toxicolgicos para asegurar la inocuidad de su uso.

ABSTRACT. Two of the medicinal plants used in Tierra Caliente, Guerrero State, Mexico, are Ginar (Waltheria indica L., Ester-
culiaceae) and Huizache (Acacia farnesiana L. Willd, Mimosaceae). The root infusion obtained from these plants has a popular
use against gastrointestinal diseases, mainly against diarrheas. The goal of this work was to evaluate the antimicrobial activity
in vitro of the water and ethanol extracts obtained from the roots of both plants, in order to confirm the traditional use of these
species. Total soluble solids and a general phytochemical analysis of the extracts were determined. Furthermore, the antimi-
crobial activity was evaluated against 25 bacterial isolates, two strains of filamentous fungi and 13 isolates of seven species of
Candida. For both plants, the ethanol extracts showed higher antimicrobial activity than the water extracts. Bacterial growth
of seven strains was affected in ethanol extracts, which represents 28 % of the bacterial isolates evaluated. The ethanolic extract
of W. indica had inhibitory activity against C. utilis. Some other antifungic activity was not found. For the isolates the minimal
inhibitory concentration (MIC) and the mininal bactericidal concentration (MBC) of the extracts were determined. The in vitro
action over enteropathogenic bacteria confirms the use of these plants in traditional medicine and supports the necessity of
toxicology studies in screening tests.

INTRODUCCIN tra ubicado en la parte Sur de la Repblica Mexicana y

Las plantas medicinales constituyen una importante representa el 3,3 % de la superficie del pas.6 La regin
fuente en la bsqueda de nuevos compuestos con activi- Tierra Caliente ocupa el noroeste de este estado. Parte
dades farmacolgicas a partir de productos naturales.1,2 de su abundante y variada vegetacin se emplea por
Actualmente en el mundo se realizan diversos trabajos sus pobladores para aliviar o curar sus enfermedades
destinados a respaldar cientficamente el uso emprico comunes, como diarreas, bronquitis, heridas etc.7 Sin
de las plantas en medicina natural, incluyendo su utili- embargo, existen muy pocos trabajos destinados a vali-
zacin con fines antimicrobianos.3,4 dar cientficamente las propiedades que se les atribuyen
Mxico es uno de los pases con mayor riqueza flors- en medicina tradicional a estas plantas. Waltheria indi-
tica en el mundo, con una antigua tradicin en el uso de ca L. (Esterculiaceae), conocida por el nombre comn
plantas medicinales.5 El estado de Guerrero se encuen- de Ginar, crece abundantemente en las sabanas de
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Guerrero y Michoacn. Los pobladores de esas zonas en Agar Sabouraud Glucosa (Oxoid) para las levaduras
utilizan su raz para el tratamiento de la diarrea, aunque y hongos filamentosos. Las placas se incubaron a 35 C
tambin suelen beber infusiones preparadas a partir de durante 24 h . Las concentraciones de los extractos para
sus hojas para aliviar la bronquitis.8 Las races de esta la CMI y la CMB fueron: 100; 50; 25; 12,5; 6,2; 3,1; 1,5; 0,75
planta se emplean en infusin en Tierra Caliente para y 0,4 mg mL1. Como control uno de los pocillos de cada
el tratamiento de las diarreas, al igual que las races de rplica por cepa microbiana se llen con etanol. Para la
Acacia farnesiana L. Willd, (Mimosaceae), (Huizache, determinacin de la CMB se utiliz el mtodo de dilu-
Gisache y Aroma). Ambas se emplean con el mismo fin, ciones dobles seriadas en caldo Meller-Hinton (Oxoid),
por 3 a 7 d segn una encuesta realizada en esta regin.8 con pases a medio slido 24 h despus de la inoculacin
El cocimiento del fruto y la raz de A. farnesiana se em- a 35 C .11 Como control positivo se utilizaron tubos con
plea contra la disentera en San Luis Potos.5 En otros caldo de cultivo sin extracto inoculados, y como control
estados mexicanos como Morelos, Chiapas, Veracruz, para el disolvente se usaron tubos con caldo inoculados
Oaxaca y San Luis Potos, emplean el extracto alcohlico a los cuales se les adicion el mismo volumen de etanol
para disminuir el edema,7 pero tambin se prepara un que el volumen de extracto empleado. Se realizaron tres
ungento con sus flores para aliviar el dolor de cabeza. rplicas por concentracin para cada cultivo.
Debido a la carencia de informacin cientfica sobre las
propiedades antimicrobianas de estas plantas, el obje- RESULTADOS Y DISCUSIN
tivo del presente trabajo fue caracterizar desde el punto El anlisis fitoqumico (Tabla 3) del extracto de W. in-
de vista fitoqumico los extractos acuosos y etanlicos dica, mostr reacciones dbiles para compuestos reduc-
preparados con las races de ambas plantas y evaluar tores, saponinas, quinonas, flavonoides, cardiotnicos y
su actividad antimicrobiana in vitro, para comprobar fenoles o taninos o ambos, mientras en los extractos de
la existencia de las propiedades que se les atribuyen en A. farnesiana la reaccin de triterpenos y esteroides y
medicina tradicional. de quinonas fue dbil, la de fenoles o taninos o ambos
fue media y la respuesta a la presencia de compuestos
MATERIALES Y MTODOS reductores fue fuerte. Rodrguez y cols.12 revelaron la
presencia de cuatro homoterpenos y el flavonoide far-
Material empleado nisina II en semillas de esta especie. Estos compuestos
Las plantas fueron colectadas en los meses de julio se han asociado a actividad antimicrobiana en otras
y agosto en los municipios de Tierra Caliente donde se plantas.13 La presencia de fenoles se ha demostrado en
recomendaron como medicinales. Se realizaron tres esta ltima especie,12 lo cual confirma los presentes re-
muestreos de forma aleatoria y cada muestra estaba re- sultados. No hay trabajos anteriores sobre la composicin
presentada por al menos diez plantas. Las partes recolec- fitoqumica de W. indica.
tadas fueron las utilizadas por la poblacin en medicina La presencia de saponinas en W. indica se pueden
tradicional, en este caso, correspondieron a la raz. relacionar con propiedades antinflamatorias, diurticas
y antimicrobianas.9 Las saponinas se pueden presentar
Procesamiento del material vegetal y preparacin de en las plantas como glicsidos, con un ncleo triterpe-
los extractos noide o esteroide o ambos.14 La presencia del alcaloide
Las muestras vegetales se secaron a la sombra entre ciclopptido en la especie Walteria douradinha15 no
25 y 30 oC y se redujeron a polvo en un molino manual. parece ser vlida para W. indica segn los resultados.
Con el material vegetal seco y molido se prepararon La carencia de otros estudios sobre la composicin fi-
extractos alcohlicos y acuosos.9 El extracto etanlico toqumica de esta especie vegetal no permite conocer
se prepar por extraccin continua con etanol en un los compuestos responsables de la dbil accin positiva
equipo Soxhlet durante ocho h con 75 mL de disolvente encontrada.
por cada 10 g de muestra. Se filtr y el primer extracto Los compuestos fenlicos constituyen uno de los
se concentr a sequedad en un evaporador rotatorio mayores grupos de metabolitos secundarios del reino
al vaco. El extracto acuoso se elabor con el residuo vegetal.9 Otros estudios plantean que los extractos de
vegetal del extracto etanlico de cada planta, despus plantas que son positivos a fenoles y taninos poseen
que se sec al aire y se macer durante 24 h con 35 mL actividad antimicrobiana.14 La presencia de estos com-
de agua destilada por cada 10 g de muestra, se calent puestos en los extractos de W. indica y A. farnesiana
a ebullicin y se filtr. Posteriormente, se concentr a sugiere que ellos pueden ser responsables de la actividad
sequedad. antibacteriana encontrada en este trabajo en los extrac-
Una alcuota de los extractos acuosos y etanlicos tos etanlicos de ambas plantas.
de cada planta, se llev a sequedad para determinar el Los compuestos reductores son metabolitos esen-
contenido de slidos solubles totales.9 Tambin a los ciales que suministran energa para el funcionamiento
extractos se les realiz un anlisis fitoqumico general9 celular de los vegetales, pero no parece haber ninguna
para detectar los grupos qumicos presentes. evidencia que relacione estos compuestos con la activi-
dad antimicrobiana.
Determinacin de la actividad antimicrobiana La concentracin de slidos solubles totales presen-
Los extractos alcohlicos y acuosos de cada planta se tes en los extractos etanlicos de ambas plantas es mayor
enfrentaron a 25 cultivos bacterianos (Tabla 1). a la de los extractos acuosos, con una relacin superior
Tambin se emplearon dos cepas de hongos fila- a 1,2 en ambas plantas (Tabla 4).
mentosos y 13 cepas del gnero Candida (Tabla 2). Con En el anlisis de la actividad antimicrobiana de los
posterioridad, se determinaron las Concentraciones extractos, se observ que el control de etanol no afect
Mnimas Inhibitoria (CMI) y Bactericida (CMB) de los el crecimiento de ninguno de los microorganismos. Los
extractos activos frente a las cepas microbianas. extractos acuosos son menos activos que los etanlicos
La CMI se determin por el minimtodo de difusin para cada planta, (Fig. 1) ya que los primeros inhibieron
radial10 con cortes de 6 mm de dimetro en monocapa de el crecimiento de dos cultivos con W. indica (lo cual
medio Agar Meller-Hinton (Oxoid) para las bacterias y corresponde al 8 % de cepas inhibidas) y una sola cepa
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Tabla 1. Cultivos empleados en la evaluacin de la actividad antibacteriana.

Cepas Origen Cepas Origen

Salmonella enterica (serovar Typhi) ATCC 7251 Enterobacter cloacae ATCC 23355
Salmonella enterica
ATCC 14028 Enterobacter aerogenes ATCC 13048
(serovar Typhimurium)
Salmonella enterica (serovar Enteritidis) ATCC 13076 Staphylococcus aureus ATCC 25923
Klebsiella pneumoniae ATCC 14056 Staphylococcus aureus ATCC 6538
Serratia marcescens ATCC 14056 Staphylococcus aureus ATCC 33862
Providencia sp. C -3450 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Alcaligenes faecalis ATCC 1460 Streptococcus pyogenes ATCC 19615
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Gluconacetobacter diazotrophicus Vegetal PAL-5
Escherichia coli ATCC 35150 Gluconacetobacter diazotrophicus Vegetal PM-18
Escherichia coli ATCC 8739 Micrococcus luteus ambiental
Shigella flexneri ATCC 12022 Bacillus subtilis ATCC 6633
Citrobacter freundii ATCC 8090 Bacillus subtilis ambiental
Citrobacter freundii ATCC 10625

Tabla 2. Cultivos fngicos empleados en la evaluacin antimicrobiana de los extractos etanlicos.

Especie Origen Especie Origen

Candida albicans ATCC 10231 Candida utilis C9 Clnico
Candida albicans C1, C2, C3, C4 Clnico Candida glabrata C10, C11 Clnico
Candida tropicalis C5, C6 Clnico Candida krusei C12 Clnico
Candida parapsilopsis C7 Clnico Aspergillus nger C49 y C50 Clnico
Candida kefyr C8 Clnico

Tabla 3. Anlisis fitoqumico de las plantas en estudio.

Ensayo W. indica A. farnesiana Ensayo W. indica A. farnesiana

Lactonas Flavonoides +
Triterpenos y esteroides + Cardiotnicos +
Compuestos reductores + +++ Fenoles o taninos o ambos + ++
Saponinas + Alcaloides +/
Quinonas + + Aminas

(-) Reaccin negativa. (+/-) Reaccin dudosa. (+) Reaccin positiva dbil. (++) Reaccin positiva media.
(+++) Reaccin positiva fuerte.

Tabla 4. Rendimiento de slidos solubles totales en los extractos

acuosos y alcohlicos.

A B
Planta % Relacin B/A
W. indica 6,8 12,0 1,7
A. farnesiana 8 10,0 1,2

A Extractos acuosos. B Extractos alcohlicos.

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Cepas
inhibidas
(%)

Fig. 1. Porcentaje de cepas inhibidas por extractos acuosos y etanlicos de W. indica y A. farnesiana.

Tabla 5. Concentraciones Mnimas Inhibitoria (CMI) y Bactericida (CMB) de los extractos etanlicos de W. indica
y A. farnesiana.

W. indica A. farnesiana
CMI CMB CMI CMB
Cepas Origen (mg mL )1

Salmonella enterica serovar Typhi ATCC 7251 R R 100 100

Serratia marcescens ATCC 14056 50 100 R R
Providencia sp. C - 3450 R R 100 100
Alcaligenes faecalis ATCC 1460 50 100 R R
Enterococcus faecalis ATCC 29212 50 50 R R
Escherichia coli ATCC 35150 R R 100 100
Shigella flexneri ATCC 12022 12,5 25 100 50
Staphylococcus aureus ATCC 25923 50 50 100 50
Streptococcus pyogenes ATCC 19615 R R 100 100
Bacillus subtilis ATCC 6633 12,5 25 100 100
Bacillus subtilis Ambiental 100 100 R R

con el extracto de A. farnesiana (4 % de inhibicin). Por mente, sino que pueden contener menor variedad de los
su parte, ambos extractos etanlicos inhibieron el 28 % componentes presentes en el material vegetal extrado.
de las cepas bacterianas. Estos resultados motivaron la Esto puede explicar la mayor actividad antibacteriana
continuacin del estudio de la actividad antimicrobiana encontrada en los extractos alcohlicos con respecto a
con los extractos etanlicos. los extractos acuosos.
Segn lo presentado en la tabla 4, los extractos eta- Solo el extracto etanlico de W. indica a la mayor
nlicos de las races de ambas plantas contienen una concentracin empleada (100 mg/mL) inhibi el creci-
mayor cantidad de compuestos slidos que los extractos miento de C. utilis. Esta especie fngica puede ocasionar
acuosos, lo cual tambin puede implicar que el contenido enfermedades infecciosas en pacientes comprometidos
de los extractos acuosos, no solo sea menor cuantitativa- o infecciones nosocomiales.16 Ninguna otra cepa fngica
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fue afectada por efecto de los extractos evaluados. actividad que el de A. farnesiana. Solo el extracto eta-
De las 25 bacterias, solo siete fueron susceptibles nlico de W. Indica inhibi el crecimiento de la cepa de
frente a cada extracto, (28 %) aunque no fueron los mis- C. utilis. No se detect actividad antifngica sobre los
mos cultivos para ambas plantas (Tabla 5). La menor otros cultivos fngicos.
CMI del extracto de W. indica correspondi a Shigella
flexneri y Bacillus subtilis (12,5 mg mL1). Las restantes REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
CMI de este extracto fueron de 50 mg mL1. En todas las
1. Guerra M, Vega R, Rivero R., Menndez R, Gutirrez A
cepas inhibidas con el extracto de A. farnesiana la CMI y Guerra I. Actividad Antimicrobiana y toxicidad de un
correspondi a la mxima concentracin, al igual que la extracto acuoso de Boerhavia erecta L. Rev Cubana Plant
CMB. El extracto de W. indica tuvo una CMB entre 50 Med. 2004;9(1):1-8.
y 100 mg mL1. 2. Lujn MC, Prez Corral C. Cribado para evaluar actividad
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